二氧化硫对大鼠肝和肺细胞色素P4502B1和 2E1 MRNA表达及活性的影响.pdf

第 3 5 卷 5 5 4 2 0 0 6年 卫生研究 J O U R N A L O F H Y G I E N E R E S E A R C H 文章编号: 1 0 0 0 - 8 0 2 0 ( 2 0 0 6 ) 0 5 - 0 5 5 4 - 0 3 V o l . 3 5 N o . 5 S e p . 2 0 0 6 · 论 著 · 二氧化硫对大鼠肝和肺细胞色素P 4 5 0 2 B 1 和 2 E I m R N A表达及活性的影响 秦国华孟紫强 山西大学环境医学与毒理学研究所， 太原0 3 0 0 0 6 摘要: 目 的 探讨二氧化硫( s o , ) 对肝、 肺微拉体细胞色 素P 4 5 0 两 种亚型C Y P 2 B 1 和C Y P 2 E I m R N A 表达 及活性的影响。方法 采用S O : 动式染毒技术使雄性W is t a r 大鼠染毒7 天， 每天6 h , S O ， 的染毒剂量分别为 1 4 , 2 8 和5 6 m g / 耐。采用分光光度法测定大鼠 肝、 肺微粒体C Y P 2 E I 活性， 采用荧光分光光度法测定肝、 肺微 拉体 C Y P 2 B 1 活性， 采用R T - P C R方法测定各组大鼠肝、 肺组织中C Y P 2 B 1 和 C Y P 2 E I m R N A表达水平。结果 在肝中， 较高 剂量的S 0 2 ( 2 8 和5 6 m g / m ' ) 可使C Y P 2 B 1 活 性及m R N A水平降低， 肝微拉体C Y P 2 E I 活性及 m R N A 在各剂量组均未发生显著改变。肺组织中C Y P 2 B 1 活性在5 6 m g / 耐 剂量组显著降低， 但其m R N A 水平 在2 8 及5 6 m 砂 耐剂量组均显著降低; 肺微粒体C Y P 2 E I 活性及m R N A水平在2 8 及5 6 m g / m ' S 0 2 处理组均降 低显著。结论s o , 可降低大鼠肝中C Y P 2 B 1 和2 E 1 及肺中C Y P 2 B 1 和C Y P 2 E 1 的活性及m R N A水平。 关键词: 二氧化硫细胞色素P 4 5 0 2 B 1 中图分类号二 R 9 9 4 . 6 X 5 0 3 . 2 细胞色素P 4 5 0 2 E 1 文献标识码 : A E f f e c t s o f s u l f u r d i o x i d e o n m R N A e x p r e s s i o n a n d a c t i v i t i e s o f h e p a t i c a n d p u l mo n a r y c y t o c h r o me P 4 5 0 2 B 1 a n d 2 E 1 i n r a t s Q i n G u o - h u a , Me n g Z i - g i a n g I n s t i t u t e o f E n v i r o n m e n t a l M e d i c i n e a n d T o x i c o l o g y , S h a n x i U n i v e r s i t y , T a i y u a n 0 3 0 0 0 6 , C h i n a A b s t r a c t : O b j e c t i v e T o s t u d y t h e e ff e c t s o f s u l f u r d i o x i d e ( S O , ) o n a c t i v i t i e s a n d m R N A e x p r e s s i o n o f h e p a t i c a n d p u l m o n a ry c y t o c b r o m e P 4 5 0 2 B 1 a n d 2 E 1 in r a t s . Me t h o d s M a l e Wi s t a r r a t s w e r e h o u s e d i n e x p o s u r e c h a m b e r s a n d tr e a t e d w i t h 1 4 , 2 8 a n d 5 6 m g / 耐S 0 2 f o r 6 h / d fo r 7 d a y s , w h i le c o n t r o l r a