不同探诊深度种植体周龈沟液中 3种酶含量的检测.pdf
1505实用医学杂志 2006 年第 22 卷第 13 期 不同探诊深度种植体周龈沟液中 3 种 酶含量的检测 李照峰刘宏伟徐世同章锦才 摘要目的： 通过检测不同探诊深度(PD)种植体周龈沟液中型胶原酶 （MMP-8） 、 碱性磷酸酶(ALP)、 天冬氨酸转 氨酶 （AST ） 水平, 分析种植体周 PD 的变化是否对种植体周围炎的发生和发展有影响。方法：在种植义齿修复后半年， 测 量 30 个 Frialit-2 种植体周 PD， 并根据深度分为 3 组, PD 2 mm 组、 2 mm 4 mm 组， 同时选择 10 颗天然牙齿作对照， 检测龈沟液量、 MMP-8、 ALP、 AST、 种植体周骨丧失， 并对检测结果进行统计学分析。 结果： 与其他各组 相比， PD 4 mm 组各项检测指标均有明显增高， 统计学处理差异有显著性 （P 4 mm 组。每组随机抽取 10 个种植体，同时选择 10 颗与种植牙同颌的天然同 名牙为对照。 1. 3检查项目和方法 1. 3. 1龈沟液量 (GCF) 的收集去除种植义齿及天 然牙龈上菌斑， 清水漱口， 消毒棉球隔湿， 气枪轻轻吹 干牙面， 将专用滤纸条 （periopaper） 插入龈沟至遇轻微 阻力，留置 60 s 后取出 (若滤纸条上有血或唾液则弃 去), 立即用龈沟液测量仪（periotron 8000）测量 GCF 量，放入 Eppendorf 管中。1 min 后以同样的方法在同 一部位再次收集 GCF，定量后放入同一个 Eppendorf 管中， 两次 GCF 量之和记为该部位 GCF 量 （µL） 。 此法 能提高样品中酶的浓度2。 将 Eppendorf 管放入 - 70 冰箱保存。 1. 3. 2MMP-8 及 ALP、AST 的检测从 - 70冰箱 取出 Eppendorf 管，室温下解冻，每管中加入 200 µL pH 8. 0 Tris-HCl 缓释液，振荡 1 h，低温离心 10 min （4， 10 000 r / min）, 取上清液各 100 µL 分别加入 A、 B 两个 Eppendorf 管中。 A 管用 ELISA 双抗夹心法检测 样品中 MMP-8 的含量 （MMP-8 ELISA 试剂盒， 深圳晶美 生物工程有限公司） ， 结果以酶浓度(ng / mL)表示。B 管 用 Beckman 全自动生化分析仪测定龈沟液中 AST、 ALP 的活性水平, 结果以酶总量(µIU / 位点)表示。 1. 3. 3种植体周骨丧失量 （BL） 的检测每个种植体 上基桩前及修复后半年时咬 5 mm 钢珠拍摄曲面断层 片并用数字减影技术（digital subtraction radiography） 处理, 以纠正放大比例不同带来的误差3， 仔细测量种 植体从种植体 - 基台结合部(fixture-abutment junction) 至牙槽嵴顶冠方距离的差, 求得 BL。 1. 4统计学分析实验数据均以 x ± s 表示，采用 SPSS 11. 0 统计软件包（南方医科大学统计教研室提 供）进行处理。样本均数的比较采用单向方差分析 （One-way ANOVA） ；样本均数间的多重比较采用 LSD 法。 2结果 各组种植体周 GCF 量及 MMP-8、 ALP、 AST、 BL 的 比较如表 1 所示， 修复后半年时 PD 4 mm 组的 GCF 作者单位： 510280广州市， 广东省口腔医院 （李照峰， 徐世同， 章锦才） ； 200072上海市， 同济大学口腔医院口腔内科 （刘宏伟） 通讯作者： 徐世同E-mail xushitong621016 126. com 实用医学杂志 2006 年第 22 卷第 13 期1506 量及 MMP-8、 ALP、 AST、 BL 与其他各组相比差异均有 显著性( P 4 mm 组 F 值 GCF(µL) 0. 68 ± 0. 34 0. 70 ± 0. 39 0. 82 ± 0. 58 1. 56 ± 1. 04*#$ 7. 131 MMP-8(ng / mL) 112. 34 ± 24. 03 134. 26 ± 31. 52 158. 67 ± 55. 69 736. 20 ± 109. 34*#$ 14. 763 ALP(µIU / 位点) 43. 12 ± 36. 