临床免疫学和免疫检验.ppt
2019年9月2日,绪论,陶 义 训,临床免疫学和免疫检验,2019年9月2日,全国高等医药院校教材 （供医学检验专业用）,临床免疫学和免疫检验 第3版 2003 免疫学和免疫学检验 第1版 1989 第2版 1997,2019年9月2日,医学检验 Medical Laboratory 检验医学 Laboratory Medicine,2019年9月2日,检验项目的发展 对临床有重要的意义,诊断 治疗 预后 预防,2019年9月2日,诊断,感染性疾病 HIV感染， HBV, HCV感染 SARS，禽流感 心血管疾病 急性心肌梗死 肌钙蛋白 肌红蛋白 CK-MB 心衰 BNP,2019年9月2日,治疗 预后,肿瘤标志 C-反应蛋白和炎症,2019年9月2日,CA 19-9 （Cancer Antigen19-9,Carbohydrate Antigen 19-9）,0 2 4 6 8 10,10,100,1,000,10,000,肿瘤进展,稳定状态,肿瘤缓解,CA 19-9U/ml,Rx: 5 FU+MTX 5 FU+BCNU Mitomycin C,化疗中CA 19-9的监控,月份,2019年9月2日,CRP 炎症-抗生素治疗,2019年9月2日,预防 （风险因子）,2019年9月2日,高敏C-反应蛋白 hs-CRP 初级风险预测 （高血脂，高血压，糖尿病，吸烟史）,心血管疾病风险预测,2019年9月2日,心梗风险指标,PM Ridker, N Engl J Med 2000,2019年9月2日,免疫检验,免疫检验技术 免疫检验的临床应用,2019年9月2日,免疫检验技术,细胞免疫检验技术 免疫细胞的检测 细胞因子的测定 体液免疫检验技术 抗原、抗体、补体······的测定 免疫测定,2019年9月2日,免疫测定 IMMUNOASSAY( IA),抗原抗体 抗原抗体复合物 Ag Ab Ag-Ab,2019年9月2日,免疫测定分类,免疫浊度测定 Ag + Ab AgAb + Ab 标记免疫测定 Ag + Ab* Ag Ab* + Ab* （B） （F）,2019年9月2日,免疫测定分类,均相免疫测定 HOMOGENOUS IA 在测定中结合的反应物(B)与游离的反应物(F) 不需要分离 异相免疫测定 HETEROGENOUS IA 在测定中需要分离(B)和(F),2019年9月2日,免疫测定的敏感度,免疫浊度测定 µgng 标记免疫测定 ngpg,2019年9月2日,标记免疫测定 放射免疫测定 1960 酶免疫测定 1970 荧光免疫测定 19801990 化学发光免疫测定 1990 膜固相免疫测定 1990,2019年9月2日,可测定项目 均相免疫测定,-1-酸性糖蛋白 -1-抗胰蛋白酶 白蛋白（投射比浊） 载脂蛋白A1 载脂蛋白B 抗O 补体C3c 补体C4 铜蓝蛋白 C反应蛋白 铁蛋白 触珠蛋白 糖化血红蛋白 免疫球蛋白A 免疫球蛋白G 免疫球蛋白M Kappa轻链 Lambda轻链 脂蛋白a 肌红蛋白 前白蛋白 类风湿因子 可溶性转铁蛋白受体 转铁蛋白,对乙酰氨基酚 氨甲酰氮卓 地高辛 洋地黄毒苷 庆大霉素 苯巴比妥 苯妥因 普鲁卡因 水杨酸盐 茶碱 妥布拉霉素 丙戊酸,特定蛋白,治疗药物监控,滥用药物,乏碳水化合物转铁蛋白 苯丙胺 巴比妥酸盐 苯二氮 大麻 可卡因 乙醇 美沙酮 鸦片 苯环利啶 右丙氧芬,2019年9月2日,可测定项目 异相免疫测定（一）,乙型肝炎表面抗原 乙型肝炎表面抗体 乙型肝炎e抗原 乙型肝炎核心抗体 乙型肝炎核心抗体IgM 甲型肝炎抗体 甲型肝炎抗体IgM 丙型肝炎抗体 HIVcombi,甲胎蛋白 癌胚抗原 总前列腺特异性抗原 游离前列腺特异性抗原 糖类抗原125 糖类抗原15-3 糖类抗原19-9 糖类抗原72-4 神经元特异烯醇化酶 细胞角蛋白片断21-1,传染病,肿瘤标志物,贫血,铁蛋白 维生素B12 血清叶酸 红细胞叶酸,骨质疏松,甲状旁腺激素 骨钙素 -胶原特殊序列 25-(OH)2VitD,2019年9月2日,可测定项目 异相免疫测定（二）,促甲状腺激素 三碘甲腺原氨酸 甲状腺素 游离甲状腺素 游离三碘甲腺原氨酸 甲状腺球蛋白 抗甲状腺球蛋白 抗甲状腺微粒体抗体 甲状腺吸收率,肌钙蛋白T 肌酸激酶同工酶 肌红蛋白 脑钠素前体 地高辛 洋地黄毒苷,甲状腺,心梗标志,糖尿病及其他,胰岛素 免疫球蛋白E,2019年9月2日,检验技术的进展,自动化 简便化,2019年9月2日,自动化分析,提高工作效率 提高精密度（CV%） 手工操作误差 分析仪系统误差,2019年9月2日,自动分析系统,自动分析仪 配套的测定试剂 配套的校准品,2019年9月2日,检测系统,校准品,试剂,仪器,检测方法,2019年9月2日,自动分析系统 （ 仪 器 + 试 剂 ）,校准品,2019年9月2日,生化自动分析系统,生化测定,分析物 试剂,产物,吸光度,（化合物）,（化合物）,化学反应,温度、时间,（化合物）,分光光度计,波长(nm),(A),2019年9月2日,免疫自动分析系统,免疫测定,分析物 试剂,产物,（抗原）,（抗体）,化学反应,温度、时间,（抗原抗体复合物）,均相免疫测定,异相免疫测定,2019年9月2日,免疫自动分析系统,均相免疫测定（B，F不需分离）,直接在生化自动分析仪中 测定,免疫浊度测定 均相酶免疫测定,2019年9月2日,血清标本可测定的项目,生化测定 标记免疫测定 均相免疫测定 肝功能 甲状腺功能 特定蛋白 药物 肾功能 激素 免疫功能 镇静剂 心血管疾病 肿瘤标志 心血管疾病 抗生素 糖尿病 心肌标志 炎症 心血管病药 电解质 感染性疾病 营养监测 毒品 50项 50项 50项,2019年9月2日,模块式自动分析仪 Modular 同类型的模块可以整合在一起测定 生化模块 P800 D2400 电解质模块 ISE900/1800 标记免疫模块 E170,2019年9月2日,2 Core Unit 核心模块,1 Control Unit 操作单位,血清工作区 Serum Work Area (SWA) 生化，免疫联合自动分析系统,3 ISE 900/1800 module: 电解质测定模块 4 D 2400 module: 生化测定模块 5 P 800 module: 生化测定模块 6 E170 module: 免疫测定模块,2019年9月2日,简 便 化,简便快速 单份测定 仪器小巧 试剂稳定,2019年9月2日,POCT检验医学的新领域,2019年9月2日,POCT名词解释,Point-of-care testing point 时间、地点 care 保健 testing 检验,2019年9月2日,与POCT相关的名词,医师诊所检验 家用检验 检验科外的检验 分散检验,床边检验 病人身边检验 就地检验 即时检验,2019年9月2日,POCT与中央检验,在医院检验科集中进行的检验称为中央检验（centralized testing）,2019年9月2日,中央检验工作环节,2019年9月2日,检验周转期,从采取标本到送出检验报告所花的时间称为检验周转期（turnaround time，TAT）,2019年9月2日,医院内和医院外的POCT,2019年9月2日,医院内的POCT,急诊检验室 门诊检验室 分科门诊POCT 手术室POCT 监护病房POCT 小儿科POCT 特殊病人的床边POCT,2019年9月2日,医院外的POCT,医师诊所 医务室 救护车上 事故现场 出入境检验 家庭,2019年9月2日,POCT技术,简便快速 单份测定 仪器小巧 试剂稳定,2019年9月2日,金标记膜固相免疫测定,2019年9月2日,固相免疫测定 (B)和(F)的分离 （ELISA）,Ab,Ag +,+Ab*,Ab,Ag,Ab*,Ab* Ab*,2019年9月2日,膜固相免疫测定 （Membrane based immunoassay）,以微孔膜（硝酸纤维素膜）为固相 以有色微粒（红色的胶体金）为标记物 简便快速测定,2019年9月2日,固相微孔膜,硝酸纤维素膜 孔径：0.20.6 µm,2019年9月2日,2019年9月2日,硝酸纤维素膜与聚苯乙烯微孔板的比较,2019年9月2日,胶体金标记,2019年9月2日,胶体金（Colloidal Gold） 1560 nm,优 质,劣 质,2019年9月2日,胶体金结合物 CONJUGATE,2019年9月2日,胶体金结合物（Conjugate）,2019年9月2日,膜固相免疫测定分类,免疫渗滤测定 （IMMUNOFILTRATION ASSAY，IFA） 免疫层析测定 （IMMUNOCHROMATOGRAPHIC ASSAY，ICA）,2019年9月2日,IFA 穿流（FLOW TROUGH） ICA 横流（LATERAL FLOW）,2019年9月2日,免疫层析测定 ICA,2019年9月2日,2019年9月2日,ICA 试剂条结构示意图,样 品 垫,结 合 物 垫,NC 膜,吸 水 垫,2019年9月2日,ICA 双抗体夹心法测抗原,2019年9月2日,ICA 间接法测抗体,2019年9月2日,ICA 结果观察,阳性,阴性,无效,2019年9月2日,膜固相免疫测定的特点,2019年9月2日,金标记膜固相免疫测定的特点 Point of Care Testing（POCT）,即时单人份测定 试剂简单，易于保存。 操作简便，不需仪器。 测定快速，肉眼判断。,2019年9月2日,谢 谢,
