乙肝病人血浆中触珠蛋白和补体B因子的检测及临床意义.doc

乙肝病人血浆中触珠蛋白和补体B因子的检测及临床意义?192?公#卫生与临京医学2009f'53州PublicHealthandClinicalMedicineVolume5,Number3,Aug2009乙肝病人血浆中触珠蛋白和补体B因子的检测及临床意义王冯滨,杨海英,欧强摘要:目的探讨触珠蛋白(HP)和补体B因子(CFB)在乙型肝炎(以下简称乙肝)中的变化规律及其临床意义.方法采用ELISA检测乙肝病人和正常健康者血浆HP和CFB表达水平.同时检测凝血酶原活动度(PTAo结果慢性乙型肝炎(以下简称慢乙肝)和慢性重型乙型肝炎组(以下简称慢重乙肝组)血浆HP和CFB表达水平明显降低,与正常对照组比较有非常显着性差异(P<0.01);慢乙肝和慢重乙肝组两组之间血浆HP和CFB表达水平比较亦有非常显着性差异(P<0.O1o与存活组相比,死亡组的PTA值,血浆HP和CFB水平明显降低,差异有显着性(P<O.05或P<0.01o结论乙肝病人血浆HP和CFB表达水平明显下降.血浆HP和CFB水平的检测对评估乙肝病人肝功能损害的严重程度和判断预后具有重要的参考价值.关键词:乙型肝炎;触珠蛋白;补体B因子;预后中图分类号:R512.62文献标识码:AThedecreaseofhaptoglobinandcomplementfactorBwiththediseaseprogressioninpatientswithviralhepatitisBWANGFengbin,YANGHaiying,OUQiang(DepartmentofInfectionsDisease,PublicHealthClinicalCenterAffiliatedtoFudanUniversityShanghai,20150&China)Abstract:ObjectiveToquantifythehaptoglobin(HP)andcomplementfactorB(CFB)inpatientswithviralhepatitisBinfectionatdifferentclinicalstages.MethodsPlasmaHPandCFBwerequantifiedbyEnzymelinkedImmunosorbentAssay(ELISA)in85patientswithviralhepatitisB.PlasmaPTAwerealsodetermined.ResultsThelevelsofPlasmaHPandCFBinchronichepatitisandseverechronichepatitisgroupsweresignificantlylowerthanthatinhealthydonorgroup(P<0.01).SignificantdifferencesonplasmaHPandCFBwerealsoobservedbetweenchronichepatitisandseverechronichepatitisgroups(P<0.O1).ThelevelofplasmaHP,CFBandminthegroupwithdeathoutcomeweredramaticallylowerthanthatofalivegroup(P<O.05orP<O.01),ConclusionsThelevelsofplasmaHPandCFBdecreasedinpatientswithviralhepatitisBduringthediseaseprogressionandhaveimportantimplicationstoevaluatethedamageofliverfunctionalityandtojudgetheprognosis.Keywords:HepatitisB;Haptoglobin(HP);ComplementfactorB(CFB);Prognosis肝脏是机体解毒,生物合成和生物转化的重要器官.乙型肝炎(以下简称乙肝)病人由于肝细胞变性,坏死,造成严重的蛋白合成障碍,代谢紊乱以及有毒物质的积聚,血浆中的蛋白质和多肽也必然发生明显改变.我们通过差异蛋白质组学方法研究发现慢性重型乙型肝炎(以下简称乙型慢重肝)病人血浆中触珠蛋白(haptoglobin,HP)和补体B收稿日期:200812-28;修回日期:20090126基金项目:上海市卫生局青年课题(2007041),中尉肝炎防治基金会课题(200704)作者单位:上海市(复旦大学附属)公其卫生临床中心感染科,L海201508作者篱介二E冯滨(1951),(汉族),上海市人,大学本科学历,主任医师,科主任.主要研究方向:病毒一:肝炎的诊治.:#论着术因子(ComplementfactorB,CFB)水平与健康正常人有显着差异.为进一步探讨乙肝病人触珠蛋白和补体B因子的变化及临床意义,我们采用ELISA方法检测85例乙肝病人血浆中该两种蛋白含量,现总结如下.1对象和方法1.1对象选择2007年6月至2008年5月在本中心肝病科住院的乙肝85例,其中慢乙肝45例,慢重乙肝40例,所有病例均符合2000年西安会议修订的病毒性肝炎防治方案诊断标准.选择30例体检无异常者作为正常对照组.两组在年龄和性公共卫生与临床医学2009讹53PublicHealthandClinicalMedicineVolume5.Number3.Aug2009?193?别组成上无显着的统计学差异.1.2方法1.2.1实验室检测清晨采集病人和对照组空腹静脉血5mL(EDTA抗凝),4下2000r/min离心10min,上清液在4下2400r/min离心5min后,分装到硅烷化EP管中,80C保存备用.采用ELISA方法检测血浆中触珠蛋白和补体B因子水平.试剂盒购自武汉中美科技有限公司,按说明书严格实验操作.采用全自动血凝仪严格按说明书操作进行凝血酶原活动度(PTA)检测.PTA正常值为80%120%.1.2.2统计学处理计量数据用(±S)表示,多个均数两两比较用SNKq检验.