清肺止咳平喘颗粒的药效学试验研究.pdf

·3 6 · 实用中医内科杂志 J O U R N A LO FP R A C T I C A LT R A D l T l O N A LC H I N E S El N T E R N A LM E D I C I N E N o v 200 9 V 0 1 2 3N o 1 2 清肺止咳平喘颗粒的药效学试验研究 杨文奇1 ，甘雨2 ，乔世带，付琳媛1 ，李显华2 ，安然1 ，孟莉2 ，于雪峰2 ，周淑梅2 ，指导：张宏 ( 1 辽宁中医药大学，辽宁沈阳1 1 0 0 3 2 ；2 辽宁省中医药研究院，辽宁沈阳1 1 0 0 3 4 ) 摘 要： 目的 观察清肺止咳平喘颗粒的止咳、化痰、平喘作用。 方法 采用小鼠氨水诱咳法观察镇咳作用；采用小 鼠酚红排泌法观察化痰作用：采用豚鼠卵蛋白喷雾引喘法观察平喘作用；采用小鼠二甲苯致炎观察抗炎作用。 结果 清肺 止咳平喘颗粒能显著减少浓氨水引起小鼠咳嗽次数并延长咳嗽潜伏期，能增加小鼠呼吸道的酚红排泌量。能延长豚鼠哮喘 潜伏期，并能显著降低豚鼠B A L F 中白细胞数量。 结论 清肺止咳平喘颗粒具有明显止咳、化痰、平喘作用。 关键词：清肺止咳平喘颗粒；止咳；化痰； 平喘 中图分类号：R 一3 3 文献标识码：Ad o i ：1 0 3 9 6 9 j i s s n 1 6 7 l - 7 8 1 3 2 0 0 9 1 2 1 7 P h a r m a c o d y n a m i cE x p e r i m e n t a lR e s e a r c ho nA n t i t u s s i v e ，E x p e c t o r a n ta n d A n t i a s t h m a t i cE f f e c t so fQ i n g f e iZ h i k eP i n g c h u a nG r a n u l e Y A N GW e n q i l ，G A NY u 2 ，Q L A oS h i j u 2 ，e ta l ，A d v i s o r ：Z H A N GH o n g ( 1 L i a o n i n gU n i v e r s i t yo fT r a d i t i o n a lC h i n e s eM e d i c i n e ，S h e n y a n g11 0 0 3 2 ，L i a o n i n g ，C h i n a 2 L i a o n i n gP r o v i n c i a lA c a d e m yo fT r a d i t i o n a lC h i n e s eM e d i c i n e ，S h e n y a n g11 0 0 3 4 ，L i a o n i n g ，C h i n a ) A b s t r a c t ： O b j e c t i v e T oo b s e r v et h ep h a r m a c o d y n a m i ee f f e c t i v e n e s so fQ i n g f e iZ h i k eP i n g c h u a ng r a n u l e i nt e r m so fr e l i e v i n gC O U 曲，e a s i n ga s t h m a ，s p u t u me h m i n a t i o na n da n t i i n f l a m m a t i o na c t i o n M e t h o d s T h e C O U g hm o d e li n d u c e db ya n u n o n i al i q u o ri nm i c ew a su s e dt oo b s e r v et h ea n t i t u s s i v ee f