SB-T 10387-2004 畜禽肉和水产品中呋喃唑酮的测定.pdf.pdf

I C S 6 7 . 1 2 0 X 0 4 备案号: 1 4 1 6 8 -2 0 0 4 中华人 民共和 国国内贸易行业标准 S B / T 1 0 3 8 7 -2 0 0 4 畜禽肉和水产品中吠喃哇酮的测定 De t e r mi n a t i o n o f f u r a z o l i d o n e i n me a t o f l i v e s t o c k p o u l t r y a n d a q u a t i c p r o d u c t s 2 0 0 4 - 0 8 - 0 4 发布 2 0 0 4 - 0 9 - 0 1 实 施 中华人民共和国商务部 发 布 S B / T 1 0 3 8 7 -2 0 0 4 月 U青 本标准由中华人民共和国商务部提出。 本标准由商务部屠宰技术鉴定中心负责起草， 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、 河北省疾 病预防控制中心参加起草 本标准主要起草人: 周深、 金社胜、 杨祖英、 宋书锋、 韩会新、 张新玲、 刘虎成、 王贵际。 本标准委托商务部屠宰技术鉴定中心负责解释。 S B / T 1 0 3 8 7 -2 0 0 4 畜禽 肉和水产品中肤喃哇酮的测定 1 范围 本标准规定了畜禽肉和水产品中吠喃哇酮的测定方法。 本标准适用于畜禽肉和水产品中吠喃哇酮的检验。 2原理 样品中吠喃噢酮用二氯甲烷提取， 经无水硫酸钠柱净化， 用正己烷去脂肪后， 。4 5 p m微孔滤膜过 滤， 滤液进行 HP L C分析。 3 试荆与试液 以下所用试剂， 除特殊说明外， 均为分析纯试剂， 水为重蒸水。 3 . 1 乙睛: 优级纯， 作流动相用。 3 . 2 乙腊 : 色谱纯。 3 . 3 乙睛水溶液: 乙腊+水( 8 0 +2 0 , V / V) , 3 . 4 正己烷。 3 . 5 甲醇: 色谱纯。 3 . 6 无水硫酸钠: 经 6 5 0 灼烧 4h 后， ， 贮于密闭容器中备用。 3 . 7 无水硫酸钠柱: 6 c mX1 . 8 c m， 内装 5 c m高的无水硫酸钠( 如果无合适的玻璃柱， 可以用 1 0 mL 注射器代替) 3 . 8 二氯甲烷。 3 . 9 磷酸。 3 . 1 0 吠喃哩酮标准品: 纯度 9 9 . '7 %0 3 . 1 1 吠喃哇酮标准储备液: 称取 1 0 . 0 m g峡喃哇酮， 用乙睛水溶液( 3 . 3 ) 溶解并稀释定容至5 0 mL棕 色容量瓶中， 保存于冰箱中。该液 1 . 0 mL相当于 2 0 0 fa g吠喃哇酮。 3 . 1 2 吹喃哇酮标准工作液系列: 精确吸取吠喃噢酮标准储备液 2 . 0 mL于5 0 mL棕色容量瓶中， 加水 至刻度， 摇匀， 即 得8 . 0 p g / m L 的溶液， 然 后精确吸 取此液。 . 0 5 , 0 . 1 0 , 0 . 2 0 , 0 . 5 0 , 1 . 0 , 2 . 0 m L ， 分别放 在1 0 . 0 m L 棕色容量瓶内， 分别加水至刻度， 摇匀， 即得每毫升含0 . 0 4 , 0 . 0 8 , 0 . 1 6 , 0 . 4 0 , 0 . 8 0 , 1 . 6 0 p g 的标准系列溶液。 4 仪器和设备 4 . 1 高效液相色谱仪: 附紫外检测器。 4 . 2 超声波清洗器。 4 . 3 旋涡混匀器。 4 . 4离心机。 4 . 5 旋转蒸发仪。 4 . 6 微量进样器: 2 5 p L, 5测定步骤 51 提取与净化 取 2 0 0 g试样纹碎， 称取混匀的绞碎的试样1 0 g ( 精确至 0 . 0 1 g ) ， 于 1 0 0 mL具塞锥形瓶中， 加 1 S B / T 1 0 3 8 7 -2 0 0 4 2 5 mL =氯甲烷， 超声提取 5 mi n , 提取液通过无水硫酸钠柱滤人 1 0 0 mL蒸发瓶中， 继用 2 5 ml二氯甲 烷重复提取一次， 均通过无水硫酸钠柱滤人同一蒸发瓶中， 用二氯甲烷 1 5 mL淋洗无水硫酸钠柱。淋 洗液合并于同 一蒸发瓶， 滤液于 旋转 蒸发仪上蒸发 至干( 水浴温度为3 0 0C -3 5 0C ) . 然后准确加人 1 . 0 m L乙睛水溶液和1 . 0 ml正己烷于旋涡混匀器上混匀 2 min ， 转入 5 ml离心 管中， 3 0 0 0 r / mi n 离心2 min后( 鳗鱼需离心 1 0 mi n ) ， 用吸管移去上层正己烷层， 再向离心管中加人 1 mL 正己烷， 混匀2 mi n ， 离心， 用吸管移去上层正己烷层， 下层清液通过 。 . 4 5 p m微孔滤膜过滤， 滤液 供 HP L C分析用。 5 . 2色谱测定 5 . 2 . 1 液相色谱参考条件 a ) 色谱柱: Hy p e r s i l O D S 2 C 1 8 , 2 5 0 mm X 4 . 6 m m, 粒径 5 p m; b ) 流动相: 乙睛+水( 4 0 +6 0 ) ， 每1 0 0 0 m L加 1 . 0 mL磷酸; c ) 流速 : 1 . 0 mL / mi n; d ) 检测波长: 3 6 5 n m; e ) 柱温: 室温。 5 . 2 . 2 肤喃哇酮标准曲线的制备 依照上述色谱条件， 分别进标准工作液各个点。每个标准液进 2 0 p L , 测定其峰面积， 然后以标准 液浓度对峰面积作校准曲线， 求出回归方程及相关系数。 5 . 2 . 3 样品测定 在上述色谱条件下， 准确吸取 2 0 p L试样溶液， 进行 HP L C分析。 结果 3 . 1 计算 将标准曲线各点的浓度与对应的峰面积进行回归分析， 然后按式( 1 ) 计算供试样品中吠喃哇酮的 含量。 c X V X 1 0 0 0 m X 1 0 0 0 ( 1 ) 式中 : X 样品中含有吠喃哇酮的含量， 单位为毫克每千克( m g / k g ) ; c 被测液中相当于标准曲线的吠喃哇酮， 单位为微克每毫升( p g / mL ) ; V 被测液的体积， 单位为毫升( mL ) ; r n 样品质量， 单位为克( 9 ) 。 2 检 出限 本方法的检测限为。 . 0 1 p g / mL ， 当取样量为1 0 g时， 最低检测量为 1 . 0 u g / k g 允许差 同一分析者同时或相继两次测定结果之差不得超过均值的 1 5 %0