兴灵汤对正常大鼠血清瘦素和性激素的影响.pdf

第2 3 卷第4 期 2005年 4月 中B E药学刊 A R C H I V E S OF T R A D IT I O N A L C H I N E S E ME D I C I N E V o l . 2 3 No . 4 A p r . ， 2 0 0 5 文章编号: 1 0 0 9 一 5 2 7 6 ( 2 0 0 5 ) 0 4 一 0 6 6 2 一 0 2 兴灵汤对正常大鼠血清瘦素和性激素的影响 刘建荣 ， 魏桃兰 ， 周安方2 ( 1 . 山西省人民医院男科， 11 1 西 太原0 3 0 0 1 2 ; 2 . 湖北中医学院， 湖北 武汉4 3 0 0 6 1 ) 摘 要: 目 的: 观察兴灵汤对正常大鼠血清夜素( L e p t in ) , 卵泡利激素( F S H ) 、 黄体生成素( L H ) , *1 A ( T ) 的影响。方法: 将4 0 只雄鼠随机分为空白组、 万艾可组、 男宝组、 兴灵汤组， 每组 1 0只， 连续用药1 5 天。检 浏正常大鼠 血清L e p t in , F S H , L H , T的含黄。结果: 男宝和兴灵汤可降低血清L e p t i n , F S H , L H ， 升高 血清T , 关链词: 瘦素; 辛阴; 黄体生成素; 兴灵汤 中图分类号: R一 3 3文献标识码: B 瘦素( L e p t in ) 是肥胖基因( o b e s e g e n e , o b 基因) 的产 物， 它与下丘脑一 垂体一 性腺轴的关系已有诸多报道， 因 此， 它与性功能的关系是不言而喻的。兴灵汤是临床治 疗勃起功能障碍的有效处方， 故笔者将正常大鼠作为实 验对象， 观察了该方对L e p t i n , 卵泡刺激素( F S H ) 、 黄体 生成素( L H ) , 皋酮( T ) 的影响。现报道如下。 ， 材料与方法 1 . 1 实验动物清洁级S D大鼠4 0 只， 3 月龄， 体重2 5 0 - 3 0 0 g 。由山西医科大学实验动物中心提供。自由饮食。 1 . 2 药物及制备 兴灵汤由淫羊霍、 蛇床子、 黄蔑、 人参、 当归、 白芍、 麦冬、 柏子仁等 2 0 余味中药组成。由 山西省中医药研究院制剂室按 9 5国家药典标准配制成 浸膏剂， 每m L 含生药1 . 8 g .万艾可 辉瑞制药有限 公司生产， 批号2 0 0 1 0 7 0 8 。将其粉末用蒸馏水配成浓度 为1 . 5 m 以m L的溶液。O)5 宝吉林通化东宝药业 有限公司生产， 批号 2 0 0 2 0 3 0 1 。用燕馏水配成 0 . 0 5 以 m L 的溶液。 1 . 3 分组与给药将 4 0只雄鼠随机分为空白组、 万艾 可组、 男宝组、 兴灵汤组 4 组， 每组 1 0只。自由饮食， 分 别用生理盐水、 万艾可溶液、 男宝溶液、 兴灵汤灌胃， 每次 2 m L ， 每日2 次， 连续 1 5 夭。 1 . 4 主要试剂大鼠瘦素放射免疫检测试剂盒( r a t L e p t i n R I A k i t ) , 购 自美国 L i n c o R e s e a r c h , s t . C h a r l e s , M O 。该方法的最低线形检测下限为0 . 5 n g / m L ， 最高线 形检测上限为5 0 n g / m L ， 批内和批间 变异( C V ) 9 4 %.血清卵泡刺激素( F S H ) 、 黄体生成素 ( L H ) , 皋酮( T ) 放免试剂盒， 购自 北京北方生物试剂研究 所。 2 结果 摘眼球取血， 分离血清， 应用放免法检测L e p t i n 和 F S H , L H , T的含量， 检测方法按试剂盒说明书操作。实 验结果用F检验进行统计分析。结果见表 1 , 2 0 表1 兴灵汤对正常大鼠 血清L e p t in 含量的影响( 又士 : ) 动物数( n )L e p t i n ( n g / m L ) 空白组 万艾可组 男宝组 兴灵汤组 2 . 4 7上0 . 2 5 2 . 4 2士0 . 2 3 2 . 1 4 士 0 . 2 1 0 2 . 1 5 士 0 . 2 8 0 000nU 孟J.三孟1 注: 与空白组比 较， P 0 . 