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    核酸定量荧光计校准规范.docx

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    核酸定量荧光计校准规范.docx

    1、中华人民共和国地方计量技术规范JJF(翼)3024-2023核酸定量荧光计校准规范Ca1.ibrationSpecificationforF1.uorescenceMetersofNuc1.eicAcid2023-07-01实施2023-05-31发布河北省市场监督管理局发布JJF(冀)3024-2023核酸定量荧光计校准规范Ca1.ibrationSpecificationforF1.uorescenceMeicrsOfNucIcicAcid归口单位:河北省市场监督管理局起草单位:河北省计量监督检测研究院北京市计量检测科学研究院天津计量监督检测科学研究院本规范委托河北省计量监督检测研究院负责

    2、解释本规范主要起草人:刘红彦(河北省计量监督检测研究院)史盼敬(河北省计量监督检测研究院)赵雨佳(北京市计量检测科学研究院)常子栋(天津计量监督检测科学研究院)参加起草人:杨迪(河北省计量监督检测研究院)梁亮(北京市计量检测科学研究院)范培蕾(北京市计量检测科学研究院)目录引言(11)1范闹1)2概述(I)3计量特性(I)4校准条件1)4.1 环境条件(I)4.2 测量标准及其他设备(I)5校准项目和校准方法2)5.1 示值误差(2)5.2 测量重任性(2)6校准结果表达2)7曳校时间间隔(3)附录A校准记录格式(推荐)(4)附录B校准证书内页格式(推荐)6)附录C示值误差的不确定度评定示例7

    3、)引言JJF1071-2010国家计砧:校准规范编写规则3,JJF1001-2011通用计量术语及定义、JJF1059.1-2012测量不确定度评定与表示共同构成支撑本规范制修订工作的基础性系列规范。本规范的制定,参考了JJF1836-2020微量分光光度计校准规范和JJF1828-2020ATP荧光检测仪校准规范相关内容。本规范为首次发布。核酸定量荧光计校准规范1范围本规范适用于测量双性DNA浓度在(10-100)ng1.范围的非扩增型核酸定量荧光计的校准。2概述核酸定量荧光计(以下简称荧光计)的原理是荧光染料和核酸分子特异性结合后在特定波长卜一发光,发光强度与核酸浓度成正比,根据荧光强度可

    4、以推算出样本中的核酸浓度。荧光计由光源、检测仓、控制面板以及数据采集信号处理系统组成3计量特性仪涔各项计量特性指标见表IoI核酸定量荧光计计量特性指标计量项目计量特性示值误差不超过20%测后池复性W10%注:以上计量特性要求是基于双镂DNAiw计模式得到,仅供参考,不作为判定依据,4校准条件4.1 环境条件4.1.1 环境温度:(153O)4C.4.1.2 相对湿度:(15-70)%。4. 1.3供电电源:电压平均值(ng1.)示值误差(%)扩展不确定度:、二量施复性标准物质标准假(ng1.)测值(ng1.)平均值(ng1.)气更性(%)扩展不确定度(.k=2)附录B校准证书内页格式(推荐)校

    5、准结果校准项目校准结果示例误差标准物质标准值(ng11.)测量(ftng1.)示值iR差(%)扩展不确定度(*=2)测Ift型更性标准物质标准值ng1.)测量值测肤Hi复性(%)扩展不确定度(*=2)核验员:校准员:附录C示值误差的不确定度评定示例C.I概述C1.I测量方法选择ThCrmOFishcr公司的QUbiM型核酸定量荧光计进行校准。根据校准规位的要求,通常选择(10700)ng1.浓度范围内的核酸标准物质,盎复测量3次,计算示值误差。C.I.2测量标准标准物痂:国家有证双链DNA标准物质,浓度范闱(IOMOO)ng1.,相对扩展不确定度UId10%(Jfc=2)。移液器:(1-10)

    6、g1.、(2O*-2OO)1.C.2测量模型示值相对误差的测量模型为:V-X100%X、c.D式中:X示值误差,%;-X仪器3次测址值的算术平均值,nfr1.;Xo标准物质的标准值,ng1.o两个址又和X1.)相互独立,根据公式(C1.),相对示值误差的合成标准不确定度可表示为:3)=符(丁)+6(1)c.2)式中,星敏度系数I,灵敏度系数:”二-1。axa、,、C.3不确定度来源分析示值误差校准结果的不确定度来源主要为:a)测量平均值引入的不确定度分量,(k):b)标准物质的标准值引入的不确定度分量“(X。)。C.4各不确定度分量的评定C.4.1测量平均值引入的不碑定度分量“(3)该不确定度

    7、分量由测量重览性引入,在(01.(X)ngU1.范闹内,选择浓度为31.4ng411.和85.7ng1.的国家有证双链DNA标准物质,分别重更测量IO次,数据见表C.I。按照贝寒尔公式(C.3)计算标准偏差,计算得出的标准偏差即为单次测量值的不确定度,实际校准时,仪器示值采用3次测证值的平均值,因此测量平均值的标准不确定度按照公式(C.4)计算,计鸵结果见表C.I。1.(A.-x)j.Jj三(C.3)(C.4)表C.I重复性引入不确定度皴据标准值(ng,1.)测肽值(np,1.)5(ng1.)小)计算得到标准不确定度N(凡),见表C.2。M(X11)=X11XC.5)表C.2标准物质引入的不确

    8、定度标准值(ng1.)相对扩展不确定度Uni(k=2)标准不确定度”(X。)31.49.8%1.54ng,1.85.73.0%1.29ng,1.C.6合成标准不确定度由表C.3中标准物质的标准值和两次测量结果的平均值,分别计算得到灵敏度系数G和G。按照公式(C.2)示值误差测量结果的合成标准不确定度见表C3表C.3合成标准不确定度标准值ng(1.)泅量(ftng1.)平均值(ng,1.)G币)QH(Xo)z(k)I2331.435.435.135.935.50.0320.31-0.0361.545.7%85.781.482.481.881.90.0120.220.0111.291.5%C.7扩展不确定度U=U(X)(C.6)取包含因子Q2,由公式(C6)计算得到示值误差的扩展不确定度见表C.4。表C.4合成标准不确定度及犷展不确定度标准值ng,1.)平均值(ng1.)合成标准不确定度扩展不确定度(*=2)31.435.55.7%11.4%85.781.913%3.0%JJF(冀)3024-2023


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