t s w e r e e x p o s e d t o f i lt e r e d a ir in t h e s a m e c o n d i t i o n . T h e a c t i v i t i e s o f C Y P 2 E 1 o f r a t s w e r e m e a s u r e d b y s p e c t r o p h o t o m e t ry. F l u o re s c e n c e s p e c t r o p h o t o m e t ry w a s u s e d t o s t u d y t h e a c t i v i t i e s o f C Y P 2 B 1 . T h e m R N A s o f C Y P 2 B 1 a n d 2 E 1 w e r e a n a l y z e d i n l i v e r s a n d l u n g s b y u s i n g a r e v e r s e t r a n s c r i p t i o n - p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n ( R T - P C R ) a s s a y . R e s u l t s I n t h e l i v e r , d e c r e a s e s o f C Y P 2 B 1 a c t i v i t y a n d m R N A w e r e o b s e r v e d a t h ig h e r d o s e o f S 0 2 ( 2 8 a n d 5 6 m g / m ' ) . H o w e v e r , t h e C Y P 2 E 1 一 d e p e n d e n t p - n it r o p h e n o l h y d r o x y la s e s ( p - N P ) a n d m R N A w e r e u n a l t e r e d b y S 0 2 a t a l l d e t e c t e d c o n c e n t r a t io n s . F o r l u n g s , C Y P 2 B 1 a c t i v i t y w a s u n a l t e r e d b y S 0 2 a t lo w c o n c e n t r a t i o n s , e x c e p t fo r a s ig n ifi c a n t d e c r e a s e i n t h e r a ts e x p o s e d to S 0 2 a t 5 6 m g / m ' ， h o w e v e r , S 0 2 a t h i g h e r c o n c e n t r a t io n s ( 2 8 a n d 5 6 m g / 耐) s ig n if ic a n t ly d e c r e a s e d C Y P 2 B 1 m R N A . S ig n if i c a n t in h ib it i o n o f p - N P w a s o b s e r v e d in l u n g s o f r a t s e x p o s e d t o S 0 2 a t 2 8 a n d 5 6 m g / m ' . S 0 2 a t h ig h e r c o n c e n t r a t io n s ( 2 8 a n d 5 6 m g / m ' ) d e c r e a s e d s ig n ifi c a n t l y p u l m o n a ry C Y P 2 E 1 m R N A r e l a t i v e t o c o n t r o l a n i m a l s . C o n c l u s i o n I t w a s s u g g e s t e d t h a t S 0 2 e x p o s u r e c o u l d s u p p r e s s t h e a c t i v i t e s a n d m R N A e x p r e s s io n o f h e p a t i c C Y P 2 B 1 a n d p u l m o n a ry C Y P 2 B 1 a n d 2 E 1 o f r a t s . K e y w o r d s : s u l f u r d i o x i d e , c y t o c h ro m e P 4 5 0 2 B 1 ， c y t o c h r o m e P 4 5 0 2 E 1 二氧化硫( S 0 2 ) 是一种普遍存在的大气污染物， 吸人后会 在体内形成其衍生物重亚硫酸盐和亚硫酸盐( 在中性溶 液中摩尔比为 1 : 3 ) 。