体外转染PTEN抑制胆管癌QBC939细胞生长及下调MTOR表达的研究.pdf
第 !“ 卷第 # 期 $%.: # ? （$% 抑制胆管癌 EF# 细胞生长 及下调 GCHI 表达的研究 刘民锋，徐立宁，左石，罗剑，郭伟，董泾青，邹声泉 （华中科技大学同济医学院附属同济医院 普通外科，湖北 武汉 ?#%#% ） 88摘 要：目 的 8研 究 信 号 转 导 通 路 BJ# K L MKC L BCD; L GCHI 中 抑 癌 基 因 BCD; 在 体 外 对 胆 管 癌 EF# 细胞生长的抑制作用， 及对下游 GCHI 表达的影 响。方 法 8用 携 带 有 野 生 型 BCD; 和 突 变 型 BCD; 的真核表达载体及空载质粒转染 EF# ； 用 N+,O+0* P2.O 检测转染后 BCD; 蛋白的表达及蛋白激 酶 F 磷酸化的变化； 流式细胞技术检测细胞周期和细胞凋亡情况， 及对下游 GCHI 表达的影响。结 果 8野生型 BCD; 转染成功后的 EF# 细胞中 BCD; 明显上升， 磷酸 化 MKC 明 显 下 降， GCHI 表 达 也 明 显下调； 而突变型 BCD; 转染后的细胞中 BCD; 上升， 但磷酸化 MKC 的 变 化 不 明 显， GCHI 的 表 达 亦 无 明显变化。结论8BCD; 通过磷酸化 MKC 使之活化， 进 一 步 使 下 游 的 GCHI 同 步 下 调， 继 而 调 节 肿 瘤 细胞周期和细胞凋亡。在 BJ# K L MKC L BCD; L GCHI 信 号 转 导 途 径 中， BCD; 与 GCHI 通 过 MKC 的 磷 酸 化有密切关系。 关键词：胆管癌细胞；抑癌基因；转染 中图分类号：I#“ : A ；I#% : $# : !# 8888文献标识码：M !“#$%/)%52 ?6A “ # 1* !$?5SBCD; )* Y)O0.:M3O+0 O01*,3+ZO).*，O(+ +0+,).* .3 O(+ BCD; 1* (.,(.0721O).* .3 MKC 1* GCHI V1, +O+ZO+ P7 N+,O+0* P2.O: 2.V Z7O.G+O07 V1, /,+ O. 1*127_+ 1.O.,), 1* Z+22 Z7Z2+ .3 O(+ O01*,3+ZO+ Z+22,: 8$%4/: .V+Y+0，13O+0 O01*,3+ZO).* V)O( G/O1O).*SO7+ BCD;，O(+ 2+Y+2 .3 BCD; )* O(+ Z+22, P7 )*Z0+1,+，P/O (.,(.0721O).* MKC 2+Y+2 1* GCHI +0+,).* (1 *. ,)6*)3)Z1*O Z(1*6+: ;*“./4%*“% 8 BCD; Z1* P+ 1ZO)Y+ P7 (.,(.0721O+ MKC:MZO)Y+ MKC +Z0+1,+ O(+ GCHI V()Z( 2+ O. O/G.0 Z+22, 1.O.,), 1* 0+6/21O).* .3 O(+ O/G.0 Z+22 Z7Z2+: J* O(+ 1O(V17 .3 ,)6*12 O01*,G),).* .3 BJ#K L MKC L BCD; L GCHI，BCD; 1* GCHI 10+ Z2.,+27 0+21O+ O(0./6( (.,(.0721O).* .3 MKC: E$F 1*02%： F)2)107 C01ZO 10Z)*.G1 +22 Q)*+；C/G.0 5/+,.0 4+*+；C01*,3+ZO ;G; “45-$0：I#“ : A ；I#% : $# : !# 888888H*.45$“ 携 带 的 野生 型 $*+, 质 粒， $670“8!97 8$*+,83“0?; 教 授 提 供。I-K?0NNN 脂质 体 转 染 试 剂 盒 购 自 美 国 %?OK;ELP? 公 司， 质 粒 大 提 试 剂 盒 为 1KIP? 公 司 产 品。 ! 5 #“实验方法 “5 05 “!细胞培养 !胆 管 癌 细 胞 在 “NQ A2= （ 胎 牛 血清） 的培养 基 中 种 植， ， $670“ 8!97 8$*+,83“0Y;E? GTL; （ 免 疫 印 迹） !转 染 5?: ! A #“细胞周期和细胞凋亡情况 流式细胞 术 检 测 可 见， 野 生 型 #$% ， 并能直接磷酸化 .(，-CBBCDD ?，EF.BBGFHIC ;“ ， $/ （4 ） ： V%4 3 V/; U $ !WRGBJ IJBGOIBJ KS FGBFCS DHCS= NP T U .GBFCS， $;0 ， 0 （0 ） ： 0:“ 3 0: U 0 !TIGBJR 3 $“# U 4 !汤聪， 孙华文， 邹 声 泉， 等U 导 入 ()*+ 基 因 抑 制 胰 腺 癌 细 胞体外 生 长 的 研 究 T U 中 华 实 验 外 科 杂 志， $;0 ， $; （: ） ： $%$ 3 $%0 U : !;$，（4 ） ： “$V 3 “0# U “$;4 中国国际肝胆外科论坛 肝移植时代东西方肝胆疾病治疗策略 演变” 征文通知 由第三军医大学、 解放军总医院主办， 解放军西南肝胆外科医院和 消化外科 编辑部承办的 $;4 中国国际肝 胆外科论坛 3 3 肝移植时代东西方肝胆疾病治疗策略的演变 学术会议将于 $;4 年 V 月 “$ “0 日在北京市 （ 或重 庆市） 召开。届时将邀请欧美、 日本等国家及港台地区和中国大陆的知名肝脏移植及肝胆外科专家 0; 余名作专题演 讲， 并以肝移植时代的肝胆外科为主题展开广泛深入的学术交流研讨， 这将是我国外科学界的又一次盛会， 对促进我 国肝脏移植和肝胆外科的技术创新和可持续发展具有重要意义。欢迎全国外科同仁踊跃投稿参会。优秀论文将在 消化外科 优先发表。参会者可获得国家级继续教育 8 类学分 V 分。 征文内容： 有关肝细胞癌、 肝硬化门静脉高压症、 肝移植胆道并发症、 活体肝移植、 劈离式肝移植、 儿童肝移植及 多脏器移植等领域的临床及基础研究。 征文要求：（“） 请寄论文全文及 V; 字左右的 摘 要， 注 明 会 议 征 文， 同 时 附 稿 件 电 子 版 一 份 （ * 3 5GIO 或 软 盘） ； （$） 截稿日期 $;4 年 : 月 “# 日。 投稿地址： 重庆市第三军医大学西南医院 消化外科 编辑部 收 邮政编码： %;0V * 3 5GIO： MIJRSJ_ $40U BCD 电话： ;$0 3 4V:#%4#， 传真： ;$0 3 4#0“:40， 联系人： 郑树国 陈敏 %V“
