卫生学一般研究方法2学时-研究生(5.9).ppt

卫生学一般研究方法,劳动与环境卫生学教研室 张 进 教授,基础理论性研究 探索发病原因、致病机制 在细胞水平相互作用（行为、功能、信息传递和调控） 在蛋白质水平相互作用（应急蛋白形成、功能、代谢的多态性） 在基因水平相互作用（应答、损伤、修复调控、多态性） 确认性研究 确认多种环境介质中有害物对健康影响，研究单一因素和多因素对机体的联合作用；揭示明显、潜在、早期、远期危害；寻找生物标志物,一、卫生学的主要研究内容,新技术方法研究 环境因素：生物因素化学、物理因素 调查内容：环境调查、监测环境与健康效应 研究手段：宏观流行病学调查宏观与微观研究 研究水平：整体、器官、系统细胞、蛋白、基因 蛋白质组学、基因组学、代谢组学等 卫生监督体系的理论研究 国家颁布的法律、法规、条例、规定、办法、规范、规程、标准等需要卫生学提出具体卫生要求和卫生基准，或科学的理论依据,有关“卫生标准”中的几个关系,卫生标准与卫生基准、最大无作用剂量 卫生标准与规范、规程 规范：对行为、条件的要求和规定。（因无法精准定量而形成标准） 军队食堂卫生管理规范 规程：对过程的要求和规定。（技术专业要求强） 士兵体能训练卫生规程 标准：对结果(终点)的要求和规定。 军队战时饮用水卫生标准 卫生标准与卫生法（规定、条例） 卫生法是行政立法，能确保卫生标准执行；卫生标准是卫生执法的科学依据。,二、卫生调查研究方法,现况调查(横断面调查) 在短的时间内，对环境暴露水平和人群健康效应一次调查、评价。,特点： 客观反映特定时间内疾病“三间”分布 评价采取卫生措施前、后的效果 描述环境与疾病关联情况，不能确定因果关系，但可为进一步调查提供基础资料,回顾性调查（病例对照）,在危害发生后，追溯可能病因或有关危险因素的调查方法。 方法：把病例组与对照组调查资料分开进行比较，推断两者之间有无可疑环境病因暴露的差异。,特点： 由结果探讨病因，时间顺序逆向、回顾 对象确定、分组依据 根据历史性资料 调查时间短、成本低，资料可靠性、真实性差,前瞻性调查（定群研究）,据已知病因，长期向前随访，进行由因到果的调查。 方法：将人群分成暴露和非暴露组，追踪各自发病结局，比较两组发病结局差异，确定暴露与发病的关系。,特点： 检验假设明确，检验因素准确 准备充分，受试对照、分组明确，影响因素小 需要前瞻观察一段时间，时间长、成本高 调查结果明显，可靠性强，偏倚小,调查内容,（因果同时) (果因) (因果) 现状调查 回顾 性调查 前瞻性调查,内容：人 群 环境因素,健康状况 临床表现 环境效应,来源、性质 分布、强度 途径、方式 作用时间,是否相关？ 有因果关系？,机体环境效应调查内容,发病率：某时段新病例数与同期平均人口数比值 患病率：特定时段内某病新旧病例数占总人口的比值 死亡率：每年每千人口中死亡人数 相对危险度：暴露组与非暴露组发病（死亡）率比值 生物标志物：接触、效应、易感,剂量-效应：化学物接触剂量与某一生物个体呈现某种 生物效应强度之间的关系。计量单位表示。 （CO HbCO ） 剂量-反应：不同剂量的有害因素对生物群体产生某一特定效应的发生频数。百分率表示。 （SO2 咳嗽）,生物标志物,生物标志：生物体内发生的与发病机制有关联的关键事件的指示物。,暴露生物标志物：机体接触污染物后，在体内能测定到的外来物及代谢产物。如血铅、血镉、加合物,效应生物标志物：在体内可测定的生化、生理改变。 如尿素氮、转氨酶、微核、HbCO 。,易感生物标志物：因遗传因素产生特异的生理、生化改变。如红细胞6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺陷氨基喹啉血管内溶血,有无因果关系判断条件,因果关系的时序性;（暴露在前，结局在后） 观察结果的相似性;（患者临床表现、暴露水平） 关联强度的显著性;（有无剂量-效应，显著否；RR3） 生物学解释的合理性;（能用现代医学理论解释）,因果关系的稳定性;（阳性结果能否在异地重复） 暴露效应的特异性;（暴露因素与特定形态结构、生理、生化改变） 分布的符合性；（环境因子与发病在时间、空间、人群分布是否符合）,现场流行病学调查的局限性,环境暴露因素不易确定； 暴露水平（剂量）定量困难； 混杂偏倚因素较多； 生物弱效应难于发现与评价； 产生效应潜隐期太长，暴露-反应难建立； 获取资料受道德、法律、隐私的限制。