这些衍生物又极容易吸收人血液或体 基金项 目: 国家 自然科 学基 金 资助 项 目( N o . 3 0 2 3 0 3 1 0和 2 0 4 7 7 0 2 3 ) ; 山西省自然科学基金资助项目 作者简介: 秦国华， 女， 博士研究生 1 通讯作者 液中而发挥作用。近来作者还发现s o , 及其衍生物为全身性 毒物， 不仅可引起小鼠肺组织， 还可引起小鼠其它多种器官的 D N A 损伤和氧化损伤 1 ,2 1 。细胞色素P 4 5 0 ( P 4 5 0 ) 是存在于肝 脏微粒体混合功能氧化酶系的主要成分， 是一组由许多同工 酶组成的超基因大家族， 对许多内源、 外源性化合物在体内的 I 相生物转化有重要作用， 在药理学、 毒理学研究中有着重要 意义， 尤其对阐明药物一药物的相互作用， 指导临床合理用药 有着非同寻常的意义3 ， 除肝脏外， 与外界接触的组织如皮 第 5 期秦国华， 等. 二氧化硫对大鼠肝和肺细胞色素P 4 5 0 2 B 1 和2 E 1 m R N A表达及活性的影响 5 5 5 肤、 肺、 肺泡巨噬细胞等部位亦均有 P 4 5 0 。它可受各种因素 的影响而改变， 如药物、 疾病、 饮食、 激素水平及各种化学物质 等。在本文中我们采用动式s o , 吸人染毒， 对大鼠 肝、 肺微粒 体 C Y P 2 B 1 和2 E 1 的活性及 m R N A水平进行了测定。 图像分析软件 自动扫描 目的条带的灰度， 以目的基因与 G A P D H的灰度之比来确定目的基因的相对表达量。 1 . 6 统计分析 采用O n e - w a y A N O V A 方法分析数据， 结果用x 士: 来表 尔 。 1 材料与方法 1 . 1 主要仪器与试剂 U - 3 0 1 0 型紫外可见分光光谱仪( H I T A C H I ) ; F - 4 5 0 0荧光 分光光度计( H I T A C H I ) ; S O ., 标准气体， 纯度为9 9 . 9 9 % a ， 购自 北京氦谱北分气体工业有限公司; N A D P H ， 试卤灵， 7 一 戊氧基 试卤灵， 对硝基苯酚和牛血清白蛋白( B S A ) 均购自S ig m a 公 司; 其余试剂均为分析纯。 1 . 2 动物的染毒处理 采用雄性W i s t a r 大鼠， 体重 1 8 0 - 2 0 0 g ， 由山西省中医研 究院动物房提供。采用 s o , 吸人染毒法， 实验动物分为对照、 1 4 , 2 8 和5 6 m g / 扩 四个组， 每组6 只大鼠。S 0 2 组每天吸人染 毒6 h ， 连续7 d 。对照组也在同类大小的染毒箱中接受相同时 间的过滤的新鲜空气。 将S 0 2 染毒组大鼠置于I M 3 玻璃染毒箱中， s o , 气体由 高压液化 S 0 2 不断输人箱内， 在人口处与不断输人的新鲜空 气混合配成实验所需浓度， 箱顶设有电动搅拌扇， 以使箱内 S 0 2 浓度均匀一致。箱内s o , 浓度采用盐酸副玫瑰苯胺分光 光度法测定， 实际 s o , 浓度测定值分别为( 1 4 . 1 1 士1 . 5 3 ) , ( 2 8 . 3 6 士 2 . 1 2 ) 和( 5 6 . 2 5 土 4 . 2 8 ) m g / m ' 。在s o , 动态吸入染毒 处理时， 动物停止进食和饮水。最后一次处理 1 8 h 后将大鼠 处死， 取出肝、 肺组织， 立即置于液氮保存。 1 . 3 C Y P 2 B 1 活性的测定 采用差速离心法提取肝和肺微粒体。采用考马斯亮兰法 测定微粒体蛋白浓度， 用 B S A做标准曲线。C Y P 2 B 1 的活性用 7 一 戊氧基试卤灵脱烃酶( P R O D ) 来表示。采用荧光分光光度 法测定4 1 ， 反应总体积 I m l ， 恒温 3 7 9 C , E x = 5 5 0 n m , E m = 5 8 5 n m ， 用试卤灵做标准曲线进行计算。 1 . 