科学研究溶出曲线.ppt

不忘初心-科学研究溶出曲线,陆步实,江苏省药物研究所有限公司 药品质量一致性评价研究中心,科学研究溶出曲线,1、溶出曲线的重要性 2、溶出曲线的前期准备工作 3、溶出曲线的测定 4、溶出曲线的区分力,1、溶出曲线的重要性,正式稿,征求意见稿,1、溶出曲线的重要性,所谓的溶出派 和BE派的争议,进行溶出试验最重要的目的在于提高BE试验的成功率。体外溶出一致，体内生物等效的概率会大大提高；体外溶出不一致，也可能会出现体内生物等效的情况。在对药物体内吸收机理足够了解的条件下，企业也可以在体外溶出不一致的情况下进入BE试验，最理想的情况是在进入BE试验之前就确保体外多条溶出曲线做到一致。,究竟谁才是临床 疗效一致性的金标准,1、溶出曲线的重要性,1、通过BE试验确认仿制药和原研药的疗效一致。 2、通过溶出曲线研究确立后续的日常监管标准（橙皮书）。,本次一致性评价技术层面的两个目的：,1、溶出曲线的重要性,溶出曲线是BE豁免的依据之一。 溶出曲线是提高BE试验通过率的重要工具。 溶出曲线是筛选处方、日常监管的重要手段。,一致性评价，溶出曲线必不可少！,2、溶出曲线的前期准备工作,溶出仪：必须通过机械验证和性能验证,泼尼松片(崩解型)和水杨酸片(溶蚀型)验证,验证周期为6个月,建议尽可能用自动取样溶出仪，减少人为取样、补液的误差,2、溶出曲线的前期准备工作,验证工具：需要事先经有资质的计量单位计量，并在合格期内。,验证方：可以是用户本身，可以是第三方，可以是生产商。 生产商给其他生产商的仪器进行验证应客观、公正、结论经得 起追溯和追究。,2、溶出曲线的前期准备工作,溶出仪机械验证参数列表,2、溶出曲线的前期准备工作,崩解型、溶蚀型 微粉化、增溶剂、固体分散体 凝胶骨架型、膜控释型、渗透泵型,溶出机理,辅料,甘露醇影响药物吸收 pH依赖型辅料影响制剂溶出,建议在制剂类型、制备工艺、 辅料品种方面和参比制剂保持一致,如果不一致， 比较溶出曲线应慎重,2、溶出曲线的前期准备工作,如果使用UV法，建议对不同介质、不同浓度样品用HPLC法进行比较后确认一致。不同介质分别选择高、中、低3个不同浓度的样品各3份，用两种方法测定。结果应基本一致。,测定方法,溶出曲线测定常用UV法或HPLC法。,即使国外药典采用的是UV法，也尽量采用HPLC法测定溶出曲线，因为药典方法只能保证1个介质、1个时间点的准确性，而不能保证多种介质、不同浓度样品的测定准确。,可采用含量测定或有关物质的测定条件，加大有机相的比例，使保留时间提前，从而节省测定时间。,3、溶出曲线的测定,（1）、pH-溶解度曲线,配制pH1.08.0的介质（采用普通口服固体制剂溶出曲线测定与比较指导原则附件2中的配制方法，也可用其他适宜的方法），取pH=1.0、pKa-1、pKa、pKa+1、6.8、8.0、水各250ml，置具塞锥形瓶中，根据检索的API溶解度数据，分别加入适量的API，置37±1恒温摇床中振摇24h，立即离心，取上清液采用含量测定的方法测定含量，计算饱和浓度，绘制pH-溶解度曲线。,注意离心、配液过程中温度的变化，防止样品析出。,试验终点测定溶液的pH，考察溶液pH是否发生变化。,测定方法应能够同时测定降解产物。,3、溶出曲线的测定,（2）、溶出装置选择,推荐使用桨法、篮法，具体品种参照国外药典、溶出度数据库的方法选择桨法或篮法。 对于片剂，建议采用桨板法；对于胶囊剂，建议采用转篮法 (如采用桨板法，建议采用沉降蓝) 。,注意所参考的方法中是否使用沉降篮等沉降装置，并考察使用的合理性（样品漂浮、RSD较大等）。,3、溶出曲线的测定,（2）、溶出装置选择,3、溶出曲线的测定,（3）、介质选择,在确定API稳定性满足测定要求的前提下，推荐选择不少于3种pH值的溶出介质进行溶出曲线考察，如选择pH值1.2（或1.0）、4.5（或4.0）和6.8的溶出介质。对于pH依赖型药物，可能需在更多种pH值的溶出介质中进行考察。当采用pH7.5以上溶出介质进行试验时，应提供充分的依据。介质的pH值选择可以参考各国标准或FDA、PMDA的溶出度数据库。 肠溶制剂，选择pH1.0、3.5、4.5、6.0、6.8、水。 