f e c m T h em e t l o do f P h e n o lR e di nm i c ew a su s e dt oi n v e s t i g a t et h ee x p e c t o r a n te f f e c t s T h ea s t h m am o d e lw a se s t a b H s h e db y o v a l b u m i ns e n s i t i z a t i o ni ng u i n e ap i g s T h em o d e lW B Si d e n t i f i e db yt h es t u d yo ft h ea s t h m ai n c u b a t i o np e r i o d a n dt h et o t a lw h i t ec e H sc o u n t si nb r o n c h o a l v e o l a rl a v a g ef l u i d ( B A L F ) R e s u l t s T h eQ i n g f e iZ h i k eP i n g - c h u a ng r a n u l ec o u l dd e c r e a s et h ef r e q u e n c yo fc o u g hi n d u c e db ya m m o n i al i q u o ra n dp r o l o n gt h el a t e n tp e r i o d o fc o u g h T h eg r a n u l ec o u l di n c r e a s ep h e n o lr e do u t p u to ft r a c h e ai nm i c e T h eg r a n u l ea l s oc o u l dl e n g t h e n t h ea s t h m ai n c u b a t i o np e r i o d r e d u c et h eq u a n t i t yo ft o t a lw h i t ec e U si nB A L F C o n c l u s i o n T h eQ i n g f e iZ h i k e P i n g c h u a ng r a n u l eh a ss i g n i f i c a n ta n t i t u s s i v e ，e x p e c t o r a n ta n da n t i a a t h m a t i ce f f e c t s K e yW o r d s ：Q i n g f e iZ h i k eP i n g c h u a ng r a n u l e ；a n t i t u s s i v e ；e x p e c t o r a n t ；a n t i a s t h m a t i c 清肺止咳平喘颗粒系辽宁省中医药研究院临床 经验方，用于支气管哮喘的治疗，具有清热宣肺、化痰 定喘的功效。主治支气管哮喘( 热哮) 之咳嗽、喘促、 胸闷、喉鸣、痰黄等症。本试验主要针对该药进行了 止咳、化痰、平喘方面的药效学研究，以期为临床应用 清肺止咳平喘颗粒治疗哮喘提供药效学依据。 1 实验材料 1 1 药品与试剂清肺止咳平喘颗粒由辽宁省中 医药研究院药学实验室提供，批号：2 0 0 7 1 2 1 4 ；桂龙咳 喘宁胶囊，桂龙药业( 安徽) 有限公司，批号：0 8 0 1 0 4 ， 0 8 0 3 1 5 ；咳泰( 氢溴酸右美沙芬胶囊) ，郑州羚锐制药 有限公司，批号：0 8 0 2 2 9 1 ；羧甲司坦片，广州白云山制 药股份有限公司，批号：1 0 8 0 0 0 1 ；氨茶碱片，赤峰蒙欣 药业有限公司，批号：0 7 0 5 0 2 ；氨水，国药集团化学试 剂有限公司，批号：2 0 0 7 1 1 2 1 ；酚红，国药集团化学试 剂有限公司，批号：F 2 0 0 7 0 1 2 9 ；碳酸氢钠，天津博迪化 工有限公司，批号：2 0 0 7 0 1 1 1 。 