一氧化氮对烫伤大鼠下丘脑垂体肾上腺轴的调节作用.pdf

中华烧伤杂志2 0 0 6 年6 月第2 2 卷第3 期C h i n J B u r n s , J u n e 2 0 0 6 , V o l . 2 2 , N o . 3 · 短 篇 T if著 · 一氧化氮对烫伤大鼠下丘脑一 垂体一 肾上腺轴的调节作用 刘昌部宁正杨震宇孙炳伟王永忠 一、 材料与方法 1 . 主要试剂来源; N “ 一 硝基一 L 一 精氨酸甲酷( L - N A M E ) 、 皮 质醇 1x 5 1 一 促肾上腺皮质激素( A C T H ) 放射免疫试剂盒购于 上海晶美生物工程有限公司， 一氧化氮( N O ) 、 一氧化氮合酶 ( N O S ) 试剂盒购于南京建成生物工程有限公司。 2 . 实验分组: 雄性 S D大鼠3 0只， 体重( 2 7 0 土 2 0 ) 9 ， 由江 苏大学实验动物中心提供。根据处理方法不同分为单纯烫 伤组( 1 0只) : 按照文献 1 方法造成大鼠背部直径 2 . 6 c m 的深i t 度烫伤创面。L - N A M E 组( 1 0只) : 致伤前 1 周向大鼠 腹腔内注射L - N A M E ( 5 0 m 岁k g ) ， 每天1 次， 然后致伤， 方法同 上。对照组( 1 0 只) : 与L - N A M E组相同时间向大鼠腹腔内注 射 1 m l 的等渗盐水， 不烫伤。 3 . 取材及检测指标: 烫伤后 2 4 h ， 分别将 3 组大鼠断颈 处死， 开颅取下丘脑匀浆并冷冻离心后， 取上清液检测 N O 含量和N O S 活性。另取大鼠静脉血2 m l ， 用于检测总皮质醇 ( G C ) 和A C T H含量。 4 . 统计学处理: 数据以x士 : 表示， 采用 S P S S 1 1 . 0 统计 软件进行 检验。 二、 结果 与对照组比较， 单纯烫伤组大鼠下丘脑 N O含量和 N O S 活性明显升高( P 0 . 0 5 ) ; 伤后6h ， 烧伤组、 治疗组显著 低于对照组( P 0 . 0 5 ) ， 而治疗组却显著高于烧伤组( P 0 . 0 5 ) 。伤后 1 h 开始烧伤组、 治疗组肝细胞线粒体内细胞 色素 c 类、 能荷及 S O D水平下降， 但治疗组却显著高于烧伤 组( P 0 . 0 5或0 . 0 1 ) 。见表 t o 三、 讨论 生理情况下， 人体摄取的氧接受线粒体内细胞色素氧化 酶传递的电子而还原成水， 仅有少量的氧接受 1 个电子而成 为氧自由基， 也被 S O D有效地清除。 笔者的实验显示， 大鼠烧伤后 S O D显著低于对照组， 提 示氧自由基生成增加， S O D被消耗。烧伤后细胞色素氧化酶 显著低于对照组， 导致能量代谢障碍、 电子传递障碍及氧自 由基生成增加。治疗组线粒体内细胞色素 a a 3 、 细胞色素 。 类和S O D水平显著高于烧伤组， 提示丹参治疗后， 提高了细 胞色素氧化酶活力， 减少了氧自由基的生成。说明丹参能明 显改善大鼠烧伤后肝细胞线粒体呼吸功能， 有利于保护肝细 胞。 参考文献 1 L a w r e n c e C B , D a v i e s N T . A n o v e l , s i m p l e a n d r a p i d m e t h o d f o r t h e i - s o l a t i o n o f m i t o c h o n d r i a , w h i c h e x h i b i t r e s p i r a t o ry c o n t r o l , f r o m r a t s m a l l i n t e s t i n a l m u c o s a . B i o c h e m B i o p h y s A c t a , 1 9 8 6 , 8 4 8 ; 3 5 一 3 9 . 2 Wi l l i a m s J W. A m e t h o d f o r t h e s i m u l t a n e o u s q u a n t i t a t i v e e s t i m a t i o n o f c y t o c h r o m e a , b , c a n d c l i n m i t o c h o n d r i a . A r c h B i o c h e m B i o p h y s , 1 9 6 4 ， 1 9 7: 5 3 7一5 4 1 . 表 1 3 组大鼠肝组织细胞色素 a a 3 、 细胞色素 c 类、 能荷及 S O D水平的比较( 王上、 ) 鼠数 ( 只 ) 细胞色素 a a 3 能荷 组别 ( n m o l · m i n 一 · m g 一 细胞色素 c 类 n m o l · m i 。 一 · m g 一 )( n m o l · S OD ( U / g ) 2 3 1士7 2 2 4土8 2 3 4士8 1 3 2士6 1 3 9 19 1 3 6士7 0 . 6 7 0士0 . 0 2 0 0 . 6 4 0士0 . 0 2 0 0 . 6 5 0士0 . 0 1 0 7 4 4土7 0 7 4 5士7 7 7 3 4 t 7 4 t 6 7， 士 2 6 “ 土 3 1 “ 士 6 8 0 士 5 7 535401213691566 对照组 伤后 Ih 伤后 2h 伤后 6h 烧伤组 伤后 Ih 伤后 2h 伤后6h 治疗组 伤后 1 h 伤后 2h 伤后 6h 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 8 4士5 7 8土7' 6 9士 5 “ 0 . 4 2 0士 0 . 0 2 0 “ 0 . 4 0 0士 0 . 0 1 0 “ 0 . 4 0 0 士 0 . 0 1 0 “ 1 2 9士 6 0 1 2 9土 5 0 1 1 4士5* 0 . 6 0 0士 0 . 0 3 0 0 0 . 5 8 0士 0 . 0 1 0 ,1 0 . 5 1 0士 0 . 0 2 0， 6 6 3士 7 0 * 757乙Ulj7 士士士士士士 581石92 21:20:巧222119 注: 与对照组比较， *P 0 . 0 5 , # P 0 . 0 1 ; 与烧伤组比较, AP 0 . 0 5 , *P 0 . 0 1 基金项 目: 兰州军区医药卫生科研计划资助项目( L X H - 2 0 0 5 0 0 3 ) 作者单位: 7 2 1 0 0 4 陕西宝鸡， 解放军第三医院烧伤科 ( 收稿日期: 2 0 0 5 - 0 9一 1 9 ) ( 本文编辑: 张红)