4 C Y P 2 E 1 活性的测定 C Y P 2 E 1 的活性用对硝基苯酚羚化酶活性来表示， 采用分 光光度法测定( 5 1 . 5 C Y P 2 B 1 和2 E 1 m R N A水平的测定 取1 0 0 m g 肝或肺组织用T ri z o l 提取总R N A ， 琼脂糖凝胶电 泳检测 R N A纯度， 分光光度计测定 O D 2 6 0 n m及 O D 2 8 0 n m 。取 2 l cg 总R N A 采用A M V反转录体系合成c D N A 。然后对c D N A 进行C Y P 2 B 1 , C Y P 2 E 1 和G A P D H的P C R 扩增。扩增引物序列 及 产物长度分别为G A P D H F P , 5 ' - A T G T A T C C G TTG T G G A T C T G A C - 3 ' ;G A P D H R P , 5 ' - C C T G C TTC A C C A C C TTC TTG3 ' ， 9 8 饰; C Y P 2 B l F P , 5 ' - G A G T T C TTC T C T G G G TTC C T G - 3 ' ; C Y P 2 B 1 R P , 5 一 A C T G T G G G T C A T G G A G A G C T G3 ' , 5 4 9 b p ; C Y P 2 E 1 F P , 5 ' - T C T G A G A T A T G G G C T C C T G A - 3 ' ; C Y P 2 E 1 R P , 5 一 C G G G G A A T G A C A C A G A G T TT- 3 ' ， 5 5 5 b p 。 反应总体积为 2 0 闪 ， 其中含 l l cl c D N A , 3 . 5 m m o l/ L M 邪12 , 0 . 2 m m o U L d N T P , 5 0 0 n m o U L 引物和1 U T a g D N A 聚合酶。 反应条件: G A P D H , 9 4 9 0 2 0 x , 6 0 C 2 0 s , 7 2 9 0 2 0 s , 2 5个循环; C Y P 2 B 1 , 9 4 9 C 4 5 s , 6 0 9 C 3 5 s , 7 2 9 C 4 5 x , 2 8 个循环; C Y P 2 E 1 , 9 4 9 C 4 5 s , 6 2 9 C 3 5 s , 7 2 9 C 4 5 x , 3 0 个循环。琼脂糖凝胶电泳后用凝胶 2 结果 2 . 1 不同浓度S 0 2 对大鼠肝和肺微粒体C Y P 2 B 1 活性影响 如表 1 所示， S O : 吸人后， 大鼠肝、 肺微粒体P R O D活性随 着浓度的增加而逐渐降低。其中大鼠吸人2 8 和5 6 m g / 耐s o , 均可引起肝微粒体 P R O D活性的显著降低， 分别为对照组的 0 . 7 4 和0 . 6 2 倍， 且呈明显的剂量一 效应关系( r = 0 . 9 8 6 2 ) ; 肺 微粒体P R O D 活性只在5 6 m g / m 3 S 0 2 处理组与对照组相比显 著下降， 为对照组的0 . 7 1 倍。 表1 不同浓度s o , 对大鼠肝、 肺微粒体P R O D的影响 T a b l e 1 E ff e c t s o f S 0 2 e x p o s u r e o n e x p r e s s i o n o f P R O D a c t i v i t y i n r a t l i v e r a n d l u n g ( n = 6 , x t s ) p m o l/ ( m g p r o t “ m i n ) S O : 浓度 ( . g / 时) 0 ( 对照组) 1 4 肝 P R O D肺 P R O D 1 3 . 0 7 t 2. 5 4 1 2 . 1 9士1 . 2 6 9 . 7 3 士1 . 6 3 ( 1 ) 8 . 1 4士3 . 1 8 ( ' ) 6. 4 0士1 ， 1 4 5 . 8 8士0. 4 3 5. 7 5士0 . 5 6 4 . 5 2士1 . 0 0 川 2S56 注: ( 1 ) 与对照组比较 P 0 . 0 5 2 . 2 不同浓度 S 0 2 对大鼠肝和肺微粒体 C Y P 2 E 1 活性影响 如表2 所示， 大鼠吸人S 0 2 后， 肺微粒体 p - N P 活性随着 浓度的增加而逐渐降低。 其中大鼠吸人2 8 和5 6 m g / 耐 S 0 2 均 可引起肺微粒体p - N P 活性的显著降低， 分别为对照组的0 . 