GB-5522-1985.pdf
中华 人 民共 和 国 国 家 标 准 ( 6 3 3 . , +6 3 3 . 8 5 ) . 0 0 1 . 4 粮食、油料检验 过氧化氢酶活动度测定法 I n s p e c t i o n o f g r a i n a n d o i l s e e d s M e t h o d s f o r d e t e r m i n a t i o n o f h y d r o g e n p e r o x i d a s e a c t i v i t y 5 5 2 2 - 8 5 本标准适用于商品粮食过氧化氢酶活动度的测定。 1 仪班和用具 恒温水浴锅, 电炉; 离心机或吸滤装置, 锥形瓶:1 0 0 M I r 量筒:1 0 , 1 5 m 1 ; 移液管:5 , 1 0 , 2 0 m 1 i 研钵, 滴定管、细口 瓶、漏斗等。 .,.曰月,合目. . .心.口.j.月. :; 2 试荆 2 . 1 2 。 2 2 。 3 2. 4 3 %过氧化氢溶液; 1 0 %硫酸溶液, o . i N 高锰酸钾溶液, 取3 0 %过氧化氢溶液3 m 1 加水稀释至3 0 m 卜 p H 7 . 7 索伦逊磷酸盐缓冲液: 甲 液 ,称取 磷酸氢二 钠1 1 . 8 7 6 8 溶 于1 1 水中。 乙 液,称取磷酸二氢钾9 . 0 7 8 8 溶于 1 l 水中。 临用时,甲、乙液按9 : 1 混合。 2 . 5 石英砂或用干净的玻瑞片研制成的细砂。 吕 操作方法 3 . 1 过氧化氢酶的提取:称取试样 ( 能换 算成无水试样1 g ),放入研钵中 ,加少量细砂,量取缓冲 液5 0 m 1 ,先倒出5 -1 0 m l 于研钵中 研磨试样,然后经漏斗倒入锥形瓶中,用剩余的缓冲液洗净研钵和 漏斗,再把洗液倒入锥形瓶内,振摇后静置2 -3 h ,用吸滤法或离心沉淀法获得透明的提取液。 3 . 2 酶活动度的测定:摇匀提取液,吸取2 0 m l 注入锥形瓶中 ,加入2 0 m 1 水和3 m 1 3 %过氧化氢溶 液,在室温下放置1 5 -3 0 m i n ,加入5 m 1 1 0 %硫酸溶液,摇匀,用。 . 1 N 高锰酸钾溶液滴定剩余的过氧 化氢,记下用去的高锰酸钾溶液毫升数 ( VO 。 3 . 3 对照试验:吸取2 0 m 1 提取液注入锥形瓶中 ,置于沸水浴中 加热5 m i n ,或用直接煮沸法破坏过 氧化氢酶。加2 0 。 工 水和3 m 1 3 %过氧化氢溶液于锥形瓶中 ,在室温下放置1 5 -3 0 m i n ,再加入1 0 %硫酸 5 m 1 ,摇匀,用0 . 1 N 高锰酸钾溶液滴定,记下用去的毫升数 ( Y P )。 国家标准局, 9 8 5 - 1 1 - 0 2 发布1 8 8 8 - 0 T - 0 1 实施 GB 5 5 2 2 -8 5 A 结果计算 过氧化氢酶活动度按下列公式计算: 过氧化氢酶活动度 ( m g Hi Oz / 比试样)= ( V 一 V ,) x N x 1 7 x 器 式中 :V , - 酶活动度测定时所用的。 . 1 N高锰酸钾溶液体积,M ) , V 对照试验时用去的O . 1 N高锰酸钾溶液体积,m 场 N 高锰酸钾溶液当量浓度; 1 7 -H z O: 的毫克当量。 双试验结果允许差不超过平均值的1 0 %,取平均值为测定结果。测定结果取小数点后第一位。 附加说明: 本标准由中华人民共和国商业部提出 。 本标准由商业部粮食储运局负责起草。 本标准主要起草人高修吾、杨浩然、吴艳霞、吕桂芬。 *草庐一苇草庐一苇*提供优质文档, 如果 你下载的文档有缺页、 模糊等现象或 者遇到找不到的稀缺文件, 请发站内 信和我联系!我一定帮你解决! 提供优质文档, 如果 你下载的文档有缺页、 模糊等现象或 者遇到找不到的稀缺文件, 请发站内 信和我联系!我一定帮你解决! 本人有各种国内外标准 20 余万个, 包括全系 列 GB 国标国标及国内行业行业及部门标准部门标准,全系列 BSI EN DIN JIS NF AS NZS GOST ASTM ISO ASME SSPC ANSI IEC IEEE ANSI UL AASHTO ABS ACI AREMA AWS ML NACE GM FAA TBR RCC 各国船级 社 船级 社 等大量其他国际标准。豆丁下载网址:豆丁下载网址: http:/www.docin.com/liuyx866