[医药标准]-YYT 0557-2005 营养琼脂培养基.pdf

I C S 1 1 . 1 0 0 C 44 yy 中 华 人 民 共 和 国 医 药 行 业 标 准 Y Y / T 0 5 7 7 -2 0 0 5 营养琼脂培养基 N u t r i e n t a g a r me d i u m 2 0 0 5 - 1 2 - 0 7 发布2 0 0 6 - 1 2 - 0 1实施 国家食品药品监督管理局 发 布 YY / T 0 5 7 7 -2 0 0 5 “ li吕 本标准全部技术条款为强制性。 本标准是在参考 中华人民共和国药典 ( 2 0 0 5年版) 基础上， 结合中国国情及实际情况和要求而 制定 本标准附录 A为规范性附录。 本标准由国家食品药品监督管理局提出。 本标准由中国药品生物制品检定所归口。 本标准由中国药品生物制品检定所负责起草 本标准主要起草人: 孙彬裕、 曲守方、 刘艳、 高尚先。 YY/ T 0 5 7 7 -2 0 0 5 营养琼 脂 培 养基 范 围 本标准规定了营养琼脂培养基的质量要求、 检验方法、 使用说明、 标志、 标签以及包装、 运输、 贮存。 本标准适用于一般细菌培养的营养琼脂培养基。 2 规 范性 引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注 日期的引用文件， 其随后所有 的修改单( 不包括勘误的内容) 或修订版均不适用于本标准， 然而， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件， 其最新版本适用于本标准。 G B / T 1 9 1 包装储运图示标志 中华人民共和国药典( 2 0 0 5年版) J J F 1 0 7 0 -2 0 0 。 定量包装商品净含量计量检验规则 术语和定义 下 列术语和定义适用于本标准 。 培养基 c u l t u re m e d i u m 由人工方法配合而成的， 专供微生物培养、 分离、 鉴别、 研究和保存使用的混合营养物制品 3. 2 质控菌 株 q u a l i t y c o n t r o l s t r a i n 质控菌株通常指用于培养基质量控制和性能测定的微生物。 3 .3 菌落形成单 位 c o l o n y f o r m i n g u n i t , c f u 菌落形成单位是指在活菌培养计数时， 由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁 殖所形成的集落， 以其表达活菌的数量。 培 养基配方 单位为: g / L , 蛋 白陈 氯化钠 牛肉浸出粉 琼脂 1 0 . 0 g 5 . 0 g 3 . 0 g - S . 0 g 1 2 . 0 8 -1 4 . 0 g 5质t要求 5 1 理化要求 5 . 1 . 1 外观 应为均一的淡黄色粉末。 5 . 1 . 2 装皿 应不低于标示量。 Y Y/ T 0 5 7 7 -2 0 0 5 5 . 1 . 3 p H值 灭菌后， 2 0 0 C -2 5 时， 该培养基 p H值应为 7 . 2 士0 . 2 5 . 1 . 4 干燥失重 应不超过 6 . 。 % 。 5 . 2 生长试验 空白对照平皿应无菌生长， 大肠埃希菌的菌落为 S型， 为半透明; 金黄色葡萄球菌的菌落为S型， 产 生明显的金黄色色素; 铜绿假单胞菌的菌落为 R型， 产生明显的绿色色素。该培养基接种质控菌株， 生 长情况应符合 以上要求 且生长 良好 。 6检验方法 6 . 1 理化检验 6 . 1 . 1 外观 采用目测法， 在自然光线明亮处 目视， 应符合 5 . 1 . 1的规定。 6 . 1 . 2 装f 按J J F 1 0 7 0 -2 0 0 0 ， 使用通用量具， 测定装量， 应符合 5 . 1 . 2 的规定。 6 . 1 . 3 p H值 按使用说明配制培养基， 取 6 m工新鲜配制的液体培养基， 加新鲜蒸馏水至 4 0 mL ， 灭菌后， 在 2 0 0C -2 5 时， 按 中 华人民 共和国药典 ( 2 0 0 5 年版) p H值测定法测定， 应符合5 . 1 . 3 的规定。 6 . 1 . 4 千燥失重 按 中华人民共和国药典 ( 2 0 0 5 年版) 干燥失重测定法， 在6 0 时压力 2 . 