当考察是否加入表面活性剂时，可考虑吐温、司盘、十二烷基硫酸钠等，具体品种选择可参考待评价产品的各国标准。浓度推荐按0.01、0.03、0.05、0.1、0.3、0.5、1.0%(W/V)依次递增，特殊品种可适度增加浓度，某些特殊药品的溶出介质可使用人工胃液和人工肠液。任何情况下不可使用有机溶剂。,测定溶出曲线无需考虑漏槽条件，在制定质量标准时可选择符合漏槽条件的介质定入标准。,应考察十二烷基硫酸钠的来源、批次对溶出的影响，建议选择中检院提供的溶出测定专用十二烷基硫酸钠。,水可作为溶出介质，但使用时应考察其pH值和表面张力等因素对药物及辅料的影响。,尽量不选择pKa±0.5范围内的点，避免过度区分，造成批内、批间差异。,3、溶出曲线的测定,（4）、介质处理和介质体积,实验时介质需脱气，可采用加热、抽真空的方式。,介质采用抽真空方式脱气时，应先加热至37以上。,体积一般选择500、900、1000ml。 如评估为可能BE豁免的品种，应选择或增加500ml体积。,不可使用小杯法。,3、溶出曲线的测定,（5）、转速选择,一般桨法选择5075转/分钟，篮法选择50100转/分钟。方法建立的过程中，转速的选择推荐由低到高。若转速超出上述规定应提供充分说明。,如果从pH-溶解度曲线推导出在介质中的溶解度达不到剂量的85%（即任何1条溶出曲线在最终时间均不能达到85%，表现为曲线后面几个点没有变化，达到了平台），此时无须提高转速，可直接使用表面活性剂。,在保证实验操作正常的前提下，如偏差仍较大，可适当放宽溶出条件，使偏差合格。例如提高转速510rpm等。,参比制剂RSD不符合要求，应首先本着相信参比的原则，考察实验操作的问题。尽量采用自动取样溶出仪，减少取样、补液带来的误差。自动取样由于管道较长，要考虑管道吸附的影响。,3、溶出曲线的测定,（6）、测定时间和溶出曲线终点判断,酸性介质（pH1.03.0）:5、10、15、20、30、45、60、90、120min，其他介质:5、10、15、20、30、45、60、90、120、180、240、300、360min。如连续两点达85%以上、且两者相差5%以内，可提前结束。 缓/ 控释制剂可为15、30、45、60、90 min 和2、3、4、5、6、8、10、12、24 h。如连续两点达85%以上、且两者相差5%以内，可提前结束。,肠溶制剂因介质pH值的变化可能引起样品降解，应对测定方法进行筛选，保证测定的准确，如阿司匹林肠溶片应同时测定水杨酸和阿司匹林。 缓控释制剂因试验时间较长，样品量大，如不能及时测定，应注意样品的保存，防止样品挥发和降解。,3、溶出曲线的测定,（7）、溶出条件优化,当在截止时间内，药物在所有溶出介质中平均溶出量均达不到85%时，可优化溶出条件，直至出现一种溶出介质达到85%以上。 优化顺序为提高转速，加入适量的表面活性剂、酶等添加物。 建议先增加转速至75r/min，如未达标，添加表面活性剂，添加浓度逐步增加，分别为0.01%、0.03%、0.05%、0.1%、0.3%、0.5%、1.0%，不建议采用1.0%以上浓度。如仍未达标，则再增加转速至100 r/min，但绝不允许添加有机溶剂。,也有学者认为可以在不同介质中选用不同的转速、表面活性剂等，使最终点达到一定的溶出量（60%以上），才可以比较f2因子。溶出量过低，不利于比较。,3、溶出曲线的测定,（8）、滤膜吸附试验或管道吸附试验,通过试验比较过滤和未过滤的对照溶液和样品溶液差别，验证该滤膜的选择是否得当。 如采用标准溶液，比较过滤溶液（弃去适当体积后）和未过滤的溶液结果； 如采用样品溶液，比较过滤样品（弃去适当体积后）和离心分离结果差异。（期间可能存在滤膜孔径及材质筛选） 如为自动取样溶出仪，比较取样样品和离心样品结果差异。 最终需要确定滤膜孔径、材质和取样体积、初滤液体积。,最终需要确定滤膜孔径、材质和取样体积、初滤液体积。,3、溶出曲线的测定,（9）、溶液稳定性,在室温和37条件下采用有关物质检测方法分别测定供试品溶液稳定性（选择不同pH值介质），考察是否有明显降解杂质产生。 如存在较明显降解杂质，溶出曲线检测方法建议采用液相方法进行检测。