15-酮基二十碳四烯酸对大鼠离体肺动脉环的作用.pdf

中国药理学通报C h i n e s e P h a r m a c o l o g i c a l B u l l e t i n 2 0 0 6 N o v ; 2 2 ( 1 1 ) ; 1 3 3 9 - 4 3 ·1 3 3 9· 1 5 - 酮基二十碳四烯酸对大鼠离体肺动脉环的作用 郭守 利 ， 张一飞， ， 刘 哗 ， 朱大岭 ,2 ,3 ( 哈尔滨医 科大学1 . 第二临床医学院药学部; 2 . 药学院; 3 . 黑龙江省生物医药工程重点实 验室， 黑龙江哈尔 滨1 5 0 0 8 6 ) 中国图书分类号: R - 3 3 2 ; R 3 2 2 . 1 2 1 ; R 3 2 9 . 2 4 ; R 3 3 1 . 3 2 ; R 4 4 2 . 9 ; R 8 4 5 . 2 2 文献标识码: A 文章编号: 1 0 0 1 - 1 9 7 8 ( 2 0 0 6 ) 1 1 一 1 3 3 9 一 0 5 摘要: 目的用组织浴槽血管环技术研究 巧一 酮基二十碳四 烯酸( 1 5 - K E T E ) 收缩大鼠离体肺动脉的作用及其离子通道 机制。 方 法 1 6 只 健康的W i s t a r 大鼠， 体 重为( 2 2 0 土 2 0 ) g ， 一 随机分为两组( n = 8 ) ; 正常组置于正常环境中饲养( F i 0 2 二 2 1 %) ， 缺氧组置于缺氧的培养箱中饲养( F i O : 二 1 0 %) ， 连续 饲养9d 后处死， 游离直径为 0 . 5一1 . 0 m m肺内肺动脉 ( P A ) 剪成3 m m长的血管环， 观察钾离子通道阻断剂、 L - 型 钙离子通道阻断剂和无钙离子K r e b s 液对1 5 - K E T E 诱导的 正常和缺氧大鼠肺动脉环收缩的影响。结果 1 5 - K E T E 以 浓度( 1 0 - 8 一 1 0 - 6 m o l · L - 1 ) 依赖的 方式收 缩大鼠 离体肺 动脉环; 2 m m o l · L 一 4 - 氨基毗咤( 4 - a m i n o p y r id i o n e , 4 - A P ) 可明显降低 1 5 - K E T E 收缩大鼠离体肺动脉环的作用， 正 常组和缺氧组的结果相似; 3 1 0 m m o l · L - 四乙 胺( t e t r a e t h - y la m m o n iu m , T E A ) ' 1 0 - 6 m o l · L - 格列本脉 ( g ly b u r id e , G L Y B ) 对1 5 - K E T E 收缩大鼠 离体肺动脉环的作用无明显影 响; 1 0 - 6 m o l · L - 硝苯地平( n if e d i p i n e ) 和 无钙K r e b s 液 对1 0 - 6 m o l “ L - ' 1 5 - K E T E引起的离体肺动脉环收缩具 有显著抑制作用。结论1 5 - K E T E收缩离体肺动脉环的作 用依赖于K v 通道、 细胞外液钙离子和L - 型钙离子通道。 关键词: 1 5 - K E T E ; 肺动脉环; 缺氧; 钾通道阻断剂; 钙离子通 道阻断剂 收稿日 期: 2 0 0 6 - 0 7 - 2 7 ， 修回日 期: 2 0 0 6 - 0 9 - 1 5 基金项目: 国 家自 然科学基金资助项目 ( N o 3 0 3 7 0 5 7 8 ; 3 0 4 7 0 7 5 2 ) 作者简介: 郭守利( 1 9 7 1 一) 男， 博士生， 研究方向: 动物生理学， T e l 0 4 5 1 - 8 6 6 0 5 5 5 4 , E - m a i l : g s lj k j y 1 2 6 . c o m ; 朱大岭( 1 9 5 5 一 ) ， 男， 教授， 博士生导师， 研究方向: 肺 循环病理生理学， T e l : 0 4 5 1 - 8 6 6 1 4 0 7 5 , E 一 二1 : d a l i n g z y a h o o . c o m 肺动脉的收缩节律是机体气一 血正常交换的重 要基础， 尤其缺氧性肺血管收缩( h y p o x i a p u l m o n a ry v a s o c o n s t r i c t i o n , H P V ) 是机体的 一种适应性反应， 有 利于维持通气一 血流的适当比例， 为肺循环所独有。 H P V由E u l e r 和L i lj e s t r a n d 于1 9 4 6 年首次提出， 此 后被广泛的研究， 但其确切的机制至今尚未完全明 了。近来关于花生四烯酸( a r a c h i d o n i c a c i d , A A ) 及 其一系列代谢产物在肺动脉的收缩节律调节作用越 来越受到人们的关注。