氟桂利嗪对脑缺血再灌后学习记忆行为的影响.pdf

第1 8 卷第1 5 期 2 0 0 8 年8 月 中国现代医学杂志 C h i n aJ o u m a lo fM o d e mM e d i c i n e V 0 1 1 8N o 1 5 A u g 2 0 0 8 文章编号：1 0 0 5 8 9 8 2 ( 2 0 0 8 ) 1 5 2 1 4 6 0 3 ·论著· 氟桂利嗪对脑缺血再灌后学习记忆行为的影响 何晓静，曲晓梅 ( 中国医科大学附属第二医院，辽宁沈阳1 1 0 0 0 4 ) 摘要：目的观察氟桂利嗪时脑缺血复灌后学习记忆行为的影响。方法采用大、小鼠夹闭双侧颈总动脉， 脑缺血后复灌模型，动物分组给药，人工常规饲养7d 后，检测小鼠跳台错误次数、大小鼠Y 型迷宫试验来观 察大、小鼠学习记忆行为的改变。结果氟桂利嗪可以减少小鼠跳台试验次数，延长小鼠跳台试验的潜伏期，减 少大、小鼠Y 型迷宫试验中的错误反应次数。结论脑缺血复灌损伤可以导致记忆障碍。氟桂利嗪对脑缺血后 记忆障碍具有一定的改善作用。 关键词：氟桂利嗪；脑缺血再灌注损伤；学习记忆 中图分类号：R 一3 3 2文献标识码：A E f f e c t so fF l u n a r i z i n eO n l e a r I l i n ga n dm e m o r yi nm i c ea f t e r 一 C e r e D r a Il S C n e m l a r e p e r I U S l o nl n l U r V - V¨ H EX i a o - j i n g ，Q Ux i a o m e i 陬& c D 蒯4 萨Z i m e d 日唧i 脚矿劬i 眦胁以c 以踟面e 瑙如S k 彬 L 泐见垤J ，D D 只R 劬i 叫 A b s 打a c t ：【O b j e c t i v e lT oi n v e s t i g a t et l l ee 雎c t so fn u n a r i z i n eo nl e 锄i n ga n dm e m o r yi I lI I l i c eo rr a t s 如rc e 盼一 b r a li s c h e l I l i a r e p e 血s i o nd a I n a g e 8 【M e t h o d s 】n em o d e ko fc l 咖p i n gm eb i l a t e r a lc o 姗o nc a r o 甜a r t e r i e s ( c c A ) 锄di s c h e I I l i af o u o w e db yr e p e m s i w e r eu s e d ， K u n M i n gI I l i c e 明dW i s t a rm t sw e 陀删1 d o I I l l yd i V i d e di n t o3 g m u p s 明da d m i l l i s t e r e d 触e rt I l eu s u a lr e a rf o r1w e e k ，s t e pd o w n ，Y L a b y r i n t ht e s t sw e r eu 8 e dt 0m e 黯u r et l l e c h a n g e so ft l l ea b 山t yt ol e 蜘锄dm e m o r y 洒m i c ea n dm t s ，r e s p e c t i v e l y 【R 豁I 1 伍】T h ee 肿rn u m b e ro fm i c ei l l s t e p d o w nt e s ta n d8 h o c kn u m b e ro fl e 锄i n go rm e m o r y ，e s c 印l et i m ei nY l a ：b y I i n t l lo fm t sw e r ed e c r e a s e d S t e p - d o w nl a t e n c i e sw e r ei n c r e a s e d 【c o 眦l 吣i 蚰】R e s u l t ss h o w e dt I l a tc e r e b r a li 8 c h e m i a r e p e 面8 i o nd 锄a g ec o u l dr e - s I I l ti nd y s m n e s i a ，n u n a r i z i n ec o u l di m p m v et l l em e m o D rr e t e n t i o na n e ri s c h e m i a K e yw o r d s ：n u n 积z i n e ；c e r e b r a li s c h e m i a 一糟p e r f u s i o ni n j u r y ；l e 锄i n ga n dm e m o r y 血管性痴呆( v 鹬c u l a rd 啪e n t j a ，V D ) 是由一系 列脑血管因素( 缺血或出血及缺氧性脑血管病) 导 致脑组织损害而引起的获得性智能损害综合征。研 究结果证实，5 0 以上的V D 是脑血管损害导致的。 盐酸氟桂利嗪是双氟哌嗪类衍生物，属于第4 代高 选择性离子通道阻滞剂，能通过血脑屏障，进而减 少各种病因刺激下的过量钙离子跨膜进入细胞，造 成细胞损伤与死亡【l l 。