51 69. 88 ± 41. 50 88. 24 ± 32. 54 178. 93 ± 106. 78*#$ 7. 219 AST(µIU / 位点) 258. 29 ± 211. 24 277. 95 ± 226. 67 362. 56 ± 314. 95 671. 30 ± 512. 87*#$ 5. 145 BL(mm) - 0. 46 ± 0. 35 0. 60 ± 0. 34 0. 94 ± 0. 33#$ 5. 984 1 2 3 4 5 6 7 少量 MMP-8， 参与牙周组织的更新和重建。但在病理 条件下，以中性多形核白细胞为主的多种细胞都能产 生 MMP-8， 使 MMP-8 水平明显升高。ALP 是一种具有 生物活性的蛋白质, 为成骨细胞的功能酶, 可反映骨 组织的活动性变化4。 AST 为一种可溶性细胞胞浆酶, 健康状态下绝大部分 AST 存在于细胞浆内,当组织 破坏、细胞坏死时，则有大量 AST 出现于细胞外环 境，因此当在 GCF 中检测到高水平的 AST 时，即表 明牙周组织细胞正在发生破坏。本研究通过对龈沟 液中 MMP-8、AST、ALP 的检测和分析，可以有效地 了解种植体周组织的代谢状况和种植体周炎的病变 活动状况。 在本研究中 PD 2 mm、2 mm 4 mm 3 组的 GCF 量及 MMP-8、 ALP、 AST、 BL 呈 现升高趋势， 这就说明随着种植体周 PD 的增加， 提供 了有利于牙周致病菌生存的环境，导致螺旋体和可动 菌比例的增加5， 增加了种植体周围炎发病的风险。 在本研究中 PD 4 mm 组的 GCF 量及 MMP-8、 ALP、 AST、 BL 均显著高于其他各组， 而天然牙组、 PD 2 mm 组、 2 mm 4 mm 组所有种植体总体上均 处于临床健康水平，无松动、溢脓，平均骨吸收 0. 89 mm，处于种植义齿第 1 年的正常骨吸收水平（0 2 mm） 7， 这可能与观察时间较短有关， 还需要进行进一 步的追踪观察研究。 4参考文献 MARINELLO C P, BERGLUNDHL T, ERICSSON I， et al. Resolution of ligature-induced peri-implantitis lesions in the dogJ . J Clin Periodontol, 1995， 22(6) 475 - 479. BINDER T A， GOODSON J M, SOCRANSKY S S. Gingival fluid levels of acid and alkaline phosphatascs J. J Periodont Res, 1987， 22(1) 14 - 19. 郑美华， 温映萍， 陈伟良, 等 . 酸蚀面螺纹状牙种植体的临床研究 J. 实用医学杂志, 2003， 19(6) 612 - 613. PAGE R C. Host response tests for diagnosing periodontal diseases J. J Periodontal, 1992， 63(4 Suppl) 356 - 366. AUGTHEN M， CONRADS G.Microbial findings of deep peri - implant bone defects J . Int J Oral Maxillofac Implants，1997，12 (1) 106 - 112. LANG N P,NYMAN S R. Supportive maintenance care for patients with implants and advanced restorative therapyJ.Periodontal 2000, 1994(4) 119 - 126. QUIRYNEN M, NAERT I, VAN STEENBERGHE D, et al. Periodontal aspects of osseointegrated fixtures supporting an overdenture. A 4-year retrospective study J. J Clin Periodontol, 1991, 18(10) 719 - 728. (收稿： 2006 - 02 - 07修回： 2006 - 04 - 17)