0 5 . 表2 兴灵汤对正常大鼠血清 F S H , L H , T含量的影响( 叉士 : ) 动 物 数 ( n ) F S H ( u N / L ) 1 . 5 4 1 0 . 2 6 1 . 4 1 土 0 . 2 3 1 . 2 4 土 0 . 2 2 0 0 1 . 2 3 士 0 . 2 1 0 6 L H ( u N / L ) 4 . 5 2 士 0 . 5 5 4 . 5 4 士 0 . 4 5 4 . 1 6 1 0 . 5 8 4 . 0 1 士 0 . 5 1 0 T ( n u 耐 L ) 1 7 3 . 5 0 1 2 2 . 6 1 1 6 7 . 6 4 士 2 2 . 9 9 1 9 7 . 1 2 士 1 9 . 5 6 二 2 0 0 . 3 4 1 2 2 . 1 2 0 0 “ nllnUnUnll 工二二1 收稿B期: 2 0 0 4 一1 0 一 1 0 作者简介: 刘建荣( 1 9 6 7 一 ) ， 男， 山 西石楼人， 副主任医师， 博士， 主要从事中西医男科的临床和科研工作。 注 : 与 空 白 组比 较 ， 0 P 0 . 0 5 , P 0 . 0 1 ; 与 万 艾 可 组 比 较 ， . P 0 . 0 1 , 3 讨论 1 9 5 0 年， I n g a ll s 等发现了第一个可以导致深度肥胖 和2 型糖尿病的隐性基因突变， 并将此基因命名为肥胖 基因( o b e s e g e n e , o b ) o o b 基因在白色脂肪组织中特异表 达 其 产 物L e p t in o L e p t i。 可 以 作 用 于 下 丘 脑一 垂 体一 性 腺轴 I 。人类L e p t i n 基因突变的个体通常表现为性机 能 减 退和 不育 2 1 。虽 然L e p t i n 可以 作用于下丘脑一 垂 体一 性腺轴的 各个层次， 并且L e p t i n 基因突变表现为性 功能衰退， 但其机制还未完全明了。人们推测L e p t in 可 能是通过与其它代谢信号相互作用来发挥效应。据国外 报道， 葡萄糖作为主要的代谢能源提供给大脑， 以调控动 情周期 3 1 0葡萄糖的有效吸收量变化提供的 信息可引起 促性腺激素释放激素( G n R H ) 分泌改变。L e p t i n 对动情 周期的正调节又能被竞争性的葡萄糖拮抗剂一 2 一 脱氧 葡萄糖( 2 一d e o x y g l u c o s e ; 2 D G ) 抑制 4 1 。有文献报道， L e p t in 能 提 高G n R H 分 泌 5 1 。 但L e p t i。 并 不 是 直 接 刺 激 G n R H分泌， 而是通过突触传递信号刺激G n R H分泌 6 0 L e p t i n 还能直接作用于垂体， 促进 F S H , L H分泌。当 L e p t in 达 到1 0 - 9 m o 1/ L 时 ， F S H分泌 达到顶峰 ; L e p t in 达 到1 0 - 1 1 m o l / L 时， L H 分泌 达到顶峰， 两者却不会因L e p t i n 中医药 6 6 2 学刊 万方数据 第2 3 卷第4 期 2 005年 4月ARCHI VE S W .药学 OF T R A DIT I ON A L 刊 CHI N E SE ME DI CI NE V o l - 2 3 N o . 4 A p r . ， 2 0 0 5 文章编号: 1 0 0 9 一 5 2 7 6 ( 2 0 0 5 ) 0 4 一 0 6 6 3 一 0 6 超临界流体萃取柴胡果实精油及其化学成分分析 刘玉法， ， “ ， !司 玉凝 ， 刘云华“ ， 武 莹 ， 魏太明 ， 杨瑞君 ， 贾红婷， ( 1 . 北京中医药大学中药学院， 北京 1 0 0 1 0 2 ; 2 . 山东师范大学化学化工学院， 山东 济南2 5 0 0 1 4 ) 摘 要: 0 的: 提取柴胡果实精油并分析其 化学组成。方法: 采用超临 界流体革取技米( S u p e r c r i t i c a l F l u - i d E x t r a c t io n , 简称S F E ) 提取染胡果实的精油， 气相色语一 质语联用仅( G C - M S ) 分析和鉴定其化学成分。 