我们以往的研究表明缺氧诱 导1 5 一 脂质氧化酶( 1 5 - L O ) 催化A A生成1 5 - H E T E , 1 5 - H E T E 通过抑制K ， 通道引 起肺动脉收缩 I 。以 往的研究提示1 5 - H E T E 可进一步代谢为1 5 - K E T E , 8 , 1 5 - d i H E T E 等2 ,3 1 产物， 这就提出了 一个问 题， 是 否1 5 - H E T E的代谢产物也参与了H P V过程， 目 前 未见报道。本文通过 1 5 - K E T E对大鼠离体肺动脉 血管环的研究， 证明了抑制 K v 通道和L - 型钙离子 通道及去除细胞外液钙离子降低了1 5 - K E T E诱导 的大鼠肺动脉环收缩， 初步阐明1 5 - K E T E收缩肺动 脉的离子通道机制， 为进一步阐明H P V机制提供了 理论依据。 ( E C 5 o ) o f 4 5 p m o l · L 一 . T h e A C h - s e n s i t i v e p o t a s s i - u m c u r r e n t w a s i n h i b i t e d b ye x t r a c e l l u l a r e t h y l a m m o mu m ，5 m m o l · L 一 ) ， p o t e n t l y T E A( t e t r a - i n h i b i t e d b y e x t r a c e l l u l a r l B T X( i b e r i o t o x i n ， 2 0 0 n m o l· L 一 ) ， a n d c o m p l e t e l y a b o l i s h e d b y i n t r a c e ll u l a r C s 十 . H o w e v - e r , t h e A C h - s e n s i t i v ep o t a s s i u m c u r r e n t w a s n o t s e n s i - t o e x t r a c e l l u l a r 4 - A P ( 4 - a m i n o p y r i d e ， 1 5 L m o l · ) a n d a p a m i n( 1 L m o l ·T h e c u r r e n t a m p l i - t u d e o f t h e AC h - s e n s i t i v ep o t a s s i u m c u r r e n t w a s p o t e n t - r e n t w a s s t r o n g l y i n h i b i t e d b y l o w e r i n g o f e x t r a c e l l u l a r c a l c i u m c o n c e n t r a t i o n f r o m 2 m m o l · L 一 ' t o 0 . 2 m m o l · L 一 1 w i t h a m a x i m u m s h i f t e d t o w a r d h y p e r p o l a r i z e d p o t e n t i a l f r o m 0一1 0 m V t o一 2 0 m V-一3 0 m V . C o n c l u s i o n E x t r a c e ll u l a r a p p l i c a t i o n o f A C h a c t i v a - t e d t h e B K c u r r e n t . T h e A C h - s e n s i t i v e B K c u r r e n t m i g h t p l a y a n i m p o r ta n t r o l e i n t h e s y n a p t i c i n h i b i t io n o f t y p e II v e s t i b u l a r h a i r c e l l s o f g u i n e a p i g s s a c c u l a r ma c u l a a n d u t r i c l e ma c u l a . 