所有数据均在计算机中经PEMS3.1统计软件处理.2结果2.1各组血浆触珠蛋白和补体B因子水平检测结果比较健康对照组血浆触珠蛋白和补体B因子水平明显高于慢乙肝组和慢重乙肝组,经统计学处理,有非常显着性差异(P<0.O1);而慢乙肝病人血浆触珠蛋白和补体B因子水平高于慢重乙肝组,P<0.01,差异非常显着,见表1.表I各组血浆触珠蛋白和补体B因子水平检测结果比较Table1ThelevelofthehaptoglobinfHP1andcomplementfactorB(CFB)inpatientsatdifferentclinicalstageswithHBVinfectionNote:comparedtothecontrolgroup,P<0.01;#comparedtochronicHBVinfection,p<0.01.2.2血浆触珠蛋白和补体B因子水平对疾病预后的影响乙肝病人死亡组血浆触珠蛋白和补体B因子水平及PTA与存活组比较差异有显着性(P<0.05或P<0.01),见表2.表2两组血浆触珠蛋白和补体B因子水平变化的比较Table2ThelevelofplasmaHP,CFBandPTAinthegroupwithdeathandaliveoutcoltle3讨论蛋白质是生命存在和运动的物质基础.生理功能的维持以及病理性变化需要蛋白质参与.研究疾病发生发展中蛋白质含量的变化,将有助于了解疾病的发生机制和病情的评估.血浆HP又称结合珠蛋白,是C【2球蛋白中的一种糖蛋白,平均分子量为10000,由0【和B2条多肽链组成.血浆HP主要由肝脏合成,脾脏和胸腺等网状内皮系统也能合成分泌J.CFB又称C3激活剂前体,为733个氨基酸残基组成的单链糖蛋白,主要由肝脏和巨噬细胞合成.CFB能与补体因子3B结合生成补体C3或C5转化酶,同时也参与激活B淋巴细胞的增殖和分化,外周血单核细胞的快速扩散,红细胞的裂解等.为探讨HP和CFB在乙型肝炎中的变化情况及其临床意义,我们采用ELISA法检测了85例乙肝病人血浆HP和CFB水平,结果发现慢乙肝和慢重乙肝病人HP和CFB均明显降低,与正常对照组比较有非常显着差异(P<0.O1).同时我们还观察到慢重乙肝病人HP和CFB降低程度相对于慢乙肝更为明显,两组比较亦有显着性差异(P<0.01).研究结果提示肝炎病人血浆HP和CFB水平随着肝功能损害的加重而逐渐下降,血浆HP和CFB水平在一定程度上可以反映肝细胞受损的严重程度.HP降低的原因尚不明确,大多认为病毒性肝炎尤其是慢重乙肝,由于肝功能受损及大量肝细胞坏死,导致HP合成减少.CFB在乙肝病人血浆中低表达,推测由于乙肝病人体内发生过激的免疫应答,激活补体系统,引发多种生物学效应,导致补体消耗,同时肝脏合成补体功能下降,进一步降低血浆中的补体水平l4l.确切机制有待进一步研究.为了解HP和CFB变化与疾病预后的关系,我们比较了乙肝存活组和死亡组的PTA,血浆HP和CFB水平,结果发现死亡组的PTA值,血浆HP和CFB水平明显低于存活组,两组比较差异有显着性(P<0.01).研究提示血浆HP和CFB与PTA一样是判断预后的敏感和可靠指标之一.血浆HP和CFB水平下降越低,则病人存活率越低.综上所述,乙型肝炎病人血浆HP和CFB可出现不同程度的降低.我们认为血浆HP和CFB是反映肝功能损害严重程度的可靠指标,并对判断疾病预后具有一定的参考价值.参考文献1SchrammA,ApostolovO,SitekbB,eta1.Proteomics:techniquesandapplicationsincancerresearchiJ.ClinPadiatr,2003,215:293297.2传染病与寄生虫学会.病毒性肝炎防治方案J.中华传染病杂志,(以下转第210页)公共卫生与临床医学2009ft:53PublicHealthandClinicalMedicineVolume5,Number3,Aug2009【9】10】12】13J14】【15】16【l7J18【19】f20516.ColliA,CoccioloM,RivaC,etalAbnormalitiesofDopplerwaveformofthehepaticveinsinpatientswithchronicliverdisease:correlationwithhistologicfingingsJ.AJRAmJRoentgenol,1994,162f41:833837.盂繁坤,郑颖,葛辉玉,等.慢性肝炎肝静脉彩色多普勒超声频谱改变与肝纤维化分期卡H关性的研究J】.中华超声影像学杂志,2006,15(4):297299.BernatikT,Strobe1D,HahnEG,eta1.Dopplermeasurements:asurrogatemarkerofliverfibrosisJ?EurJGastroenterolHepato1.2002,14(4):383387.XiongWFZhaoBZ.TheinfluencesofultrasonicmachinesettingoBthemeasurementofintegratedbackscatterJ.ChinJUltrasonogr,2000,9(9):566568陈莉莉,易行政.探讨实质组织三维超声成像的临床应用JJ.中国超声医学杂志,2003,19(12):946947.XuHX,LuMD,ZhouYQ,etalThreedimensionalgrayscalevolumerenderingoftheliver:preliminaryclinicalexperienceJUltrasoundMed,2002,21(9):961970.GramiakR,ShahPM.EchocardiographoftheaorticrootJ.Inve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