结果: 精油的提取率为6 . 6 0 % ( V / W) ， 确定了7 3 个化合物。结论: 首次采用超临界革取法从柴胡果实中提 取精油， 精油的提取率是染胡根的3 倍多， 亚油酸、 鲸蜡醉乙酸醋、 亚油酸乙i a , ( 一) 石竹烯氧化物的相对含 贡分别为3 4 . 8 5 %, 1 6 . 6 3 %, 2 . 6 4 %, 1 . 8 1 %， 植醉、 鲸蜡醉酸脂、 亚油酸醋、 ( 一) 一 石竹烯氧化物为首次 从该属植物中发现。 关链词: 桑胡; 果实; 超临界萃取; 精油; 气相色语一 质语联用 中图分类号: R一 0 5文献标识码: B 1 概述 柴胡具有和解表里， 疏肝、 升阳的作用， 主要用于感 冒 发烧， 胸胁胀痛， 月经不调等症 1 1 。通常认为， 挥发油 和柴胡皂昔是柴胡的 主要活 性成分。 F u j io k a 等 2 1 已 从 圆叶柴胡果实中分离出1 0 个乌苏烷型三菇皂昔和 1 9 个 齐墩果烷型三菇皂昔， 另外， 药理实验证明乌苏烷型三菇 皂昔有抗增殖活性。目 前还没有柴胡果实挥发油的研究 报道。本文我们报道柴胡果实挥发油的超临界萃取及其 化学成分分析。 2 实验 柴胡果实采收于2 0 0 2 年河北省安国。经北京中医 药大学中 药学院阎玉凝教授鉴定为柴胡B u p l e u r u m c h i - n e n s e D C . 果实， 标本存放于北京中医药大学中药学院。 超临界萃取仪为S F X T M 2 - 1 0 ， 气相色谱一 质谱联用 仪( G C : 一 M S ) 为T u r b o M a s s G C M a s s S p e c t r o m e t e r ( P e r k i n E l m e r 公司) ， 色谱柱为弱极性石英毛细管柱( 长 3 0 m ， 内 径0 . 2 5 m m ， 膜厚0 . 2 5 1 c m ) ， 载气为H e ， 流量1 m L / m in , 分流比2 0 : 1 , F I D检测器， 进样口温度 3 0 0 r- , 温升速率 8 0 U / m i n , l m i n升至 8 0 t; 7 '- / m i n ， 升至 1 6 0 '- ; 3 r- / m i n ， 升至 2 6 0 - ; 1 0 '- / m i n ， 升至 3 0 0 -。电离方式为 E I ， 电子能量 7 0 e V ， 离子源温度 1 5 0 -， 扫描速度 i s ， 扫 描范围3 3 一6 0 0 m / z , 柴胡果实1 2 . 0 g 粉碎， 过4 0目 筛， 装入样品管并加 入0 . 5 m L乙醇。超临界萃取温度为5 0 'C， 液体C 0 2 压 中医药 继续升高而升高。 但L e p t in 继续升高， 可使G n R H分泌 下降， 说明L e p t i n 在达到一定浓度后， 可负反馈作用于 下丘脑， 这一点与垂体的负反馈调节相似。而对于肇丸， 当T浓度升高， 则L e p t in 分泌减少; T浓度降低， 则L e p - t i n 分泌 增加 '7 l 。 鉴于L e p t i n 与 性功能的 密 切关系 ， 笔者 首次将其作为衡量性功能的指标之一进行研究， 并观察 兴灵汤对其的调控作用。 在本实验中笔者观察到， 万艾可对L e p t i n , F S H , L H , T均没有明显的影响， 而男宝和兴灵汤却能降低L e p t i n , F S H , L H ， 又能升高T 。去除药物的作用后， L e p t in , F S H , L H 之间的相互作用， 应该是L e p t i n 减少引起F S H , L H 升高， 但因为有 T的存在， 是否由于男宝和兴灵汤作用 于皋丸， 引起 T升高， 才导致F S H , L H下降; 同时T和 L e p t i n 均作用于垂体， T升高能降低F S H和L H ， 而L e p - t in 降低能引起F S H和L H升高， 在两者的共同作用下， T占了主导地位， 引起了F S H和L H的降低。L e p t in 与 F S H , L H , T的确切关系， 还有待进一步深入研究。 