1、内部校准规程作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版第1次修改第1页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06一、温度计内部校准规程1目的对温度计进行内部校准，确保其准确性和适用性保持完好。2范围适用于测量溶液温度所使用的水银温度计。3校准用基准设备外校合格的数显温度表（精度O1C）.4环境条件室温。5校准步骤5.1 检查玻璃体是否破裂及刻度是否清晰，否则更换。5.2 用一透明容器盛装适量自然溶解的冰水混合物。5.3 把温度计有水银液体的一端放进冰水混合物中，然后观察水银柱的变化情况。5.4 待水银柱变化稳定，再对照温度计刻度是否在0的位置，记录读数
2、5.5 第一次测量完成后，取出温度计，待水银柱回到自然的位置后,重新第二次测量，这样连续测量三次，取得结果再取其平均值，记录在内校记录表内允许误差L0C.5.6 以上步骤完成后，把温度计放在50。C以下的温水中（30。C为宜），用基准数显温度表进行校对（把探头放在水银柱旁边的温水中），对比并记录温度计的和基准温度表的温度读数。5.7 第一次测量完成取出温度计，待水银柱回到自然的位置后，再进行第二、第三次测量，测量结果取其平均值，记录在内校记录表内，允许误差1.0oCo5.8 把温度计放在50。C以上的热水中（80。C为宜），重复5.6、5.7相关步骤。5.9三次测量值与标准值之差，均在允许误
3、差范围内，该温度计判校准合格。6相关记录6.1内校记录表。第二版第1次修改第2页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06二、显微镜内部校准规程1目的对显微镜进行内部校准，确保样本观察清晰、准确。2适用范围适用于使用中和维修后的生物显微镜的自校准。3校准所使用的主要测量设备星点板，测量范围：物镜（0-1000）X,最大允许误差:0.1%o4校准的环境条件温度：25+2,湿度:45%+2%5校准步骤5.1 仪器外观目镜、物镜、聚光镜等部件无损坏。显微镜各移动与转动部分应有舒适感觉，不得有过紧过松现象。5.2 光学系统成像质量打开光源，缩小光阑孔，校验其中
4、心与聚光镜、物镜和目镜孔径中心重合程度。由低倍镜到高倍镜观察星点板，校验物镜之球差、色差、慧差和像散等像差。5.3 改变物机镜放大倍数转动物镜转换器，改变物镜放大倍数时，观察像面中心焦离量。5.4 刻度和刻字显微镜上所有刻度和刻字均须明显，清晰。6相关记录6.1内校记录表第二版第1次修改第3页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06三、微量移液器内部校准规程1目的保证移液器加样的准确性。2适用范围各种品牌、型号的固定、可调、单道或多道移液器。3校准环境和用具要求3.1 室温：2025oC,测定中波动范围不大于0.5。&3.2 电子天平：放置于无尘和震
5、动影响的台面上。称量时，为保证天平内的湿度（相对湿度6090%）,天平内应放置一装有IOmL蒸储水的小烧杯。3.3 小烧杯:5IOmL体积。3.4 测定液体：温度为2025。C的去气双蒸水。3.5 选定校准体积：拟校准体积；移液器标定体积的中间体积。最小可调体积（不小于拟定体积的10%）0如为固定体积移液器，则只有一种校准体积。4校准步骤将移液器调至拟校准体积，选择合适的吸头；调节好天平；来回吸吹蒸储水3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头；垂直握住移液器，将吸头浸入液面23mm处，缓慢（13秒）一致地吸取蒸储水；将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体；将移液器以30。C角放入称量烧杯中，缓
6、慢一致地将移液器压至第一档，等待13秒，再压至第二档，使吸头里的液体完全排出；记录称量值；擦干吸头外面；按上步骤称量10次;(IO)取10次测量值的均值作为最后移液器吸取的蒸储水重量，参照附录计算体积；第二版第1次修改第4页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06(U)按校准结果调节移液器。5相关记录5.1内校记录表附录不同温度下的纯水密度(PW)温度tpw80.988690.9985100.9984110.9983120.9982130.9981140.9980150.9979160.9978170.9976180.9975190.9973200.
