不同发育阶段大鼠CNS的NogO mRNA的表达.pdf
中华神经医学杂志2005年5月 第4卷 第5期Chin J N,-./0,12 345 2005678/9 46 N/: 5 基金项目:国家自然科学基金;45? 77777777作者单位:2002A7上海第二医科大学附属仁济医院神经外科;包 映晖 电话:02B5C=524Q1R成年,共=个时间点脊 髓中N/K/70LNM的表达变化%结果N/K/BM70LNM和N/K/BS70LNM在胚胎期471就可以检测 到,在所检查的时间点内,N/K/BM70LNM和N/K/BS70LNM的扩增表现出很恒定的水平,其表达并未 有任何特定的时间模式200505-442-007;*=0*=;=5+ A;F0G%F6D -=%5+ E)6CNJ74T7X4.i/-H71,X,9/VinK7HT4K,H:7777Methods J,0iBY-4nTiT4TiX,7LOBPCL7Z4H7-H,17T/7HT-157Th,7,UV.,HHi/n7 4n179,X,97/W7N/K/70LNM7in7Th,7.4T7HVin497I/.17/W71iWW,.,nT71,X,9/VinK7HT4K,H7 ;W./07,0F.5/niI7145747T/7 41-9T67=7HT4K,H7in7T/T49:7777ResultsN/K/BM70LNM74n17N/K/BS70LNM7Z,.,7V/HiTiX,7W./07,0F.5/niI71457 474n17.,04in,17HT4F9,71-.inK74997Th,7Ih,I7V/inTH7ZiTh/-T7Ti0,B1,V,n1,nT704nn,.: 7N/K/BC70LNM7Z4H7 W/-n174WT,.7,0F.5/niI714572794T,.7Th4n7Th,7N/K/BM74n17N/K/BS70LNM: 777Con lusionN/K/7iH7V.,H,nT7in7 Th,71,X,9/VinK7CNJ74n17h4H7n/7I9/H,7.,94Ti/n7ZiTh705,9in704T-.4Ti/n6 7ZhiIh7in1iI4T,H7Th4T7N/K/7045F,7 h4X,70/.,7W-nITi/n7Th4n7Th,7n,-.iT,7K./ZTh7inhiFiTi/n67,HV,Ii499571-.inK7Th,71,X,9/VinK7CNJ: (Key words)N/K/7777L4TH7777C,nT.497n,.X/-H7H5HT,07777./ZTh74n17,0F.5/niI71,X,9/V0,nT 成年哺乳动物中枢神经系统;I,nT.497n,.X/-H7 H5HT,0CNJ的微环境是阻碍神经再生的主要因素 尤其是髓鞘中的神经再生抑制分子的存在%新近克隆 的N/K/分子是其中重要的神经再生抑制性髓鞘因 子% 目前认为N/K/分子可能就是以前发现的NB250 分子% 以往人们认为N/K/分子主要分布于少突胶质 细胞 最新研究证实N/K/分子也存在于神经元中% 但目前对于N/K/在CNJ发育时的表达和功能尚缺 乏研究 本研究采用半定量LOBPCL方法研究N/K/Q 0LNM在不同发育阶段大鼠CNJ中的表达以进一 步研究其在CNJ发育中的功能% 材料与方法 一+实验动物 选取胚胎期J_大鼠 胎龄4Q1 N,0F./5niIQ145Q 4D4+D2Q出生后Q1NV/HTn4T49Q145QP+P=+ P4+P2和成年N体重A0R20QKJ_大鼠各2 只% 二+总LNM的提取与纯化 不同发育时间点大鼠断颈处死迅速取下脊髓或 脑组织(=0Q冻存% 采用OLabc试剂提取组织总 LNM%用_dQ2?40Q型紫外分光光度计进行定量%从每 组取相当于50QnK总LNM模板的反转录产物 进行 25R:Q大鼠N/K/BM引物: 扩增4AAQFV的片段 P2:5,BMOMOOCMOOCCOMMOCCB27?的片段 AB:5'5 变性样品5 0in;K2L4 变性B0 M;KBL55 退火N0OM;K4LP2 Q延伸N0 M;K5L返回反应 2,进行2 个循环,最后一个循环P2 延伸5 0in。 五、 ACH 产物检测 ACH 反应产物F0 µG加F µG载样缓冲液,以 0:04 0/9RG E.iMZZ年C4./ni等F发现的两个抑制哺 乳动物脊髓损伤轴突生长的髓鞘相关蛋白N7分子的抑制作用可能不是主要的, 至少在正 常生理情况下,在发育阶段神经元和其它类型细胞中 N/;/=分子具有不同于抑制轴突生长的功能。 因而 需要更多的研究来进一步阐明和更全面的认识N/;/ 在正常和受损CN: N/;/ in n,.R, .,;,n,.4Gi/n JJK: N4G-.,6 20006 40YWOVONXP YOM=YV0: 4 .inZh4 T6 3/., L6 R4n 1,. 44. 3D6 ,G 49: N/;/= iI 4 05,9in=4II/Ai4G,1 n,-.iG, /-G;./BGh inhiCiG/. 4n1 4n 4nGi;,n H/. 0/n/A9/n49 4nGiC/15 N=?JJK: N4G-.,6 20006 40YWOVONXP 4Y4=4YM: O S.4n1F., E6 D6 7S.4n1.,7E6 7X重复序列数为5的等位基因可 能是我国人群颅内动脉瘤的一个独立危险因素,在颅 内动脉瘤的防治工作中应予以重视。 APOA 5'端WEEEEX重复序列多态性可能与颅 内动脉瘤的发病有相关性。APOA NT重复序列数为 5的等位基因可能是我国人群颅内动脉瘤的一个独 立危险因素。 参考文献 ?7777汤劼67赵继宗:7颅内囊性动脉瘤病因学研究进展JJK:7国外医学脑血 管疾病分册67200?67MWYXP7?VO=?VM: 7727777杨雷67赵继宗67王硕67等:7颅内血管钙化W附Y?例报告XJJK:7中华神经 外科疾病研究杂志67200467YW2XP7?VN=?VM: 77Y7777赵元立67王忠诚67赵继宗67等:7血浆脂蛋白W4X与颅内囊性动脉瘤发 病的相关性研究JJK:7神经疾病与精神卫生67200?67?W4XP75=V: 7747777汤劼67赵继宗:7载脂蛋白D多态性和脑血管疾病JJK:7国外医学脑血 管疾病分册67200267?0WYXP7?MN=200: 7757777L/9;,.7C67hi99iFI7J67Si99i;4n7F/9iF/F./G,in7D7,FIi9/n474n17Gh,7.iI7 /H7-nH4R/.4C9,7/-GA/0,74HG,.74n,-.5I0497I-C4.4Ahn/i17h,0/h4;, JJK:76 C/.A/.4n LE6 H/-GI QQ6 ,G 49: S,n,GiA ,R49-4Gi/n /H 9iF/F./G,in W4X in inG.4A.4ni49 4n,-.5I0 1iI,4I, JJK: N,-./I-.;,.56 200?6 4MW?XP ?YY=?40: W收稿日期:2004=?=25X W本文编辑:刘凯X ! 444 C MY K