、尹 - L ly i n h ib it e d b y in t r a c e l lu l a r a p p l ic a t io n o f B A P T A b is K e y w o r d s : v e s t ib u l e ; h a i r c e l ls ; a c e ty l c h o l in e ; b i g ( 2 - a m i n o p h e n o x y e th a n e - N ， N , N ' ， N ' - te tr a - a c e t ic c o n d u c t a n c e ， c a l c iu m - d e p e n d e n t p o ta s s iu m c u r r e n t a c i d ) . F u r t h e r m o r e ， t h e A C h - s e n s i t i v e p o t a s s i u m c u r - ·1 3 4 0· 中国药理学通报C h i n e s e P h a r m a c o l o g i c a l B u l l e t i n 2 0 0 6 N o v ; 2 2 ( 1 1 ) L 一 T E A , 1 0 - 6 m o l · L 一 G L Y B , 1 0 - 6 m o l · L 一 硝苯 地平、 或将K r e b s 液换成无钙离子K r e b s 液( K r e b s 液中的C a C I : 被等摩尔的M g c I : 和1 m m o l · L - 1 E G T A替代) ， 作用3 0 m i n ， 在上述抑制剂分别存在 的 条 件 下， 加人终浓度为1 0 一 m o l · L “ ' 1 5 - K E T E , 观察抑制不同的离子通道和无钙离子细胞外液后， 1 5 - K E T E对大鼠肺动脉环收缩力的变化。 1 . 4 统计学处理血管环数据以对静息张力的百 分数表示， 即收缩率以用药后收缩幅度/ 用药前收缩 幅度x 1 0 0 %来表示; 所有数据均以无 士 : 表示; 组内 比 较采用单因素方差分析， 组间比较采用D u n n e t t - t 检验分析。 2 结果 2 . 1 1 5 - K E T E对大鼠离体肺动脉环的作用在 p H 7 . 4 含9 5 % 0 2 , 5 % C 0 2 混合气的3 7 T K r e b s 液 中， 1 5 - K E T E以浓度( 1 0 - 8 m o l · L - 一 1 0 - 6 m o l . L - 1 ) 依赖方式收缩缺氧大鼠离体肺动脉环， 其中 1 0 - 6 , 1 0 一 m o l · L 一 1 5 - K E T E 对 缺氧 组离 体 肺动 脉 环的收缩力高于正常组( P 0 . 0 5 ) ， 说明阻断B K , 。 通道并不影响1 5 - K E T E诱导 的大鼠 肺动脉环收缩， 见F i g 3 0 2 . 4 K A , .p 通道阻断剂对1 5 - K E T E 诱导的 大鼠离 体 肺动脉环收缩力的影响 在p H 7 . 4 含9 5 % 0 2 , 5 % C O , 混合气的3 7 ' C K r e b s 液中， 加人终浓度1 0 - 6 m o l · L 一 1 5 - K E T E ， 结果显示: 正常组和缺氧组肺动脉 环收缩力均显著增强， 收缩率( %) 分别为1 5 7 . 6 8 土 1 0 . 1 3 和1 8 9 . 3 5 土 1 4 . 4 7 ， 以缺氧组更为明显( 尸 0 . 0 5 ) ; 当 肺动脉环用1 0 一 “ m o l · L 一 K A T P 通道阻断 剂G L Y B 孵 育3 0 m in 后， 再给 予1 0 - 6 m o l · L 一 1 5 - K E T E ， 结果显示: 两组肺动脉环收缩率( %) 分别为 No r mo x w a F i g 4 E ff e c t o f K A T p c h a n n e l b l o c k e r o n r a t P A v a s o c o n s t r ic t i o n i n - d u ce d勿 1 5 - K E T E ( n = 8 i n h y p o x i a g r o u p , n = 1 0 i n n o r m o x i a g r o u p ) . . P 0 . 0 5 v s n o r m o x i a g ro u p 2 . 5 L · 型钙通道阻断剂对1 5 - K E T E诱导的大鼠离 体 肺动 脉 环 收缩力 的 影响 在p H 7 . 4 含9 5 % 0 , 5 % C O , 混合气的3 7 C K r e b s 液中， 加人终浓度 1 0 一 m o l · L 一 1 5 - K E T E ， 结果显示: 正常组和缺氧 组肺动脉环收缩力均增强， 收缩率( %) 分别为 1 5 9 . 4 3 士 1 1 . 2 5 和1 9 3 . 2 1 土 1 5 . 1 4 ， 以缺氧组更为明 显; 当肺动脉环用L - 型钙通道阻断剂硝苯地平1 0 一 m o l · L 一 孵育3 0 m i n 后， 再给予1 0 - 6 m o l · L 一 1 5 - K E T E ， 结果显示: 两组肺动脉环收缩率( %) 分别为 1 3 5 . 1 8 士 1 0 . 9 1 和1 6 2 . 4 5 士 1 3 . 