2020届高三生物一轮复习课件：第34讲　微生物的培养和利用 .pptx

考点互动探究教师备用习题,考试说明,1.微生物的分离和培养(实验与探究能力)。 2.某种微生物数量的测定(实验与探究能力)。 3.培养基对微生物的选择作用(实验与探究能力)。 4.微生物在其他方面的应用(实验与探究能力)。,知识梳理,1.培养基 (1)概念:人们按照微生物对 的不同需求,配制出供其生长繁殖的 。 (2)营养成分:水、 、 、无机盐四类营养物质,另外还需要满足微生物生长对 、特殊营养物质以及 的要求。 (3)类型: 培养基含凝固剂, 培养基不含凝固剂。,考点一 微生物的实验室培养,营养物质,营养基质,碳源,氮源,pH,氧气,固体,液体,2.无菌技术 (1)目的:获得 。(2)关键:防止 的入侵。 (3)无菌技术的主要方法及适用对象(连线),纯净培养物,外来杂菌,答案a- a- a- b- b- b-,3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 (1)步骤:计算 溶化 倒平板。 (2)倒平板的过程 在火焰旁右手拿锥形瓶,左手 。 右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过 。 左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左手立刻盖上 。 待平板冷却凝固后,将平板 放置,使皿盖在下、皿底在上。,称量,灭菌,拔出棉塞,火焰,培养皿的皿盖,倒过来,4.纯化大肠杆菌 (1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成 细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。 (2)平板划线法(图11-34-1中 ):通过接种环 在琼脂固体培养基表面 的操作,将聚集 的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 (3)稀释涂布平板法(图11-34-1中 ):将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到 的表面,进行培养。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的 。,单个,A,连续划线,B,图11-34-1,琼脂固体培养基,菌落,5.菌种的保藏 (1)对于频繁使用的菌种,可以采用 法。 (2)对于需要长期保存的菌种,可以采用 法。,临时保藏,甘油管藏,核心讲解,1.消毒和灭菌的区别,2.两种纯化细菌的方法的比较,3.平板划线操作3个易错点 (1)灼烧接种环之后,要冷却后再进行接种,以免温度太高杀死菌种。 (2)划线时最后一区域不要与第一区域相连。 (3)划线用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破。,1.2017·广东韶关一模 为了调查北江河中细菌的污染情况,某研究性学习小组同学进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。(1)实验中制备的牛肉 膏蛋白胨培养基的部分成分列表如下: 表中各成分含量的比例确定的原则是 。 (2)对培养基进行灭菌,通常采用的方法是 。为了使培养基达到良好的灭菌效果,一般在压力为100 kPa,温度为 的条件下,维持1530 min。,题组训练,(3)为了更好地对细菌计数,一般采用的接种方法是 ,该方法的操作是将菌液进行一系列的 ,然后再分别 到琼脂固体培养基的表面。 (4)接种后放在恒温箱培养一段时间后,为保证结果准确, 选择菌落数在 的平板进行计数。该组同学在菌落计数时发现,统计的菌落数比实际数目要低,可能的原因是 。,答案 (1)根据所培养微生物对各营养成分的需求量(或比例) (2)高压蒸汽灭菌 121 (3)稀释涂布平板法 梯度稀释 涂布 (4)30300 某些菌落可能是由两个或多个细菌连在一起形成的,解析 (1)培养基配制的过程中,成分含量的比例确定的原则是根据所培养微生物对各营养成分的需求量(或比例)。(2)对培养基进行灭菌,通常采用的方法是高压蒸汽灭菌,即将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内,为达到良好的灭菌效果,一般在压力为100 kPa,温度为121 的条件下,维持1530 min。(3)为了更好地对细菌计数,一般采用的接种方法是稀释涂布平板法,该方法的操作是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后再分别涂布到琼脂固体培养基的表面。(4)接种后放在恒温箱培养一段时间后,为保证结果准确,选择菌落数在30300的平板进行计数。由于某些菌落可能是由两个或多个细菌连在一起形成的,因此统计的菌落比实际数目要低。,2.2017·福建漳州三模 如图11-34-2为微生物的实验培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤。请回答下列问题: (1)是制备培养基时 中的主要操作,该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰, 目的是通过 ,防止瓶口的微生物污染培养基。,图11-34-2,(2)该纯化醋酸菌的接种方法是 。完成步骤的操作,接种共需要 次灼烧处理。 (3)纯化的醋酸菌菌种将频繁用于果醋生产,则可以采用 的方法保存菌种,但这种方法保存的时间不长,原因是 。 (4)将醋酸菌加入果酒中,乙醇可为醋酸菌的生命活动提供 ,将温度控制在 ,可以获得较多果醋。