1、输血科标本采集、保存与实验前预处理操作规程1、目的：规范输血科工作人员的操作程序，保证标本安全，血液结果准确可靠。2、范围：本规程适用于血液实验室标本的采集、保存与处理。3、职责：输血科工作人员进行标本采集、保存与实验前预处理工作。4、程序4.1采集前注意事项:所有的标本管都必须被正确的标记,确确保抽取的标本符合相关要求。4.1.1标本的采集患者血液的体内状态，能正确代表患者当前的免疫学情况，防止血液标本的稀释和溶原和补体对试验的干扰。反复输血的患者要抽取最新的标本进行输血前的检测。如果患者使用肝素治疗,则应用鱼精蛋白对抗,使标本凝结。4.L2红细胞标本:可用指尖采血,直接用生理盐水配成红细胞
2、悬液。也可取静脉血,用ACD.CPD血液保存液、肝素或或EDTA盐抗凝。应根据具体的试验选择不同的抗凝剂：1） EDTA盐类抗凝剂对血细胞形态的影响很小，因此适用于血细胞计数的检测,不适用于凝血象检查和血小板功能的试验。2） ACD或CPD保存液与血液按1:9的比例混合,其适用条件是血液的血细胞比容正常,所以不适用于贫血或红细胞增多症的患者。3）肝素是红细胞脆性试验的理想抗凝剂,但不适用于血液学的一般检查,包括红细胞血型血清学试验。如果患者使用过右旋糖酊、PVP等治疗,应注意将红细胞做充分洗涤。4.1.3血清标本:取静脉血沿试管壁缓慢注入干燥且无任何抗凝剂的试管内，置37。C待血液凝固后立即离
3、心分离血清或用玻璃棒等搅动血块,使之与管壁分开或置4过夜,离心分离血清,前者分离的血清量较少,且没有4。C过夜后吸收冷自身抗体的作用。4.L4血浆标本:取静脉血沿管壁缓慢注入含抗凝剂的试管中，充分混匀后,直接离心,分离出上层血浆。4.2红细胞悬液的配制血型鉴定、交叉配血等试验所需要的红细胞，使用前应该用生理盐水洗涤13次（强烈推荐洗涤33次），去除吸附在红细胞表面的血型物质（如已溶解的红细胞基质、可溶性的抑制物A、B、Lewis等物质）、血浆蛋白（如纤维蛋白原、抗球蛋白抗体）及抗凝剂等成分。红细胞悬液是用压积红细胞加入一定量的生理盐水配制而成。通常用的浓度有现、2%、5%、10%、20%等。4
4、2.1红细胞悬液配置方法：4.2.1.1全国临床检验操作规程（第三版）：红细胞悬液的配置悬液浓度（%）压实红细胞（滴）生理盐水（滴）212.Oml（40滴）510.8ml（16滴）1010.4ml（8滴）2010.2ml（4滴）注：全国临床检验操作规程（第四版）已无相关内容。4.2.1.2专家方案：悬液浓度（%）压实红细胞（口D生理盐水（或PBS液）11009.09ml21004.55ml31003.03ml41002.27ml51001.81ml4.3标本的使用和保存4.3.1红细胞标本：一般试验用的凝血标本可在28冰箱保存5天，以不溶血为准；用ACD保存液的红细胞可保存3周；CPD保存液
5、的红细胞可保存4周；红细胞标本在保存时不能染菌。用盐水配制的红细胞悬液只能当天使用，在环境温度较高时，红细胞标本在使用间隙应放在28C冰箱冷藏，防止抗原减弱。用于交叉配血的供、受者标本试验完成后要放在28冰箱保存一周，用于患者输注后出现输血反应时备查。4.3.2血清标本：用于输血前检测的血清标本应在分离后72小时内使用；带有补体活性的新鲜血清，应在采集后24小时内使用；用盐水稀释过的血清只限当天使用。在-20C冷冻可保存2个月，如果加有防腐剂，可在28保存数月，在-20C保存数年，抗体活性基本不变。如用白蛋白或无抗体活性的AB型血清稀释过的血清可与不稀释血清一样保存，大分子化学物质做稀释介质对抗体活性不起保护作用。4.4补体的灭活：当新鲜的血清或标本中存在补体时，一些有活力的抗体可引起试验细胞的溶解，所以某些试验比如血清定型试验、抗体效价测定等，灭活补体是必须的。4.4.1EDTA盐类抗凝剂或ACD、CPD类细胞保存液中含有的钾或钠盐类物质可与血液中的Ca2+结合形成螯合物,可阻止补体被激活。4.4.2血清在56水浴30s,可灭活补体Cl、C2、C5、C8和C9。