,必要时进行4的溶液稳定性 ，保证测定的准确。,测定时间应大于溶出曲线时间，必要时适当延长，保证稳定性考察时间能够涵盖整个试验时间。必要时试验可避光。,3、溶出曲线的测定,（10）、曲线测定,按照确定的溶出条件对参比制剂和自研制剂进行溶出曲线的测定，参比制剂3批、自研制剂3批，每批每个介质各12个制剂单位。 参比制剂和自研制剂的批间、批内差异应符合规定。,批间： 36个数据，第一时间点RSD20%，其余各时间点RSD10%。,批内： 第一时间点RSD20%， 其余各时间点RSD10%,3、溶出曲线的测定,（11）、曲线相似性比较,在保证参比制剂批间差异合格的前提下，将3批参比制剂各点的数值取平均值，作为参比制剂的平均值进行比较。 如果参比制剂溶出曲线存在明显的稳定性问题，应和上市时间最短的批号比较，或和自研制剂上市时间接近的批号比较。但是，参比制剂溶出曲线存在明显的稳定性问题，应首先判断这样的差异是否会引起体内行为的差异。,3、溶出曲线的测定,3批仿制制剂f2因子分别为61、62、55,3、溶出曲线的测定,（12）、f2因子计算,首选相似因子f2值比较，f2值应大于50。 15min平均溶出量85%，两种制剂在该介质中溶出曲线相似。 f2值计算一般采用4个取样点，以参比制剂溶出值T/4、T/2、3T/4、T的4个取样时间点计算（T值应85%，并达到平台）。自研制剂采用该4个时间点的溶出值比较。,也可用等时间点的方法计算，但和等溶出量的方法比较，容易出现偏差。,目前SFDA只认可f2值50和15分钟85% 这2个判断标准，其他的条件均不可用。,3、溶出曲线的测定,时间点： 10、20、30、45min F2因子=52,f2因子不是唯一的判断标准，还要结合直观的溶出曲线图进行比较,参比制剂有明显的延迟释放,3、溶出曲线的测定,（13）、剂量倾泻试验,（日本的方法）：在最具区分力的溶出介质中，增加100或200rpm的比较；肠溶制剂再增加pH6.0介质稀释5倍后的比较（离子强度的影响）。 （美国的方法）：或在最具区分力的溶出介质中，增加5%、20%和40%有机溶剂比较。,3、溶出曲线的测定,两种制剂在不同乙醇浓度下的溶出曲线 红色为参比，蓝色为仿制,两种制剂在不同转速下的溶出曲线 50转相似，100转不相似,3、溶出曲线的测定,（14）、刻痕片,如为刻痕片，应考察分割后的溶出曲线，取参比制剂和自研制剂，小心的用刀片分割，称重，取重量在50%平均片重±5%的部分，照上述方法测定溶出曲线，并比较f2值。,3、溶出曲线的测定,（15）、不同溶出仪的溶出曲线比较,用不同品牌、不同型号的溶出仪，照上述方法测定不同介质中的溶出曲线，和上述同批号的样品溶出曲线进行比较，差异应符合规定。,24个数据，第一时间点RSD20%，其余各时间点RSD10%。,3、溶出曲线的测定,不同溶出仪的测定误差,4.溶出曲线的区分力,（1）、科学分析溶出曲线,溶出条件不是机械僵化的选择pH1.0、4.5、水、6.8这4种介质，要根据原研制剂的特征和API的性质科学选择溶出条件。特别是要寻找具有区分力的溶出曲线，并在此条件下，自研和参比制剂溶出曲线务必一致。,注意是多条溶出曲线，不是4条。,4.溶出曲线的区分力,（2）、有区分力的溶出曲线的特征,最能体现产品内在品质 最适合评估仿制制剂处方筛选与工艺开发 最能在制剂体外溶出行为比较时体现出差异性 最具有体内外相关性 最适合订入质量标准,4.溶出曲线的区分力,（3）、国内质量标准,为了让产品合格而拟定试验参数，质量标准均较为宽松(高转速、高浓度表面活性剂甚至有机溶剂、采用溶解度大的溶出介质等)。 有些产品受当时测定条件的限制，采用了小杯法等等。,无区分力，借鉴性不强。,4.溶出曲线的区分力,（4）、国外标准与进口标准,深度研究原研制剂后发现，标准中的条件很多不具区分力。原研企业将最具区分力的内控方法予以保密，对外公开较为宽松的货架期质量标准。,具有 “隐晦性”,缬沙坦氨氯地平片 进口标准： 65转，pH6.8+0.5%吐温； FDA数据库：50转，pH6.8,4.