6 7 k P a ( 2 0 mmH g ) 以下 干燥至恒重， 应符合 5 . 1 . 4的规定。 6 . 2生长试验 按 附录 A试 验方法进行 ， 结果应符合 5 . 2的规定 。 使用说明 使用说明至少应当具有下列内容: a ) 产品名称、 规格; b )配方 ; c ) 用 途; d ) 使用方法; 。 ) 注意事项; 自贮存条件与失效期; g ) 生产单位名称、 联系方式 标 志与标签 标志与标签至少应 当具有下列 内容 : a ) 执行标准号; b ) 产品注册证号; c ) 产品名称、 规格、 数量、 批号; 山制造厂名称、 商标和厂址; 。 ) 贮存条件和失效期 YY/ T 0 5 7 7 - 2 0 0 5 9 包装、 运输、 贮存 9 . 1 包装 包装储运图示标志应符合G B / T 1 9 1的规定。包装容器应保证密封性良好， 不易破碎。 9 . 2运输 培养基在运输过程中， 应防潮， 应防止重物堆压， 避免阳光直射和雨雪浸淋， 防止与酸碱物质接触， 防止内外包装破损。 9 . 3 贮 存 产品应置阴凉干燥处贮存 YY / T 0 5 7 7 -2 0 0 5 附录A ( 规 范性 附录) 营养琼脂培养基 生长试 验方法 A . 1 质控菌株 金黄色葡萄球菌( S t a p h y l o c o c c u s a u r e u s ) C MC C( B ) 2 6 0 0 1 大肠埃希菌( E s c h e r i c h i ac o l i ) ) C MC C ( B ) 4 4 1 1 3 铜绿假单胞菌 ( P s e u d o m o n a s a e r u g i n o s a ) C MC C ( B ) 1 0 1 1 0 培养基生长试验可采用上述菌株或其他等同的标准菌株， 所用的菌株传代次数不得超过5 代( 从菌 种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第 0代) ， 并采用适宜的菌种保藏技术， 以保证试验菌株的生物学 特性。 不应同时操作2个以上菌株。 A. 2 方法 A . 2 . 1 无菌操作要求 培养基生长试验应严格遵守无菌操作， 防止微生物污染 稀释液、 培养基、 实验器具等灭菌时， 应照中华人民共和国药典( 2 0 0 5年版) 灭菌法的要求， 采用验 证合格的灭菌程序灭菌 A . 2 . 2 菌种复苏 启开金黄色葡萄球菌、 大肠埃希菌、 铜绿假单胞菌菌种， 用 。9 %无菌氯化钠溶液。 . 3 m工制成菌悬 液， 加至 7 mL营养肉汤培养基中， 3 0 0C - 3 5 培养 2 4 h A . 2 . 3 菌种传代 取1 mL上述复苏后的金黄色葡萄球菌、 大肠埃希菌、 铜绿假单胞菌新鲜培养物， 加至 7 mL营养肉 汤培养基中， 3 0 0 C- - 3 5 培养 2 4 h . A . 2 . 4 菌种增菌培养 接种上述传代后的金黄色葡萄球菌、 大肠埃希菌、 铜绿假单胞菌的新鲜培养物至营养肉汤或营养琼 脂培养基中， 3 0 0 C -3 5 培养 1 8 h -2 4 h o A . 2 . 5 菌悬液制备 将上述增菌培养后的金黄色葡萄球菌、 大肠埃希菌、 铜绿假单胞菌的新鲜培养物分别用 0 . 9 %无菌 氯化钠溶液制成每 1 mL含菌数约相当于 1 0 0 c f u - 1 0 0 0 c f u的菌悬液 A . 2 . 6 培养基接种 用蒸馏水或去离子水按说明上的浓度配制待检营养琼脂培养基，1 2 1 灭菌 1 5 mi n后， 稍冷后在 每个平皿( 直径为9 0 mm) 中加人约 1 5 mL -2 0 ml - ， 待冷却至室温凝固后进行检测 检测时， 每个平皿加人 。 . 1 m L上述菌悬液。每种质控菌株接种2个平皿， 并用 1 个未接种的培养 基平皿做空白对照， 置3 0 0C - - 3 5 培养 2 4 h -4 8 h ， 观察菌落生长情况， 并记录结果。结果应符合 5 . 2 的要求 。 YY/ T 0 5 7 7 -2 0 0 5 参考文献 口j G B 9 9 6 9 . 1 -1 9 9 8 工业产品 使用说明书 总则 2 陈天寿主编. 微生物培养基的制造与应用. 北京 中国农业出版社. 1 9 9 5 年 6 月