,答案 (1)倒平板 灭菌 (2)平板划线法 6 (3)临时保藏 菌种容易被污染或产生变异 (4)能量 3035,解析 (1)是制备培养基时倒平板中的主要操作,该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰,目的是通过灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。(2)根据图可知,该纯化醋酸菌的接种方法是平板划线法。平板划线时,每次划线前都要进行灼烧,最后一次划线结束也要进行灼烧,因此共需要6次灼烧处理。(3)纯化的醋酸菌菌种将频繁用于果醋生产,则可以采用临时保藏的方法保存菌种,但这种方法保存的时间不长,原因是菌种容易被污染或产生变异。(4)将醋酸菌加入果酒中,乙醇可为醋酸菌的生命活动提供能量;果醋发酵的适宜温度是3035 。,知识梳理,1.筛选菌株 (1)自然界中目的菌株筛选的依据:根据它对 的要求,到相应的环境中去寻找。 (2)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。 (3)选择培养基:允许特定种类的微生物生长,同时 和 其他种类微生物生长的培养基。,考点二 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数,生存环境,目的菌株,抑制,阻止,2.统计菌落数目 (1)常用方法: 法。 (2)统计依据:当样品的 足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。 (3)其他方法:还可利用 计数。 3.设置对照 设置对照的主要目的是排除实验组中 对实验结果的影响,提高实验结果的 ,例如为了排除培养基被杂菌污染的可能性,需以 培养基培养作为空白对照。,稀释涂布平板,稀释度,活菌,显微镜直接,非测试因素,可信度,未接种的,4.实验设计,脲酶,尿素,有机质,系列稀释,计数,酚红,氨,碱性,1.选择培养基的作用原理 (1)在培养基中加入某种化学物质,如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌;加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在满足基本所需培养成分的基础上加入。 (2)改变培养基中的营养成分,如缺乏氮源时可以分离出固氮微生物;以石油作为唯一碳源时,可以分离出能消除石油污染的微生物。 (3)改变微生物的培养条件,如将培养基放在高温环境中培养可以得到耐高温的微生物。,核心讲解,(4)通过某些特殊环境分离微生物,如在高盐环境中可分离出耐盐菌;在高温环境中可分离得到耐高温的微生物。 2.培养基的种类与应用,3.两种计数方法的比较,1.2017·南昌一模 下表为某微生物培养基的配方,请回答相关问题: (1)按物理性质划分,该培养基属于 培养基,无论配制何种培养基,在原料称量、溶 化之后都要先 ,然后分装、包扎 并灭菌,常用的灭菌方法是 。 (2)根据培养基的成分判断,该培养基能否 用于分离土壤中分解尿素的细菌? , 原因是 。,题组训练,(3)为检测尿素分解菌是否存在,还应加入 ,如果存在,将出现 反应。 (4)微生物常用的接种方法有 。,答案 (1)固体 调pH 高压蒸汽灭菌 (2)不能 培养基中含有NH4NO3,尿素不是唯一氮源 (3)酚红 红色 (4)平板划线法、稀释涂布平板法和稀释混合平板法,解析微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求,对异养微生物来说,含C、N的化合物既是碳源,也是氮源,即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方向的作用。(1)分析题中表格可知,该培养基中加入琼脂作为凝固剂,因此属于固体培养基,不论何种培养基,在各成分都溶化后分装前,要先调整pH,培养基常用的灭菌方法为高压蒸汽灭菌。(2)根据培养基的成分判断,该培养基中含有NH4NO3,尿素不是唯一氮源,因此该培养基不能用于分离土壤中分解尿素的细菌。(3)为检测尿素分解菌的存在与否,在以尿素为唯一氮源的选择培养基中加入酚红指示剂,如果存在尿素分解菌,则指示剂将变红色。(4)微生物常用的接种方法有平板划线法、稀释涂布平板法和稀释混合平板法。,(2)配制培养基时,需添加琼脂,琼脂起 的作用;培养基中添加 作为指示剂,可使目标菌落的周围产生红色环带。 (3)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是 灭菌。 A.高压蒸汽 B.干热 C.添加抗生素 D.过滤 E.紫外线照射 F.70%酒精浸泡 (4)该小组在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是 ;然后将1 mL瘤胃样液稀释1000倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板的菌落数分别为49、47和45。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为 个,理论上,统计的菌落数往往 (填“低”“等”或“高”)于接种的实际活菌数目。,答案 (1)脲酶(或分解尿素的酶) 氨(或NH3) (2)凝固剂 酚红 (3)D (4)检测培养基平板灭菌是否合格 4.7×108 低,解析常用的灭菌方法:高压蒸汽灭菌法适用于一般培养基和玻璃器皿灭菌;干热灭菌适用于需要保持干燥的玻璃器皿的灭菌,凡带有橡胶的物品和培养基都不能进行干热灭菌;无菌室、缓冲间和接种箱常用紫外线进行空气灭菌;微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌;煮沸灭菌通常不能彻底杀灭一些生物的孢子和芽孢,一般适用于餐具和不耐高温的食品等的消毒。