1 2 动物I C R 小鼠、豚鼠均由吉林大学基础医 学院实验动物中心提供，动物许可证号：S C X K ( 吉) 2 0 0 7 0 0 0 3 。 1 3 实验环境受试动物在辽宁省中医药研究院 动物室观察饲养试验。本动物室温度2 0 2 3 ，相 对湿度5 0 6 0 ，许可证号：S Y X K ( 辽) 2 0 0 7 0 0 1 0 。 1 4 仪器与设备Y L S 一8 A 多功能诱咳引喘仪，山 东省医学科学院设备站；D T 一1 0 0 分析天平，北京光 学仪器厂；7 2 1 分光光度计，山东高密彩虹分析仪器 有限公司；T D 5 A W S 低速台式离心机，长沙湘仪离 心机仪器有限公司；双目生物显微镜，日本O L Y M - P U S 。 1 5 统计方法各组结果以( 菇±s ) 表示，数据以 D A S2 1 1 软件统计分析，组间比较用t 检验。 2 实验方法与结果 2 1 对浓氨水喷雾法引起小鼠咳嗽的影响取 1 8 2 2 9I C R 小鼠6 0 只，雌雄各半，按体重随机分为 6 组。即空白对照组，清肺止咳平喘颗粒低( 6 0 5 9 生 药k g ) 、中( 1 2 1 0 9 生药k g ) 、高( 2 4 2 0 9 生药K g ) 剂量组，桂龙咳喘宁胶囊( 0 5 9 9 k g ) 组和咳泰 ( 0 0 1 5 6 9 k s ) 组。每天灌胃( i g ) 给药1 次，连续5 天，空白对照组给予等容积的蒸馏水。试验前各组小 鼠禁食1 6 h ，末次给药后3 0 r a i n ，将小鼠放入加有浓氨 万方数据 20 09 年 第2 3 豢第1 2 期 实用中医内科杂志 J O U R N A LO FP R A C T I C A LT R A D I T I O N A LC H I N E S EI N T E R N A LM E D I C I N E 。3 7 · 水的诱咳引喘仪内，雾化1 5 s ，观察记录小鼠的咳嗽 潜伏期( 从喷雾开始至动物出现咳嗽的时间) 和2 m i n 内咳嗽次数。结果见表1 。 表1清肺止咳平喘颗粒对浓氨水喷雾法 引起小鼠咳嗽的影响( i ±s ) 注：与空白对照组比较，P 0 0 5 ，P 0 0 1 。 结果表明：清肺止咳平喘颗粒中、高剂量组，桂龙 咳喘宁胶囊组和咳泰组均能延长小鼠咳嗽潜伏期，减 少咳嗽次数，与空白对照组比较，有显著性差异( P 0 0 5 或P 0 0 1 ) 。 2 2 对小鼠呼吸道酚红排泌量的影响【2 1取1 8 2 2 9 I c R 小鼠6 0 只，雌雄各半，按体重随机分为六组， 即空白对照组、清肺止咳平喘颗粒低( 6 0 5 9 生药 ) 、中( 1 2 1 0 9 生药K g ) 、高( 2 4 2 0 9 生药K g ) 剂 量组，桂龙咳喘宁胶囊( 0 5 9 I ( g ) 组和羧甲司坦 ( 0 1 9 5 9 K g ) 组，每天i g 给药1 次，连续7 天，空白对 照组给予等容积的蒸馏水。试验前各组小鼠禁食 1 6 h ，末次给药后3 0 r a i n ，腹腔注射5 酚红溶液 0 2 m L 1 0 9 体重，注射酚红后3 0 m i n ，空气栓塞处死 动物，剥离气管周围组织，剪下自甲状软骨下至气管 分支处的一段气管，放入盛有3 m L 生理盐水的试管 中，再加入5 的碳酸氢钠0 1 m L 调P H 值，用7 2 1 型分光光度计，波长5 4 6 n r n 测O D 值，用酚红做一标 准曲线，根据曲线计算酚红含量。结果见表2 。 酚红标准曲线：Y = 0 0 5 9 4 X + 0 0 0 5 4 R ；0 9 9 9 8 Y ：O D 值X ：酚红含量( 斗g m L ) 表2清肺止咳平喘颗粒对小鼠呼吸道 酚红排泌量的影响( ；±J ) 注：与空白对照组比较：- k P 0 0 5 。 