1、关于“PCR引物”高考试题解析摘 要 结合对相关高考试题的解析，从引物碱基序列设计、延伸方向和所需要数量等方面进行分析，使学生在高考复习中对PCR引物有更全面深入的认识，完成相关知识的备考。关键词 PCR引物 高考试题 高考复习中图分类号 G633.91 文献标志码 B生物科学是实验科学。新技术、新方法层出不穷，前沿科技在历年高考试题中多有反映。随着课程改革的深入，高考试题的命题形式也倾向于考查学生在特定情境中运用知识的能力。PCR技术是现代分子生物研究中的基本技术，应用十分广泛。近年高考试题中出现了大量与PCR技术有关的试题。而且2017年高考考试大纲有部分内容发生了变化，新考纲对PCR的知
2、识要求更加明确，其中 “基因工程的原理及技术”调整成“基因工程的原理及技术（含PCR）”。因此在高考复习时，教师对PCR技术更应该帮助学生进行针对性的复习。在PCR技术中设计引物是关键步骤，也是高考的常考考點，属于高考备考的重点内容，因此有必要重点复习。下面结合历年高考试题，对PCR引物的碱基序列设计、引物延伸方向、引物消耗等方面进行例析，使学生多角度认识引物的有关知识，从而完成这部分考点的备考。1 引物的碱基序列的设计引物是PCR特异性反应的关键，PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR技术就可
3、将模板DNA在体外大量扩增。设计引物时，要注意： 引物应与核酸序列数据库的其他序列无明显同源性。 避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补。例1（2011江苏）设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（图1），请分别说明理由。 第1组：_； 第2组：_。参考答案： 引物I和引物局部发生碱基互补配对而失效； 引物I自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效例2（2008江苏）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度。_。4 小结在高考复习PCR技术部分时，教师首先应该让学生掌握PCR技术的基本原理；掌握DNA分子的结构特点；DNA聚合酶的工作原理。然后，教师引申出引物在PCR中的作用。通过典型例题使学生学会在以科研实际为背景的情景试题中获取信息的能力，具备运用所学知识解决相关的生物学问题的能力。