7、9972210.9970220.9968230.9966240.9963250.9961260.9959270.9956280.9954第二版第1次修改第5页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06四、温控设备内部校准规程1目的确保温控设备符合相关技术参数，设定温度与实际温度相符。2范围适用于新购置、使用中以及检修后的温控设备的校准。包括生化培养箱、恒温水浴锅、恒温摇床培养箱、干热灭菌箱等。4校准用设备校准好的温度计3校准方法3.1 按温控设备的技术参数要求设定温度上下限，显示达到设定的温度后，放入校准好的温度计，记录实际温度。3.2 记录实际温度与
8、显示温度的差值，计算是否符合设备的技术参数要求。3.3 与设备的技术参数要求不符合者，请生产厂技术人员进行检修。4相关记录4.1内校记录表第二版第1次修改第6页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06五、荧光定量PCR仪内部校准规程1目的荧光定量PCR仪是复杂精密仪器，其校准工作需由专业工程师进行。除与仪器厂家达成协议定期校准以外，以实验判断仪器校准状态也可为何时进行仪器校准提供信息。2范围新购置、使用中、检修后的荧光定量PCR仪。3校准用试剂标准化荧光PCR试验试剂及102、103、104、106标准品。4校准方法4.1 分析室内质控图，及时发现系
9、统误差。经过分析排除了试剂和人员误差后，确定仪器是否出现了检测偏差需要校准。4.2 确定仪器需校准后，进行仪器状态效验试验4.2.1 准备标准化试剂及标准品4.2.2 在仪器处于校准状态下，用标准化试剂对102、103、104、106标准品进行扩增实验，分别计算标准曲线的斜率、截距、相关性的控制限。4.2.3 绘制标准曲线，观察标准曲线的三个参数是否处在控制范围和102标准品是否检出。4.2.4当仅有102标准品未检出时，检查实验全过程。再次上机检测102标准品。4.2.5 当102标准品未检出、标准曲线的三个参数超出控制范围或仅出现后者时，先排除实验的人员、试剂因素，再重复实验。如结果依然，
10、联系厂家立即进行仪器校准。4.3仪器经过校准后，重复该实验。5相关记录5.1内校记录表第二版第1次修改第7页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B061目的确保实验室用水符合各项实验要求。2范围新购置、使用中、检修后的纯水制备仪器。3校准用设备电阻表、酸度计、分光光度计、电子天平4校准方法4.1 取制好的各级纯水按实验室用水标准进行检测。4.2 制备的水不符合标准的仪器按仪器操作说明清洗或更换滤柱。4.3 检修后仪器制备的纯水重新检测，仍不合格的联系生产厂进行检修。5相关记录5.1内校记录表第二版第1次修改第8页共21页内部校准规程实施日期2010-0
11、3-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06一级4.4 范围（25。C）:电导率（scm.25）:0.1比电阻（M.cm.25）:1O可氧化物质以（O）计上,mg/L:吸光度（254nm,Icm光程）：O.OO1蒸发残渣（1052。C）,mg/L:可溶性硅以（SIo2计,mg/L:0.01二级4.5 范围（25。C）:电导率（scm.25）:1比电阻（M.cm.25）:1可氧化物质以（0）计上,mg/L:0.08吸光度（254nm,Icm光程）：0.01蒸发残渣（1052C）,mg/L:1.0可溶性硅以（SIo2计,mg/L:0.02三级PH值范围（25。C）:5.0-7.5电导率（scm.2
12、5）:5比电阻（M.cm.25）:0.2可氧化物质以（O）计上,mg/L:0.40吸光度（254nm,Icm光程）：蒸发残渣（1052）,mg/L:2.0可溶性硅以（SIo2计，mg/L:第二版第1次修改第9页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06七、PCR仪内部校准规程L目的：确保本仪器的功能和运行正常，检测数据正确，特制定本规程。2 .技术指标加热范围：可调式热盖，控制温度范围从30oC110oCo温度精度：0lC热均一性：15秒内温度均一性0.3oCo升温、降温速度：最快升温速度4。（：/秒，最快冷却速度3.（C秒。电压:100240V频率：