(1)分解尿素的酶是脲酶,所以分解尿素的微生物含有脲酶。尿素含有C、H、O、N元素,其水解产物是二氧化碳、水和氨气,氨气使的培养基的碱性增强。,(2)琼脂是凝固剂,使培养基呈固态;培养基中的碱性物质可以与酚酞反应产生红色环带。(3)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是过滤灭菌。(4)空白平板的作用是检测培养基平板是否合格,根据题干提供的数据进行计算,每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为(49+47+45)÷3×1000×10×1000=4.7×108(个)。由于菌种可能重叠,所以统计的菌落数往往低于接种的实际活菌数目。,易错点拨 “选择菌落数在30300的平板”的提醒 (1)只得到1个菌落数在30300的平板是错误的,原因是不符合实验的重复原则,易受到偶然因素的影响。 (2)得到3个或3个以上菌落数在30300的平板,也不一定正确,原因是如果不同平板间差异较大,如得到3个平板,菌落数分别为230、34、240,虽然菌落数均在“30300”,但由于34与另外两个平板差异较大,应找出原因并重新实验。,知识梳理,考点三 分解纤维素的微生物的分离,C1酶,CX酶,葡萄糖苷酶,纤维二糖,葡萄糖,刚果红染色,红色复合物,透明圈,纤维素,纤维素,选择培养基,梯度稀释,鉴别纤维素分解菌,透明圈,1.分离纤维素分解菌所用的两种培养基比较 分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基,再用鉴别培养基。 (1)选择培养基为液体培养基,以纤维素为碳源和能源的微生物可以正常生长,而其他绝大多数微生物不能正常生长;因培养基中无凝固剂,故其为液体培养基,利用液体培养基能使营养成分被充分消耗,以增加纤维素分解菌的浓度。 (2)鉴别培养基含琼脂,为固体培养基,细菌可在培养基上形成肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用的就是鉴别培养基。,核心讲解,2.筛选微生物的两个实例比较,1.2017·成都一诊 牛的食物主要是草茎类,其中含有大量的纤维素。牛胃内的微生物在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用。回答下列问题: (1)纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,组成纤维素的单体为 。牛胃中某些微生物能够产生纤维素酶,这种酶是一种复合酶,其中的 能使纤维素分解成纤维二糖。 (2)实验室培养牛胃内的微生物,分离得到高纯度纤维素分解菌的关键环节是 。为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 附近进行;倒平板用的培养皿需要保持干燥,可以采用 法进行灭菌。,题组训练,(3)为了从牛胃的食糜中分离出纤维素分解菌,配制的选择培养基要以 为唯一碳源。筛选纤维素分解菌时,常用的刚果红染色法有两种,一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种是 。在涂布平板时滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多,原因是 。,答案 (1)葡萄糖 C1酶、CX酶 (2)防止外来杂菌的入侵 酒精灯火焰 干热灭菌 (3)纤维素 在倒平板时就加入刚果红 培养基表面的菌悬液过多会导致菌体堆积,影响分离效果,解析 (1)纤维素是一种多糖,其基本组成单位是葡萄糖;纤维素酶是一种复合酶,其中C1酶、CX酶能使纤维素分解成纤维二糖。(2)微生物分离和培养的关键环节是防止外来杂菌的入侵;为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行;倒平板用的培养皿需要保持干燥,可以采用干热灭菌法进行灭菌。(3)为了分离出纤维素分解菌,配制的选择培养基要以纤维素为唯一碳源。筛选纤维素分解菌时,常用的刚果红染色法有两种,一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种是在倒平板时就加入刚果红。在涂布平板时滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多,原因是培养基表面的菌悬液过多会导致菌体堆积,影响分离效果。,2.2017·河北石家庄二模 为了分离和纯化高效分解石油的细菌,科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图11-34-4所示的实验。 (1)配制好的培养基通常使用 法灭菌。步骤与步骤中培养基成分相比,最大的区别是 。,图11-34-4,(2)同学A进行步骤的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是 ,出现图乙结果可能的失误操作是 。 (3)同学B也按照同学A的接种方法进行了步骤的操作:将1 mL样品稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为 个。 (4)步骤需要振荡培养,原因是 。 (5)步骤后取样测定石油含量的目的是 。,答案 (1)高压蒸汽灭菌 步骤培养基中石油是唯一碳源 (2)稀释涂布平板法 涂布不均匀 (3)5.7×107 (4)提高培养液中(溶解)氧的含量,通过振荡可使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率 (5)筛选出分解石油能力最强的细菌,解析 (1)配制好的培养基通常使用高压蒸汽灭菌法灭菌。