7 8 ， 与只给予 1 0 - 6 m o l · L 一 1 5 - K E T E 差异有有显著性( P 0 . 0 5 ) ， 说 明L 一 型钙离子通道对 1 5 - K E T E收缩离体肺动脉环 有一 定的 作用， 见F i g 5 , ·1 3 4 2· 中国药理学通报C h i n e s e P h a r m a c o l o g i c a l B u l l e t i n 2 0 0 6 N o v ; 2 2 ( 1 1 ) 目 C o n tr o l 网1 0 -6 m o l · L - 1 1 5 - K E T E 口N if e d ip in e + 1 0 6 m o l · L 1 1 5 - K E T E 23021019017015013011090 熨。目日书粗山 No r mo x i a F i g 5 E ff e c t o f L - t y p e C a t 十 c h a n n e l s t r i c t i o n i n d u c e d勿 1 5 - K E T E ( n = 7 i n b l o c k e r h y p o x i a H y p o x i a o n r a t PA v a s o c o n - , n二 9 i n n o r m o x i s g r o u p ) . ' P 0 . 0 5 v s 1 0 一 “ m o l · L 一 1 5 - K E T E . 2 . 6 无钙液对 1 5 - K E T E诱导的大鼠离体肺动脉环 收缩力的影响 在p H 7 . 4 含9 5 % O Z - 5 % C 0 2 混合 气的3 7 'C K r e b s 液中， 加人终浓度1 0 - 6 m o l · L - 1 1 5 - K E T E ， 结果显示: 正常组和缺氧组肺动脉环收缩 力均增强， 收缩率( %) 分别为1 6 4 . 2 5 士 1 2 . 1 3 和 1 9 5 . 6 3 土 1 5 . 2 1 ， 以缺氧组更为明显; 当含钙 K r e b s 液用无钙K r e b s 液替换后， 再给予1 0 - 6 m o l · L 一 1 5 - K E T E ， 结果显示: 两组肺动脉环收缩率( %) 分别为 1 3 8 . 1 2 土 1 0 . 7 5和1 6 7 . 3 2 士 1 2 . 1 9 ， 与只给予 1 0 - 6 m o l · L 一 1 5 - K E T E差异有显著性( P 0 . 0 5 ) ， 说明 细胞外液钙离子对1 5 - K E T E收缩离体肺动脉环有 一定的 影响， 见F i g 6 0 3 讨论 1 5 - K E T E 是花生四 烯酸( A A ) 的1 5 一 脂质氧化酶 ( 1 5 - L O ) 的代谢产物， 也是1 5 - H E T E ( 1 5 - L O作用于 A A的 另 一种代谢产物) 经N A D + 依赖的 前列腺素 脱氢酶( P G D H ) 氧化的 产物 z 。 我们曾 报道过缺氧 口C a t* -fr e e k r e b s + 1 0 6 m o l - L 圈 1 0 - 6 m o l · L 一 i 1 5 - K E T E . C o n t r o l 1 5 - KETE nUnllCUnUnUnU八目n目 ，jl月197气119 2211，.人11.1，.1 义、目日周胃国 No r mo x i a F ig 6 E ff e c t o f C a t * - f r e e i n d u c e d b y 1 5 - K E T E( n二 g ro u p ) . * P 0 . 0 5 v s 1 0 一 6 m o l s o l u t i o n o n r a t P A v a s o c o n s t r i c t i o n h y p o x i a g r o u p , n=1 0 i n n o r m o x i a 1 5 - KE T E. 可诱导肺小动脉 1 5 - L O的表达增加， 催化A A生成 1 5 - H E T E , 1 5 - H E T E收缩肺动脉血管环， 主要引起缺 氧组肺动脉血管环收缩， 1 5 - H E T E可能是缺氧性肺 血管收 缩( H P V ) 的 始动因 子 “ ， 而1 5 - K E T E 对肺血 管的作用尚不清楚。本实验的结果表明， 外源性 1 5 - K E T E以浓度依赖的方式对大鼠 离体肺动脉环有 强烈的收缩作用， 其中对缺氧性肺动脉作用更明显， 因此 1 5 - K E T E可能也是 H P V的重要因子。 缺氧抑制 K v 通道， 但是缺氧本身直接抑制 K v 通道还是缺氧引起某种介质的释放后再作用于 K v 通道目 前尚有争议 7 l 。 