6 0 和0 . 5 4 倍， 且呈一定的剂量 一效应关系( r = 0 . 8 6 8 0 ) ; 肝微粒 体p - N P 活性在各 S 0 2 处理组与对照组相比差异均不显著。 结果表明S 0 2 对肺C Y P 2 E 1 活性的影响比对肝的更大。 表2 不同浓度S O : 对大鼠肝、 肺微粒体p - N P的影响 T a b l e 2 E f f e c t s o f S 0 2 e x p o s u r e o n e x p r e s s i o n o f p - N P a c t i v i t y i n r a t l i v e r a n d l u n g ( n = 6 , x ts ) n m o l / ( m g P r o t - m i n ) S O : 浓度 ( m g / m 3 ) 肝 p - N P 肺 p - N P 0. 5 0士0 . 1 1 0. 4 6 1 0 . 0 6 0. 4 5 1 0. 1 3 0. 4 2+0. 0 6 0 . 2 1 土0. 的 0. 1 3士0. 0 5 0 . 1 2 士 0 . 0 2 “ ' 0 . 1 1 士 0 . 0 2 “ ' 0142856 注: ( I ) 与对照组比较 P 0 . 0 5 2 . 3 不同浓度S 0 2 对大鼠肝和肺C Y P 2 B 1 和2 E 1 m R N A表达 水平的影响 由表3 可以看出， S 0 2 吸人后， 大鼠肝、 肺C Y P 2 B 1 m R N A 水平随着浓度的增加而逐渐降低， 其中2 8 , 5 6 m g / 耐S q处理 组与对照组差异显著。S 0 2 浓度与肝、 肺C Y P 2 B l m R N A水平 之间存在一定的剂量效应关系( r = 0 . 9 7 0 3 一 0 . 9 7 6 4 ) 。大鼠 肝、 肺C Y P 2 E 1 m R N A水平随着浓度的增加而逐渐降低， 其中 5 5 6卫生研究第 3 5 卷 吸人2 8 和5 6 m g / 时s o , 均可引起肺C Y P 2 E 1 m R N A的显著降 低， 且呈一定的剂量效应关系( ; 二 0 . 8 3 6 9 ) ; 肝 C Y P 2 E I m R N A 在各S 仇处理组与对照组相比差异均不显著。结果表明s o , 对肺的C Y P 2 E 1 m R N A的影响比对肝的更大。 表3 不同浓度S 0 2 对大鼠肝、 肺C Y P 2 B 1 和C Y P 2 E 1 m R N A的影响 T a b l e 3 E f f e c t s o f S 0 2 e x p o s u r e o n m R N A o f C Y P 2 B 1 a n d C Y P 2 E 1 i n r a t li v e r a n d l u n g ( x t s ) S O : 浓度 ( m g / m m ) C YP 2 B 1 / GAPDH 肺 CY P 2 B1 / GAP DH C YP 2 E1 / GAP DH C YP 2 E1 / GAP DH 0 . 9 6土0. 2 5 0 . 7 3士0. 2 8 0 . 6 8 土 0 . 1 1 0 ) 0 . 4 5 士 0 . 0 8 ( 3 ) 0 . 6 1 士0 . 1 3 0 . 6 1士0 . 0 4 0 . 5 2 士 0 . 0 6 ( ' ) 0 . 4 1 士 0 . 0 82 ) 1 . 3 1 士0 . 2 4 1 . 2 510 . 1 3 1 . 1 0士0 . 1 6 1 . 0 6士0. 1 5 0 . 5 1 士0 . 肠 0 . 4 5士0. 0 4 0 . 2 7 士 0 . 0 3 ( 2 ) 0 . 2 1 士 0 . 0 2 ( ; ) s o , 诱导产生的C Y P 2 B l 和C Y P 2 E l 活性及m R N A 水平降 低的另一机理可能与细胞因子的释放有关。有人发现在炎症 和感染时细胞因子和干扰素的增多会引起 P 4 5 0酶活性降 低 s 7 。细胞因子还可导致P 4 5 0 酶的功能型抑制。研究表明 s 0 2 吸 人可 通过细 胞因 子的释放引 起小鼠 肺的 炎症反应 ， s o , 在体内的衍生物亚硫酸钠也能诱导人嗜中性粒细胞内和 细胞外1 L - 1 2 和I L r 8 水平升高 10 7 。