步骤与步骤中培养基成分相比,最大的区别是步骤培养基中石油是唯一碳源。(2)同学A进行步骤的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如题图乙所示。该同学的接种方法是稀释涂布平板法,出现图乙结果可能的失误操作是涂布不均匀。(3)同学B也按照同学A的接种方法进行了步骤的操作:将1 mL样品稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为(56+58+57)÷3÷0.1×1000×100=5.7×107(个)。(4)步骤需要振荡培养,原因是提高培养液中(溶解)氧的含量,通过振荡可使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率。(5)步骤后取样测定石油含量的目的是筛选出分解石油能力最强的细菌。,1.2017·全国卷 某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题: (1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生 。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是 。 但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是 (答出两点即可)。,历年真题明考向,(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择 (填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是 。 (3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有 (答出两点即可)。,答案 (1)脲酶 分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物 为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料 (2)尿素 其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用 (3)为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定,解析 (1)催化尿素分解的酶为脲酶。分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物。进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是为细胞生命活动提供能量,葡萄糖的代谢中间产物可以作为合成其他有机物的原料。(2)能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,如果培养基中含有NH4NO3,则不能起到筛选作用。(3)培养基中的KH2PO4和Na2HPO4可以为微生物生长提供钠离子、钾离子等,其还可以作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定。,2.2017·江苏卷 苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据图11-34-5操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题: (1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、 K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中 可作为碳源的有 。 (2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐 ,以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一步 ,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加 。,图11-34-5,(3)图11-34-6为连续划线法示意图,在图中 (填图中 序号)区域更易获得单菌落。 (4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中 苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下 表中15号比色管的苯酚浓度应分别为 。 如果废水为50 mg/L 苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释 (填序号:5 10 20)倍后,再进行比色。,图11-34-6,答案 (1)蛋白胨、苯酚 (2)增加 稀释涂布 凝固剂 (3) (4)0、0.2、0.4、0.6、0.8 ,解析 (1)蛋白胨、苯酚都可以作为碳源。(2)为了筛选酚降解菌,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐增加。若平板中菌落过于密集,说明浓度太大,为方便菌落计数与分离,应进一步稀释涂布。平板培养基为固体培养基,制备时必须添加凝固剂。(3)连续划线法中在划线的末尾区域菌种浓度最小,更易获得单菌落。(4)1号比色管作对照,苯酚浓度为0,16号比色管苯酚浓度由0逐渐增加到1 mg/L,且有梯度,所以15号比色管的苯酚浓度应分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8 mg/L。