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    河北省邢台市第二中学人教版高中生物选修一学案专题5课题1DNA的粗提取与鉴定.pdf

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    河北省邢台市第二中学人教版高中生物选修一学案专题5课题1DNA的粗提取与鉴定.pdf

    专题 5 DNA和蛋白质技术课题 1 DNA的粗提取与鉴定 【学习目标】 1.尝试对植物或动物组织中的DNA 进行粗提取 2.说出 DNA 的物理化学性质 3.能说出 DNA 粗提取以及DNA 鉴定的原理 【重点难点】 DNA 的粗提取和鉴定方法 【预习案】 任务一 . 提取 DNA的方法 提取生物大分子的基本思路是。 对于 DNA 的粗提取而言,就是要利用DNA 与、和等 在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。 1.DNA 的溶解性DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的中溶解度不同, 利 用这一特点,选择适当的盐浓度就能使充分溶解,而使杂质沉淀,或者相 反,以达到分离目的。 此外, DNA 不溶于溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原 理,可以将DNA 与蛋白质进一步的分离。 2.DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解,但是对没有 影响。大多数蛋白质不能忍受6080 oC的高温,而 DNA 在以上才会变性。洗涤剂 能够瓦解,但对 DNA 没有影响。 3.DNA 的鉴定在条件下, DNA 遇会被染成色,因 此二苯胺可以作为鉴定DNA 的试剂。 任务二提取 DNA的实验设计 1. 实 验 材 料 的 选 取凡 是 含 有的 生 物 材 料 都 可 以 考 虑 , 但 是 选 用 的生物组织,成功的可能性更大。在下面的生物材料中选取适合的实验材料: 鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜)、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、 菠菜、在液体培养基的大肠杆菌 【思考】哺乳动物的红细胞的特点? 2.破碎细胞,获取含DNA 的滤液动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡 血细胞液中加入一定量的,同时用搅拌, 过滤后收集滤液即可。如果实验材料 是植物细胞,需要先用溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA 时,在切碎的洋葱中 加入一定的和,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。 3.去除滤液中的杂质阅读课本的三个方案, 4.DNA 的析出与鉴定将处理后的溶液过滤, 加入与滤液体积、 冷却的, 静置,溶液中会出现,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒搅 拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。 取两支 20ml 的试管,各加入物质的量浓度为的 NaCl 溶液 5ml,将丝状物放 入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml 的 。混合均匀后,将试管置于中加热5min,待试管冷却后,比较两支 试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA 的溶液是否变。 任务三操作提示 以血液为实验材料时,每100ml 血液中需要加入3g ,防止。 加入洗涤剂后,动作要、,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步 骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要,以免,导致 DNA 分子不能形成絮状沉淀。 二苯胺试剂要,否则会影响鉴定的效果。 【探究案】 探究点一 . 据课本图 51 是 DNA 在 NaCl溶液中的溶解度曲线,请根据曲线图 回答, 在什么浓度下,DNA 的溶解度最小?DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度是如何变化的? 如何通过控制NaCl 溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出? 探究点二 . 在破碎细胞,获取含DNA的滤液步骤中 为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂? 加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么? 如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响? 此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分? 探究点三 . 去除滤液中的杂质,阅读课本的三个方案, 1.为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质? 2.方案二与方案三的原理有什么不同? 【训练案】 1下列不适宜作为DNA 提取的实验材料是() A鸡血细胞B蛙的红细胞C人的成熟红细胞D菜花 2在利用洋葱进行DNA 粗提取的实验中,加入洗涤剂和食盐的作用分别是( ) A.破坏细胞壁;溶解DNA B.破坏细胞膜;溶解DNA C.破坏细胞壁;溶解蛋白质D.破坏细胞膜;溶解蛋白质 3DNA 粗提取实验中,还要用酒精处理,可以得到较纯化的DNA因为 ( ) ADNA 易溶于酒精,而滤液中某些杂质不易溶于酒精 BDNA 不易溶于酒精,而滤液中某些杂质易溶于酒精 CDNA 和滤液中其他成分更易溶于酒精 DDNA 和滤液中其他成分都不溶于酒精 4下图为 “ DNA 粗提取和鉴定” 实验的相关操作。这些操作目的正确的是() A是洗涤红细胞,去除血细胞表面的杂质 B是溶解DNA,去除不溶于酒精的杂质 C溶解DNA,去除不溶于2mol/LNaCl 溶液的杂质 D稀释NaCl 溶液,去除不溶于低浓度NaCl 溶液的杂质 5以血液为实验材料时,需要向血液中加入哪种试剂,防止血液凝固() A.醋酸钠B.龙胆紫C.柠檬酸钠D.醋酸洋红 6向溶有 DNA的 2mol/L 的NaCl溶液中不断加入蒸馏水,在这个过程中,DNA和杂质蛋白质溶 解度变化情况分别是( ) A减小;减小B增大;增大 C先减小后增大;增大D减小;增大 7玻璃棒搅拌出的较纯净的DNA的颜色以及 DNA遇二苯胺 (沸水浴 )染上的颜色分别( ) A黄色、紫色B白色、砖红色C白色、蓝色D蓝色、砖红色 8在研究 DNA 的基因样本前,采集来的血样需要蛋白水解酶处理,然后用有机溶剂除去蛋 白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是() A除去血浆中的蛋白质 B除去染色体上的蛋白质 C除去血细胞表面的蛋白质 D除去血细胞中的所有的蛋白质,使DNA 释放,便于进一步提纯 9与析出DNA 粘稠物有关的叙述,不正确的是() A操作时缓缓滴加蒸馏水,降低DNA 的溶解度 B在操作时,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证DNA分子完整 C加蒸馏水可同时降低DNA 和蛋白质的溶解度,两者均可析出 D当丝状粘稠物不再增加时,此时NaCl的浓度相当于0.14mol/L 10洗涤剂能够瓦解细胞的什么结构,但对DNA 没有影响() A细胞壁B细胞膜C细胞核D细胞质 11在 DNA 提取过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是() A不易破碎B减少提取过程中DNA 的损失 C增加 DNA 的含量D容易洗刷 12下列操作中,对DNA的提取量影响最小的是() A使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出DNA 等核物质 B搅拌时,要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌 C在“析出DNA 粘稠物”时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中粘稠物不再增加 D在用酒精沉淀DNA 时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却 13DNA 的粗提取中,将与滤液体积相等的、冷却的() ,静置 2 3min,溶液中会出 现白色丝状物。 A09%的 NaCl B0.14mol/L 的 NaCl溶液 C质量分数15%的 HCl D体积分数为95%的酒精溶液 14在向溶解DNA 的 NaCl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是() A加快溶解DNA 的速度B加快溶解杂质的速度 C减少 DNA 的溶解度,加快DNA 析出D减小杂质的溶解度,加快杂质的析出 15去除 DNA 滤液中的杂质时,可直接在滤液中加入() ,反应 1015min A嫩肉粉B蒸馏水C2mol/lNaCl D酒精

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