已有研究显示氟桂利嗪能阻 止神经细胞因被剥夺神经营养因子而趋向死亡的 过程闭。本实验通过不同的方法制成V D 动物模型， 收稿日期：2 0 0 r 7 1 2 加1 研究氟桂利嗪对脑缺血再灌注后学习记忆损伤的保 护作用。现报道如下： 1 资料与方法 1 1 药品与试剂 氟桂利嗪胶囊( n u ，5m 粒) ，批号2 0 0 3 1 2 ，西 安杨森制药有限公司。 1 2 仪器 跳台箱、小鼠Y 型迷宫箱、大鼠Y 型迷宫箱 ( 沈阳药科大学药理教研室自制) 。 ·2 1 4 6 · 万方数据 第1 5 期何晓静，等：氟桂利嗪对脑缺血再灌后学习记忆行为的影响 1 3 动物 昆明种小鼠，体重1 8 2 2g ，雌雄兼用，由中国 医科大学附属第二医院临床医学实验动物中心提 供，合格证号：S C X K 辽 2 0 0 3 - 0 0 1 3 号；W i s t a r 大鼠， 体重1 8 0 2 0 0 9 ，雌雄兼用，由中国医科大学附属第 二医院临床医学实验动物中心提供，合格证号： S C X K 辽 2 0 0 3 - 0 0 1 3 号。 1 4 小鼠脑缺血再灌注损伤模型 3 1 昆明种小鼠，雄性，使用4 水合氯醛溶液0 4 s k s 腹腔注射麻醉，分离双侧颈总动脉，除假手术组 外，其余各组均用无创伤性动脉夹夹闭两侧颈总动 脉，缺血1 5r a i n 后取下动脉夹复灌缝合，即开始口 服给药。实验组E l 服氟桂利嗪1 3m s k s ，假手术组 及模型对照组口服等容量的0 5 C M C N a2 0 m I J k g ，每组1 0 只，术后常规饲养7d 后进行测定。 1 4 1 小鼠跳台试验 4 t 末次给药后0 5h 小鼠进行 跳台反应训练，训练时将小鼠置于反射箱内适应5 m i n 后，轻轻放于平台上，小鼠停留在平台的时间为 潜伏期( s t e p d o w nl a t e n c y ，S D L ) 。小鼠从平台跳 下，四肢接触铜栅时，立即通以3 6V 电刺激，小鼠 逃避至台上的时问为潜伏期( e s c a p el a t e n c y ，E L ) ， 以小鼠学会遇电刺激时可以正确逃避至平台上为指 标。于训练后2 4h 进行正式测验，记录5m i n 内跳台 错误次数、S D L 和E L 。测验时若小鼠停留在平台上 的时间超过3m i n ，将其取下放入箱内，尾对平台，给 予电刺激，记录E L 。 1 4 2 小鼠Y 型迷宫试验玲刀末次给药后0 5h 进 行Y 型迷宫训练，采用Y 型小鼠迷宫箱进行测试。 Y 型迷宫箱操作时要求周围光线暗而安静，迷宫箱 有3 个等分的箱臂，底部是可以通电的金属栅格，通 过外部开关的控制使各箱臂成为电击区( 起步区或 非起步区) 或无电安全区，各箱臂两端有红绿灯作 为标志，红灯亮表示此臂为电击区，绿灯亮表示此臂 为无电安全区。每次实验设置小鼠所在的区为起步 电击区，相邻的右臂为电击区，相邻的左臂为安全 区，指示灯开亮5s 后电击区通电( 交流电压5 0H z ， 3 6V ) ，观察小鼠对电击的逃避反应。小鼠逃至左邻 安全区为正确反应，逃至右邻电击区为错误反应，然 后断电停刺激，让小鼠休息3 0s ，再重复上述测试。 小鼠学习成绩以其达到连续1 0 次电击反应中有9 次正确反应( 9 1 0 ) 前所需的电击次数显示。次日测 试，达到9 1 0 正确反应前所需的电击作为记忆成 绩。 1 4 3 大鼠脑缺血再灌注损伤模型嗍W i s t a r 大鼠， 雄性，使用2 0 乌拉坦lg C k g 腹腔注射麻醉，颈部 正中切口，分离双侧颈总动脉，小动脉夹夹闭2 0 r a i n ，再灌1 0m i n ，再夹闭2 0r a i n 后取下动脉夹复灌 缝合，即开始口服给药。假手术组只切开皮肤，分离 血管，不夹闭，不再灌注。实验组口服氟桂利嗪0 9 m s k s ，假手术组及模型对照组口服等容量的0 5 C M C N a2 0m I A g ，每组l O 只，术后常规饲养7d 后进行测定。末次给药后0 5h 进行Y 型迷宫训练， 采用Y 型大鼠迷宫箱进行测试。其他均同“1 4 2 ”。 1 5 统计学处理 所有实验数据均以均数±标准差( x ±s ) 表示， 采用S P s S1 1 0 统计软件进行方差显著性分析 ( o n e w a yA N O V A ) ，组间比较采用L S D 检验。 2 结果 2 1 氟桂利嗪对小鼠跳台反应的影响 表l 显示，模型组小鼠的各项指标与假手术组 比较差异均有显著性( P 0 0 1 ) ，表明此模型成功。 氟桂利嗪1 3m g k g 组的跳台错误次数明显减少、潜 伏期显著延长、逃避时间明显缩短，与模型组比较差 异有显著性，上述结果提示氟桂利嗪具有明显促智 作用。 表1 氟桂利嗪对脑缺血再灌注损伤小鼠跳台试验错误次数 及潜伏期的影响( x ±s ，n - - 1 0 ) 注：1 ) 与模型组比较，P o 0 1 ， 2 ) 与模型组比较P O 0 5 2 2 氟桂利嗪对小鼠空间分辨学习记忆能力的影响 由表2 可见，氟桂利嗪1 3r a g k s 可减少脑缺血 再灌注损伤小鼠学习及记忆试验中的错误反应次 数，与模型组比较差异有显著性( P O 0 5 ) 。 表2 氟桂利嗪对脑缺血再灌注损伤小鼠空间分辨 学习的影响( i ±s ，n - - - 1 0 ) ·2 1 4 7 t 注：1 ) 与模型组比较，P O 0 1 ， 2 ) 与模型组比较，P O 0 5 万方数据 万方数据