废水为50 mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释20倍后,再进行比色。,3.2016·全国卷 空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下: 配制培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O); 制作无菌平板; 设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作; 将各组平板置于37 恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。 回答下列问题:,(1)该培养基中微生物所需的氮来源于 。若要完成步骤,该培养基中的成分X通常是 。 (2)步骤中,实验组的操作是 。 (3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了 现象。若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法 (填“正确”或“不正确”)。,答案 (1)牛肉膏、蛋白胨 琼脂 (2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间 (3)污染 不正确,解析本题考查微生物的培养与计数,主要考查学生的识记、理解与实验设计能力。(1)培养基中的牛肉膏和蛋白胨中都含有蛋白质,可作为氮源。用于计数的培养基应为固体培养基,需加入琼脂等凝固剂。(2)该实验的目的是了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况,所以需将灭菌后的平板放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间,然后再在恒温箱中培养。(3)空白对照组应是无菌平板,所以应该无菌落出现,有菌落出现说明培养基被污染了,那么其他各实验组的培养基也不合格,所以需要重新制作平板。,4.2016·全国卷 某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题: (1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用 对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是 。 (2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有 和 。分离纯化时应挑选出 的菌落作为候选菌。 (3)乳酸菌在-20 长期保存时,菌液中常需要加入一定量的 (填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。,答案 (1)无菌水 泡菜滤液中菌的浓度高,直接培养很难分离得到单菌落 (2)鉴别乳酸菌 中和产生的乳酸(或酸) 具有透明圈 (3)甘油,解析本题考查微生物的培养及泡菜制作方面的知识。(1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细菌,从而能在培养基表面形成单菌落。(2)在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别与分离。分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在-20 长期保存时,甘油可起到密封和隔绝空气的作用。,有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、 四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是 。,(2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是 。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域及其他划线区域均无菌落,造成划线无菌落可能的操作失误有 、 。 (3)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是 ,该实验设计是否合理? 。为什么? 。,答案 (1)氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖 (2)接种环 接种环灼烧后未冷却 划线未从第一区域末端开始 (3)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质 不合理 缺少空白对照,解析 (1)微生物的各种培养基配方一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四类营养物质;选择培养基允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长,因而培养基必须以苯磺隆为唯一碳源,只让目的菌株生长繁殖。 (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是接种环(或接种针);接种环在平板内的每一次划线前,都要先灼烧灭菌冷却后划线,而且要从上一次划线末端而非空白处划线,不冷却会烫死上次划线末端的菌株,从空白处划线是不会有菌落生长的。 (3)图乙上清液中加入的蛋白酶溶液是用于水解上清液中的某蛋白质的,由此可判定,实验假设是目的菌株通过分泌某种蛋白质来降解苯磺隆,但是尚需设置不加入蛋白酶的对照组实验,否则没有说服力,因而实验设计不合理。,