因此可以推测在大鼠的 肝、 肺中细胞因子也可能升高， 从而引起 C Y P 2 B l 和 C Y P 2 E 1 的降低。 总之， 本研究表明s o , 可降低肝、 肺C Y P 2 B l 和肺C Y P 2 E 1 的活性及 m R N A水平， 这可能与R O S 和( 或) 细胞因子的参与 有关， 肝、 肺组织对外源化合物及药物的代谢可能会因此受到 影响 。 0142856 注: 与对照组比较( 1 ) P 0 . 0 5 ( 2 ) P 0 . 0 1 ( 3 ) P 0 . 0 0 1 4 参考文献 I M e n g Z . O x i d a ti v e d a m a g e o f s u l f u r d i o x i d e o n v a r i o u s o r g a n s o f 3 讨论 一般认为空气s o t 污染可对呼吸系统产生毒害作用， 引 起哮喘及慢性和急性气道阻塞性疾病， 甚至与肺癌的发生有 关。近来还发现s o t 及其衍生物为全身性毒物， 不仅可引起 小鼠肺组织， 还可引起小鼠其它多种器官的 D N A损伤和氧化 损伤 1 ,2 1 C Y P 2 B 1 可受苯巴比妥的诱导， 可代谢转化黄曲霉毒素 B I 及烟草中的有害物质。C Y P 2 E 1 则主要参与乙醇等小分子化 合物的代谢， 特别是亚硝胺在体内产生致癌、 诱变产物必须经 C Y P 2 E 1 的经化作用。 本文测定了动式吸人不同浓度 S q 后 W i s t a r 大鼠肝、 肺 微粒体细胞色素P 4 5 0 酶主要亚型 C Y P 2 B l 和 C Y P 2 E l 活性和 m R N A 的变化。结果发现: 随着 S 0 2 吸人浓度增加， 大鼠肝 C Y P 2 B 1 活性及 m R N A 、 肺组织 C Y P 2 B 1 m R N A 、 肺 C Y P 2 E 1 活性 及m R N A 也逐渐降低， 且存在明显的剂量效应关系; 肺微粒体 C Y P 2 B 1 活性在 5 6 m g / m ' S q 处理组降低显著; 肝微粒体 C Y P 2 E 1 活性及m R N A 未发生显著改变。表明S 0 2 导致肝、 肺 微粒体P 4 5 0 同工酶活性改变的机理可能相似。S O z 对肺2 E 1 的影响比对肝强， 表明S O : 对不同亚型P 4 5 0 酶的抑制作用强 弱在不同组织有所差异。 S 0 2 诱导C Y P 2 B 1 和C Y P 2 E 1 活性降低的机理之一可能与 S q 引起的氧化应激有关。据报道 S O : 吸人可引起小鼠肝和 肺的氧化应激 。作为氧化应激的一种适应反应， 在氧化应 激状态下P 4 5 0 表达会下调“ ' , P 4 5 0 的下调又导致少量活性 氧( R O S ) 产生， 在 P 4 5 0酶所参与的反应中经常有 R O S的产 生， 而且， R O S 的增多所造成的氧化应激又容易使 P 4 5 0酶的 关键位点发生氧化损伤， 导致酶结构的完整性受到破坏， 使其 功能丧失， R O S 还可能会影响P 4 5 0 蛋白的三维结构 7 1 s u l f u r d i o x i d e i s a s y s t e m i c o x i d a t i v e d a m a g e a g e n t . I n h a l T o x i c o l 巧 : 1 8 1 - 1 9 5 m ice2003 一 2 M e n g Z , Q i n G , Z h a n g B , e t a l . D N A d a m a g i n g e ff e c t s o f s u l f u r d i o x i d e d e r i v a t i v e s i n c e l l s f ro m v a r i o u s o r g a n s o f m i c e . M u t a g e n e s i s , 2 0 0 4 , 1 9 : 4 6 5 - 4 6 8 3 马璨， 钱范丽. 人类细胞色素 P 4 5 0 s 研究概况及其在新药安全性 评价. 