,三、实验室研究方法,特点： 暴露因素单一、准确；环境条件 一致 观察对象和指标根据需要选择，有利于探讨毒作用机制,目的：,毒作用大小（剂量）、靶器官 毒物在体内吸收、分布、代谢、排出 毒作用基本特征、蓄积性、剂量-反应 毒作用机制，主要生物学效应 机体出现特异敏感指标（生物标志物） 是否有特殊毒作用（三致作用）,一般毒性实验, 急性毒性试验 时间：实验期7d（14d）以内 特点：以一次（或24h内多次）大剂量染毒，测定LD50 和急性阈剂量；观察毒作用特征；确定靶器官；为亚急性或慢性毒性实验提供必要资料。 急性阈剂量:一次染毒使一组动物中多数开始出现某种效应（生理、生化改变）的最小剂量。,蓄积性试验,概念：检测毒物有无蓄积作用及蓄积毒性大小的试验 方法：（蓄积系数法）小剂量多次染毒动物，引起动物死亡半数的总剂量与LD50的比值。 LD50（n） 蓄积系数 K=- LD50（1）,按蓄积系数对蓄积作用分级,亚急性或亚慢性毒性试验,时间：实验期3090天，剂量LD50 的1/51/30,特点：多次重复染毒（中毒但不死亡） ，观察中毒症状及病理变化特点；有无过敏反应或耐受性；选择敏感观察指标；确定是否需要进行慢性毒性实验，并为慢性实验提供资料,慢性毒性试验,时间：实验期612个月，剂量LD50 的1/101/1000,特点：长期低剂量多次重复染毒，观察有无病理、生理、生化和解剖学的改变；确定主要慢性毒效应和剂量反应关系；确定慢性阈剂量和最大无作用剂量，为制定最高容许浓度提供依据,最大无作用剂量与最高容许浓度,动物最大无作用剂量(mg/kg)×不稳定系数（101000）=人最大无作用剂量(mg/kg) 标准人体重×人最大无作用剂量=人体每日容许摄入量 不同途径摄入量百分比确定 D最=D食物+ D饮水+ D空气 据以上百分比计算人体每日从饮水容许摄入总量 据每人每日饮水量计算暴露物每升水最高容许浓度,致敏性试验,迟发型变态反应实验 速发型变态反应实验 光感作用实验（光毒、光变应） 繁殖试验 使染毒动物连续繁殖两代或三代，观察后代生长发育有变化（隔代遗传） 。观察指标：一般状态、体重、受孕率、活产率、出生存活率等）。,特殊毒性实验,致突变实验：观察毒物对体细胞和生殖细胞有无基因突变（Ames）、DNA损伤（彗星实验）和染色体（微核、SCE）数目与结构改变的影响。 致癌实验：研究毒物对细胞或整体动物有无致癌或促癌作用。,致畸实验：观察毒物对胚胎有无可传递或非传递性致先天性畸形作用。 内分泌干扰作用实验 ：观察毒物有无模拟或干扰动物内分泌机能的作用。,四、医学统计学方法,实验设计与调查设计 处理因素的标准化和对非处理因素控制； 受试对象的同质性、敏感性和可比性要求； 实验效应的关联性、客观性、灵敏性、稳定性、精确性和特异性选择；,遵循均衡、对照、随机、重复的原则。,实验动物选择举例,气体刺激粘膜作用猫 致敏作用豚鼠、家兔 研究实质器官危害小白鼠、家兔 对皮肤刺激作用豚鼠、家兔 呕吐作用猫、狗 高血压模型家兔、狗 体温调节变化家兔、猫,数据处理、资料分析,确定频数分布规律正态性检验 两组人群发病率的比较卡方检验 两组或两组以上平均数比较t检验或F检验 环境暴露因素与健康效应关系相关性检验 一个应变量与多个自变量的线性关系多元线性回归分析,卫生调查研究与实验室研究关系,采用流行病学调查方法从宏观调查中找出病因，经统计学分析初步确定因果关系 根据宏观调查结果指导实验室微观研究阐明有害因素作用机理；确定剂量-效应、剂量-反应；实验结论可以补充、验证流病调查结果；为确定安全接触限量提供科学依据,小 结,什么时候采调查研究？实验室研究？调查与实验室相互结合研究？ 调查与实验研究关系：流行病学方法找出病因，指导实验室进行微观研究，实验结论补充、验证流病调查结果。 确定环境暴露对机体产生有害效应，应按照卫生学研究方法进行，不要轻易下结论！ 环境有害因素对人群影响，具有复杂性、长期性、潜隐性难发现病因！,复杂性的表现方面,环境多因素 暴露多形式 进入机体多途径 人群表现弱效应 临床症状多样性 个体基因多态性,思考题,问答题 卫生学主要有哪些研究方法？ 判断环境对健康影响的无因果关系，需要具备那些条件？ 现场调查与实验室研究的关系如何？,