13、5060Hz/相功率：250W存储量：程序最多可有1000个，每个最多99步，总步骤可达1500步。3 .自校步骤3.1 打开电源开关，电源指示灯亮，仪器自校。3.2 进入控制面板，利用各种操作键编制程序。3.3 放入加好样品的Eppendorf管，关好热盖，启动程序。3.4 待程序运行结束后，取出Eppendorf管，将产物进行电泳，并与标准Marker进行比较，观察其是否与预期设计的片段大小相符。4 .结果判定将自校结果与上述各项技术指标进行比对，如二者相符，则仪器检定合格，可以正常使用；否则应及时与厂家联系维修。5 .相关记录5.1内校记录表第二版第1次修改第10页共21页内部校准规程实
14、施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06八、电泳仪内部校准规程1.核查目的：确保本仪器的功能和运行正常，能够达到电泳图谱正常的效果。2使用范围：该自校程序适用于水平电泳仪。3技术指标额定电压：100-120200-240V50-60HZ输入功率：约350W纹波系数：2%稳定度：0.5%调整率：0.5%最大电压：140V2.5A4 .检验方法4.1 打开电源，在恒定电流的情况下测定电压或在恒定电压的情况下测定电流，若与显示值相符，则仪器运转正常。4.2 利用配制好的琼脂糖凝胶和标准DNAMarker电泳，看两次同一Marker跑出的电泳图是否相同，若相同则仪器运转正常。5
15、相关记录5.1内校记录表第二版第1次修改第11页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号Ye-ZY-B06九、生物安全柜自校程序1.自校目的：确保本仪器的功能和运行正常，能够得到准确可靠的实验结果。6 .技术指标型号NU-425CLASS11A/B3外排气/循环气30%/70%可选尺寸(英尺)2、3、4、6安全性环境保护7 .检验方法7.1 材料：90mm培养皿，营养琼脂培养基，酒精灯等。7.2 方法321培养基的制备：在生物安全柜开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入熔化并冷却至约45。C的营养琼脂培养基约15ml,放置凝固后，倒置于37。
16、C培养箱培养48h,证明无菌后备用。322沉降菌数测定：先打开生物安全柜内的紫外灯照射30min后,将备妥的营养琼脂平板5个，以无菌方式移入生物安全柜，置四个角落和中央各1个，开盖，暴露30min后将盖盖上。在37。C培养箱内倒置培养48ho7.3 结果及判定：取出平板，计算平板的生长菌落总数，求出平均菌落数，结果应14检测结论若结果符合100级要求，则证明仪器自校合格，否则与仪器厂家联系,进行仪器调试与校正。5.相关记录5.1内校记录表第二版第1次修改第12页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06十、冰箱期间核查程序L核查目的：确保本仪器的功能和
17、运行正常，冻存效果实验要求。2 .技术参数：2.1 电源:交流165V-252V(50Hz)2.2 输入总功率：130W2.3 总容积：301L其中冷冻室64L,冷藏室237L2.4 冷冻能力：4kg24h2.5额定输出功率：1-400W2.5 额定耗电量：L3kW.h24h2.6 外型尺寸：深655宽600X高1627mm3 .核查方法：3.1 分别设定冷藏室和冷冻室的温度为4,-20,观察冰箱显示温度是否与设定值一致。3.2 将刻度完整，并能正常测温的温度计分别放入冰箱的冷藏室和冷冻室。3.3 待30分钟后，取出温度计读数。4 .核查结果判定标准：观察温度计显示的温度刻度，冷藏室和冷冻室温