很多学者倾向于缺氧引起 机体两阶段反应: 急性缺氧反应发生在缺氧的几秒 钟至几分钟内( I 时相) ， 慢性缺氧反应发生在缺氧 后 数分钟至 数小时( II 时 相) 8 1 ， I 时 相血管收缩不 依赖于内皮细胞， 但n时相只有在内皮细胞完整情 况下才能出现， 表明n时相的形成与内皮细胞释放 的 一些血管活性物质有关 9 - 1 1 。 我们的研究结果 表明， 慢性缺氧诱导1 5 - L O表达和1 5 - H E T E生成增 加， 主 要发生在肺动脉内 皮细胞“ ， 因而1 5 - H E T E 可能是形成II 时相内皮细胞释放的血管活性物质， 但需要进一步明确的是 1 5 - H E T E本身， 还是 1 5 - H E T E的 代谢产物引起肺血管的收缩， 以及其收缩 肺血管的分子和离子通道机制。 巧一 “T E以浓度依赖性方式收缩肺动脉， 其作 用和 1 5 - H E T E相似， 但作用更明显， 揭示 1 5 - K E T E 在缺氧中的重要作用。缺氧抑制K v 通道， 但1 5 - K E T E 是否通过K v 通道起作用未见报道。本实验 使用不同的钾离子通道阻断剂， 从功能上明确了 1 5 - K E T E 作用的肺动脉钾离子通道。我们的实验结 果提示: 阻断B K c g 通道和K A Y 通道不影响1 5 - K E T E 收缩大鼠离体肺动脉环的作用， 表明上述钾离子通 道不参与1 5 - K E T E收缩肺动脉的过程; 用4 - A P阻 断K v 通道可降低 1 5 - K E T E收缩大鼠离体肺动脉环 的作用， 表明K v 通道参与了1 5 - K E T E收缩肺动脉 的 过 程。 我 们的 结 果 证明: 1 5 - K E T E 和1 5 - H E T E 作 用的离子通道相同， 因而在H P V发生中两者起重要 的协同作用。 另外， 本研究还通过在K r e b s 液中加入L 一 型钙 通道阻断剂硝苯地平和将K r e b s 液用无钙K r e b s 液 替换， 研究了细胞外液钙离子是否参与1 5 - K E T E收 缩肺动脉作用。本实验结果表明， 在加入L 一 型钙通 道阻断剂硝苯地平和将K r e b s 液用无钙K r e b s 液替 换前后， 1 5 - K E T E 收缩肺动脉环的张力明显降低， 表 明L 一 型钙通道和细胞外钙离子参与了1 5 - K E T E收 缩肺动脉环作用。我们认为缺氧上调1 5 - L O的表 贬n- erL r7 妞7， 中国药 理学通报 C h i n e s e P h a r m a c o l o g i c a l B u l l e t i n 2 0 0 6 N o v ; 2 2 ( 1 1 ) ·1 3 4 3· 达， 催化生成 1 5 - H E T E , 1 5 - H E T E进一步氧化生成 1 5 - K E T E ， 后者通过抑制K v 通道， 使细胞外液钙离 子通过L型钙离子通道内流， 导致肺动脉平滑肌收 缩。 本研究通过血管环和离子通道特异性抑制剂的 应用， 从功能上探讨了1 5 - K E T E收缩肺动脉血管的 可能的离子通道机制， 揭示K v 通道在1 5 - K E T E收 缩离体肺动脉环中起一定作用， 并且L 一 型钙离子通 道和细胞外钙离子也对 1 5 - K E T E收缩离体肺动脉 环有一定的影响。上述结论尚需从基因和蛋白质水 平加以证实。 参考文献: 1 R H a n W N , L i X H , Z h u D L , e t a l , E ff e c t o f 1 5 - H E T E o n p o t a s s i - u m c h a n n e l s o f r a b b i t p u l m o n a r y a rt e r i a l s m o o t h m u s c l e s d u r i n g h y p o x i a J . A c t a P h y s i o l S i n , 2 0 0 4 , 5 6 ( 6 ) : 7 1 7 一 2 2 . 2 B e r g h o l t e J M , S o b e n n a n R J ,H a y e o t h e r s R, e t a l . O x i d a t i o n o f 1 5 h y d ro x y e i c o s a t e t r a e n o i c a c i d a n d p ro s t a g l a n d i n d e h 州r o g e n a s e J h y d ro x y f a t t y a c i d s b y A r c h B i o c h e m B i o p h y , 1 9 8 7 l u n g , 2 5 7 ( 2 ) : 4 4 4一 5 0 . 