结果表明：清肺止咳平喘颗粒中、高剂量组，桂龙咳 喘宁胶囊组和羧甲司坦组均能增加小鼠呼吸道酚红排 泌量，与空白对照组比较，有显著性差异( P o 0 5 ) 。 2 3 对卵蛋白诱发豚鼠过敏性哮喘的影响取6 0 只豚鼠，体重2 0 0 3 5 0 9 ，按体重随机分为六组，即模 型对照组，清肺止咳平喘颗粒低( 3 6 0 9 生药K g ) 、中 ( 7 2 0 9 生药l ( g ) 、高( 1 4 4 0 9 生药K g ) 剂量组，桂龙 咳喘宁胶囊( 0 3 5 9 K g ) 组和氨茶碱片( 0 0 4 6 5 9 K g ) 组。参照文献H 1 造模方法并略加改进：各组动物均腹 腔注射1 0 卵蛋白生理盐水溶液l m L 只。2 周后开 始i g 给药，每天1 次，连续7 天。从第1 7 天开始用引 喘仪喷雾1 卵蛋白生理盐水溶液，使动物吸入 1 5 r a i n 激发，隔天引喘1 次，共3 次。于最后1 次激 发记录其引喘潜伏期，即从喷雾开始至哮喘发作( 表 现为咳嗽、呼吸困难、烦躁、抽搐、跌倒甚至死亡) 的 时间，超过6 m i n 未出现哮喘发作的以6 m i n 计算。 末次激发后2 4 h ，用戊巴比妥钠麻醉豚鼠，分离 出颈部气管，将灌胃针插入气管，进行支气管肺泡灌 洗，抽取6 m L 生理盐水，每次缓慢注入，保留2 0 s 后 回抽，重复3 次，取少量灌洗液( B A L F ) 加入等量1 盐酸作白细胞计数，结果见表3 。 表3清肺止咳平喘颗粒对豚鼠卵蛋白 引喘潜伏期的影响【i ±s ) 注：与模型对照组比较：P ( 0 0 5 ，P 0 O lo 结果表明：清肺止咳平喘颗粒低、中、高剂量组， 桂龙咳喘宁胶囊组和氨茶碱组均能延长豚鼠引喘潜 伏期，降低豚鼠B A L F 中白细胞数量，与模型对照组 比较，有显著性差异( P 0 0 5 或P 0 0 1 ) 。 3 讨论 支气管哮喘属于祖国医学“哮证”范畴。痰气交 阻，痰瘀互结。气行则水行，气滞则水停，积水化饮成 痰。痰阻气机，胶着为患H 】。系由宿痰伏肺，因外邪、 饮食、情志、劳倦等因素诱发，发时风盛气逆，痰阻血 瘀，痰气搏击，气道挛急。发作期可有寒哮、热哮、虚 哮之分，缓解期可从肺虚、脾虚、肾虚论治¨o 。清肺止 咳平喘颗粒由葶苈子、杏仁、秦皮等9 味中药组成，具 有清热宣肺，化痰定喘的功效，主治支气管哮喘( 热 哮) 之咳嗽、喘促、胸闷、喉鸣、痰黄等症。研究结果 表明：清肺止咳平喘颗粒中( 1 2 1 0 9 生药l ( g ) 、高 ( 2 4 2 0 9 生药K g ) 剂量组均能延- K d “ 鼠咳嗽潜伏期， 减少咳嗽次数；中( 1 2 1 0 9 生药K g ) 、高( 2 4 2 0 9 生茧眇 K g ) 剂量组能增加小鼠呼吸道的酚红排泌量；低( 3 6 0 9 生药l ( g ) 、中( 7 2 0 9 生药K g ) 、高( 1 4 4 0 9 生药K g ) 剂量组均能延长豚鼠哮喘潜伏期，并能显著降低豚鼠 B A L F 中自细胞数量。通过本试验研究证明：清肺止咳 平喘颗粒具有明显的止咳、化痰、平喘作用。 参考文献 1 李仪奎中药药理实验方法学 M 第2 版上海：上海科技出版 社，2 0 0 6 ：4 2 8 ，7 7 1 ，7 3 4 2 陈奇中药药理研究方法学 M 北京：人民卫生出版社，1 9 9 3 ：6 4 2 7 1 4 3 壮健，顾国平，罗洪涛，等消喘膏贴敷对哮喘豚鼠气道炎症的影 响 J 山东中医药大学学报，2 0 0 3 ，2 7 ( 1 ) ：6 6 - 6 7 4 曹铁留中医药治疗支气管哮喘临床研究进展 J 实用中医内科 杂志，2 0 0 9 ，2 3 ( 2 ) ：2 1 53 朱元珏，陈文彬呼吸病学 M 北京：人民卫生出版社，2 0 0 3 ：6 7 6 ( 收稿日期：2 0 0 9 0 9 1 3 ) 万方数据