中国新药杂志， 2 0 0 2 , 1 1 ( 1 ) : 3 6 - 4 2 4 B u r k e M D , T h o m p s o n S , E l c o m b e C R , e t a l . E t h o x y - , p e n t o x y - a n d b e n z y l o x y p h e n o x a z o n e s a n d h o m o l o g u e s : a s e r i e s o f s u b s t r a t e s t o d i s t i n g u i s h b e t w e e n d i ff e r e n t i n d u c e d c y t o c h r o m e s P 4 5 0 . B i o c h e m P h a r m a c o l , 1 9 8 5 , 3 4 : 3 3 3 7 - 3 3 4 5 5 P a o l i n i M, P o z z e t t i L , P e ro c c o P , e t a l . M o l e c u l a r n o n - g e n e t i c b i o m a r k e r s o f e ff e c t r e l a t e d t o m e t h y l t h i o p h a n a t e c o c a r c i n o g e n e s i s : o r g a n - a n d s e x - s p e c i f i c c y t o c h ro m e P 4 5 0 i n d u c t i o n i n t h e r a t . C a n c e r L e t t e r s , 1 9 9 9 , 1 3 5 : 2 0 3 - 2 1 3 6 P a l l e r M S , J a c o b H S . C y t o c h r o m e P 4 5 0 m e d i a t e s t i s s u e - d a m a g i n g 场d ro x y l r a d i c a l f o r m a t i o n d u r i n g r e o x y g e n a t i o n o f t h e k i d n e y . P r o c N a t l A c a d S c i , 1 9 9 4 , 9 1 : 7 0 0 2 - 7 0 0 6 7 I r i z a r A. l o a n n i d e s C. a c t i v i t y i n 1 9 9 8 , 1 2 6 : c h o l e s t e rol - i M a r k e d i n h i b i t i o n o f h e p a t i c c y t o c h ro m e P 4 5 0 n d u c e d a t h e ro s c l e ro s i s i n r a b b i t s . T o x i c o l o g y , 1 7 9 - 1 9 3 8 R e n t o n K W, K n i c k l e L C . R e g u l a t i o n o f h e p a t i c c y t o c h r o m e P - 4 5 0 d u r i n g i n f e c t i o u s d i s e a s e . C a n J P h y s i o l P h a r m a c o l , 1 9 9 0 , 6 8 : 7 7 7 - 7 8 1 9 孟紫强， 刘玉香， 武冬梅. 二氧化硫对小鼠肺及血清中细胞因子 的影响. 中国公共卫生， 2 0 0 4 , 2 0 : 1 0 5 0 - 1 0 5 1 1 0 R a t t h e C , P e l l e t i e r M, R o b e r g e C J , e t a l . A c t i v a t i o n o f h u m a n n e u t ro p h i l s 场 t h e p o l l u t a n t s o d i u m s u l f i t e : e f f e c t o n c y t o k i n e p ro d u c t i o n , c h e m o t a x i s , a n d c e ll s u r f a c e e x p r e s s i o n o f c e l l a d h e s i o n m o l e c u l e s . C l i n i c a l I m m u n o l , 2 0 0 2 , 1 0 5 : 1 6 9 - 1 7 5 ( 2 0 0 5 - 1 0 - 2 9 收稿)