3 L a n d i n o L M , M a rn e t t L J . M e c h a n i s m o f h y d ro p e ro x i d e r e d u c t i o n b y m a n g a n o - p ro s t a g l a n d i n e n d o p e ro x i d e s y n t h a s e J .J B io l C h e m, 1 9 9 6 , 3 5 ( 8 ) : 2 6 3 7 一 4 3 . 4 B a k e r E J , B o e r b o o m L E , O l i n g e r G N , e t a l . T o l e r a n c e o f t h e d e v e l o p i n g h e a rt t o i s c h e m i a : i m p a c t o f h y p o x e m i a f r o m b i r t h J A m J P h y s io l , 1 9 9 5 , 2 6 8 : 1 1 6 5 一 7 3 . 5 Z h u D , E ff r o s R M , H a r d e r D R , e t a l . T i s s u e s o u r c e s “c y to- c h ro m e P 4 5 0 4 A a n d 2 0 - H E T E s y n t h e s i s in r a b b i t lu n g s J . A m J R e s p i r C e l l M o l B io l , 1 9 9 8 , 1 9 ( 1 ) : 1 2 1 一 8 . 6 D a l i n g Z , M e d h o r a M, C a m p b e l l W B , e t a l . C h ro n ic h y p o x i a a c - t i v a te s l u n g 1 5 - l i p o x y g e n a s e , w h i c h c a t a l y z e s p ro d u c t i o n o f 1 5 - H E T E a n d e n h a n c e s c o n s t r i c t i o n in n e o n a t a l r a b b i t p u l m o n a r y a rt e r - i e s J . C ir c R e s , 2 0 0 3 , 9 2 ( 9 ) : 9 9 2 一 1 0 0 0 . 7 W a r d J P , R o b e rt s o n T P . T h e r o l e o f th e e n d o t h e liu m in h y p o x i c p u l m o n a r y v a s o c o n s t r i c t i o n J . E x p P h y s io 1 , 1 9 9 5 , 8 0 : 7 9 3 一 8 0 1 . 8 D e M a s t e r E G , R a ij L , A r c h e r S L , e t a l . H y d r o x y l a m i n e i s a v a - s o r e l a x a n t a n d a p o s s i b l e i n t e r m e d i a te i n t h e o x i d a t i v e c o n v e r s i o n L - a r g r i n i n e t o n i t r i c o x i d e J . B i o c h e m B i o p h y s R e s , 1 9 8 9 , 1 6 3 : 5 2 7一 3 3 . 9 O p a r i l S , C h e n S J , M e n g Q C , e t a l . E n d o t h e l i n - A r e c e p t o r a n t a g - o n i s t p r e v e n t a c u t e h y p o x i a - i n d u c e d p u l m o n a ry h y p e rt e n s i o n i n t h e r a t J . A m J P h y s io l , 1 9 9 5 , 2 8 6 : 9 5 一 1 0 0 1 0 F e i n m a r k S J , C a n n o n P J . E n d o t h e l i a l c e l l l e u k o t r i e n e C 4 s y n t h e - s i s re s u l t s f ro m i n t e r c e l l u l a r t r a n s f e r o f l e u k o t r i e n e A 4 s y n t h e s i z e d b y p o l y m o r p h o n u c l e a r l e u k o c y te s J . J B io l C h e m , 1 9 8 6 , 2 6 1 ( 3 5 ) : 1 6 4 6 6一 7 2 . 