溶出曲线的区分力,（5）、溶出度数据库,日本品质再评价溶出度数据库 美国FDA溶出度数据库 数据库相对于质量标准，更严格、更合理，但有些品种的溶出条件仍不具有区分力。,两条曲线溶出过快 两条曲线溶出过慢,4.溶出曲线的区分力,（6）、高水溶性药物,BCS I类、BCS III类药物不存在这个问题，因为药物的生物等效性不受药物溶出的影响，即建立体内体外相关性比较难。 但此类制剂需要注意原研制剂有时会根据药物性质将制剂做得溶出慢或者有延迟释放。,BCS I类 酸性介质中明显偏慢,4.溶出曲线的区分力,4.溶出曲线的区分力,（7）、pH 值依赖性药物制剂,绘制pH-溶解度曲线图，对溶解度急剧变化的pH 值段予以细分(±0.5)，找到45 60 min 达85的pH 值介质和90 120 min 达85的pH 值介质，且溶出曲线应无拐点和突释，这样的两条曲线被认为最具区分力。必要时可配合转速的调整，使溶出达到上述要求。,4.溶出曲线的区分力,（8）、难溶性口服固体制剂,如在50r/min条件下任一介质中，制剂在120min时的溶出率均达不到85，则建议放宽溶出度试验参数，但仍应尽可能采用低转速和低浓度表面活性剂，并且以45120min 溶出率达85的条件确定具有区分力的溶出行为。,和“除酸性条件外其他介质取样时间为6小时”是有区别的。,4.溶出曲线的区分力,（9）、治疗窗狭窄的药物制剂,考虑到安全性的问题，此类药物的体内/外释放行为极为关键，质量标准中常拟定两点法：第一时间点防止突释，第二点保证全部释放。,卡马西平片，日本溶出曲线数据库拟定5min不得超过60和30min不得少于70；美国药典拟定10min 释放量应为3050，45min时不得少于75。,4.溶出曲线的区分力,（10）、缓控释制剂,一般设定50r/min，曲线应呈缓慢上升状，且无突释和拐点。 应分别比较不同转速下与原研制剂溶出曲线的一致性： 50r/min(呈现24h释放情形) 100r/min(呈现12h释放情形) 200r/min(呈现8h释放情形),参比和自研制剂释放机理须一致,4.溶出曲线的区分力,（11）、肠溶制剂, 100 r/min，pH 1.2 介质(2h)，释放量不得超过10.0。 100 r/min，pH 4.5 介质(2h)，释放量不得超过10.0。 50 r/min，pH 6.0 介质，注意原研制剂的延迟释放。 100 r/min，pH 6.0 介质，注意原研制剂的延迟释放。 50 r/min，pH 6.8 介质，注意原研制剂的延迟释放。 50 r/min，pH 1.2 介质(2h)+pH 6.8 介质。模拟药物在人体内的实际情形应进行混合介质的研究。 50 r/min，pH 4.5 介质(2h)+pH 6.8 介质。,4.溶出曲线的区分力,（12）、具有区分力的溶出曲线的验证,（1）可以做几种不同处方（最好是经过BE证实不等效的），分别测定，看是否有区分力。 （2）可以买国外已经上市的同品种仿制药（已经证实是生物等效的），测定后曲线应该一致。,4.溶出曲线的区分力,（13）、其他,对于pH依赖性的API，应重点考虑药物在体内的吸收部位和吸收速率，如果是酸性中溶解度高，而药物吸收主要在肠道，则应重点考察pH4.06.8的介质中的拟合情况，反之则应重点考察pH1.04.0介质中的拟合情况， 溶出曲线不能抛开BCS分类和药动学单独考虑。,5.不忘初心-我们的建议,溶出曲线不是做给SFDA看的，溶出曲线是质控的重要标准，是监管的有力手段，是品牌的价值体现！ 为了减少批间差异，为了提高BE的通过率，为了保证产品的质量，为了提升产品的品质，尽量多做一些溶出曲线的研究！,本人单位及联系方式,联系方式： 江苏省药物研究所 联系地址： 南京市马家街26号 网 址： http:/jsyws.njtech.edu.cn/ 联 系 人： 陆步实 严相平 电 话： 025-58139411 025-58139401 传 真： 025-58139400 一致性评价QQ群：466840090 手 机：13951707463 13851564410 邮 箱： bushi89163.com yanxpsci001sina.com 邮 编： 210009,THANKS,