6 6 3 学刊 收稿日期: 2 0 0 4 一1 0 一 2 1 作者简介: 刘玉法( 1 9 6 2 一) ， 男， 山东宁阳人， 副教授， 博士研究 参考文献: 1 F o s t e r D L , N a g a t a n i S . P h y s io l o g i c a l p e r s p e c t iv e o n l e p t in a s a r e g u l a t o r o f r e p d u c t io n : r o l e i n t i m in g p u b e r t y J . B io l R e - p r o d , 1 9 9 9 , 6 0 ( 2 ) : 2 0 5 一2 1 5 2 S t r o b e l A , I s s a d T , C a m o i n L , e t a l . A l e p t i n m i s s e n s e m u t a - t i o n a s s o c ia t e d w i t h h y p o g o n d is m a n d m o r b i d o b e s i t y J . N a t G e n e t , 1 9 9 8 , 1 8 ( 3 ) : 2 1 3 - - 2 1 5 3 S c h n e id d e r J E , Wa d e G N . A v a i l a b i li t y o f m e t a b o l i c f u l e s c o n - t r o ls e s t r o u s c y c li t y o f S y r ia n h a m s t e r s J . S c ie n c e . 1 9 8 9 , 2 4 4 ( 4 9 0 9 ) : 1 3 2 6 一1 3 2 8 4 S c h n e id d e r J E , G o ld m a n M D , T a n g S , e t a l . L e p t i n in d i r e c t l y a f f e c t s e s t rou s c y c l e s b y i n c r e a s i n g m e t a b o li c f u e l o x i d a t io n J . H o r m B e h a v , 1 9 9 8 , 3 3 ( 3 ) : 2 1 7 一 2 2 8 5 Y u WH , K i m u r a M, w a l p c z e w s k a A , e t a l . R o l e o f l e p t in i n h y p o t h a l a m ic - p i t u it a r y f u n c t io n j . P r o c N a t l A c a d S c i U S A , 1 9 9 7 , 9 4 ( 3 ) : 1 0 2 3 一1 0 2 8 6 C u n n i n g h a m M J , C li f t o n D K , S t e i n e r R A . L e p t in ' s a c t io n s o n t h e r e p r o d u c t iv e a x is : p e r s p e c t i v e s a n d m e c h a n is m s J . B io l R e p r o d , 1 9 9 9 , 6 0 ( 2 ) : 2 1 6 一2 2 2 7 B e h r e H M, S i m o n i M, N i e s c h l a g E . S t r o n g a s s o c i a t io n b e - t w e e n s e r u m l e v e l s o f l e p t io n a n d t e s t o s t e r o n e i n m e n J . C li n E n d o c r i n o l O x f , 1 9 9 7 , 4 7 ( 2 ) : 2 3 7 一2 4 0 生. 研究方向: 中药质量、 活性成分。 万方数据