1 1 R o m a n R J . P 4 5 0 m e t a b o l i t e s o f a r a c h i d o n i c a c i d i n t h e c o n t r o l o f c a r d i o v a s c u l a r f u n c t i o n J . P h y s i o l R e v , 2 0 0 2 , 8 9 : 1 3 1 一 8 5 o f 1 5 - K E T E o n r a t i s o l a t e d p u l mo n a r y a r t e r i a lr i n g s G U O S h o u - l i t , Z H A N G Y i - f e i ' , L I U Y e t , Z H U D a - l i n g ' 02 s ( 1 . T h e S e c o n d A ff i l ia t e d H o s p i t a l D e p a rt m e n t o f P h a r m a c y of H a r b i n M e d i c a l U n iv e r s i ty , 2 . C o l l e g e o f P h a r m a c y o f H a r b i n M e d ic a l U n iv e r s i t y , 3 . B io p h a r r n a c ic a l K e y l a b o f H e i l o n d i a n g P r o v i n c e , H a r b i n 1 5 0 0 8 6 , C h i n a ) 母 A b s t r a c t : A i m T o i n v e s t i g a t e t h e e f f e c t o f 1 5 - k e t o e i - c o s a t e t r a e n o i c a c i d( 1 5 - K E T E)a n d i t s m e c h a n i s m t h r o u g h i o n c h a n n e l s o n r a t i s o l a t e d p u l m o n a ry a r t e r i al r i n g s b y u s i n g o r g a n b a t h t e c h n i q u e . Me t h o d s S i x - t e e n h e a l t h y Wi s t a r r a t s w e i g h i n g 2 2 0土 2 0 g w e r e d i - v i d e d i n t o t w o g r o u p s ( n = 8 ) : n o r m o x i a g r o u p b r e a t h - i n g f r e s h a i r ( F i 0 2 = 2 1 %) a n d h y p o x i a g r o u p b r e a t h - i n g h y p o x i c a i r ( F i 0 2 = 1 0 %) i n a h y p o x i c b o x . P u l - m o n a ry a r t e r i e s ( P A ) w e r e e x t r a c t e d a f t e r 9 d a n d c u t i n t o r i n g s( 0 . 5一1 . 0 m m i n d i a m e t e r a n d 3 m m i n l e n g t h ) f o r o r g a n b a t h e x p e r i m e n t s . R e s u l t s ( 1 ) W i t h in c r e a s i n g c o n c e n t r a t i o n f r o m 0 t o 1 0 一 6 m o l· L 一 1 ， 1 5 - K E T E i n c r e a s e d P A r i n g s t e n s i o n g r a d u a l l y i n a d o s e - d e p e n d e n t f a s h i o n ;( 2 )4 - a m i n o p y r i d i n e( 2 m m o l · L 一 ) ， a K v c