18、度分别为4。匚-2（TC,则该冰箱功能和运行正常。5 .相关记录5.1内校记录表第二版第1次修改第13页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06十一、ATBExpression细菌鉴定仪自校规程L目的：为验证本仪器是否能准确地鉴定送检的常见细菌，以及仪器能否正常运行，特制定本规程。2、使用范围：该自校规程适用于ATBExpression细菌鉴定仪。3 .校验人员要求：校验人员应该为该仪器的负责人或熟悉该仪器操作的人员。4 .校验标准：该仪器能够准确地鉴定出标准的参考菌株（大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌），并显示出各种生化反应参数（因本实验室不进行药敏实验
19、未购入药敏试剂条，因此涉及到药敏的内容不进行校验）。5 .检验程序5.1 打开总电源开关，将电脑、ATB电源以及打印机电源打开。5.2 选择电脑的DOS系统。5.3 在C:操作符下直接键入ATB即可进入鉴定系统。5.4 试条的阅读5.4.1 在主菜单上，用J及按至,apiATB,的项目上,然后按Enter。5.4.2 屏幕上即显示3个选择：FI=目测鉴定细菌试条F2=自动阅读鉴定细菌试条F3=自动阅读药敏分析试条5.4.3 目测鉴定细菌，按Fl:5.4.3.1 屏幕即出现各种鉴定试条的类别。5.43.2利用T及1选择所需要目测的试条名称，例如API20E,再按,Enter,o5.4.33屏幕
20、出现记录表，再对应试条的结果，用键盘输入反应读数。FI=阳性，F2=阴性，F3=?,亦可用数字输入。5.4.3.4再按Enter确认读数，不然的话，按Delete。543.5再按（Enter,电脑分析开始。5.43.6屏幕出现所鉴定细菌的名称、结果的合理性等等资料。第二版第1次修改第14页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B065.43.7如需更详细的有关内容，可按下列键：FI=试条上生化结果F2=整体报告F3=其他试条提议F5=生化结果比较F6=打印报告543.8如需打印报告，请按F6,再按（Enter,o5.4.4自动阅读鉴定细菌，按F2:5.4
21、4.1屏幕出现红色显示，将ATB鉴定试条放于阅读器的承托架上，然后按Enter。5.4.4.2阅读器将会自动判断试条的类别，分析试条的反应情况，显示鉴定报告。5.4.43屏幕出现所鉴定细菌的名称、结果的合理性等等资料。5.4.4.4亦可用F键读取更详细的资料，同目测鉴定程序一样。5.445亦可用F6打印报告。5.5 患病动物资料5.5.1.1 菜单上，用J及按至,PATIENT,的项目上，然后按,Enter,o5.5.1.2 显Zn:5.5.2.1 在SRRef一栏，输入样本编号,例如19282102,共13位，再用Enter确认。5.5.1.3 UlTlame栏中，输入畜主姓氏，按Ente
22、r,然后在Name项输入畜主名字，按（Enter,以上可用汉语拼音。5.5.1.4 Specimendate一栏，确认样本收集日期，用,Enter,o5.5.1.5 ommem一栏用？加一键，选择患病动物评语，例如Male指雄性，Female指雌性等，又如不需要的话，按,Enter,即可。5.5.1.6 如需即时进行鉴定/药敏测试，请按F3,Nextstep即进行下一个步骤或按Enter以作存档，日后再添加测试结果。5.5.1.7 屏幕出现四种鉴定模式（因应试条种类）：Fl=自动阅读鉴定F2=目测鉴定第二版第1次修改第15页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC
23、ZY-B06F3=不鉴定，只作细菌药敏ESC=QUit,离开5.5.1.8 根据试条的阅读程序操作，进行鉴定（目测或自动阅读）。注意：如要将结果存档于电脑记录内，必须将所得结果VALIDTE,用Enter键于细菌名称上按一下完成细菌鉴定后，屏幕将出现患病动物样本的英文菌名称5.5.1.9 当鉴定完成后,sensitivitytest的字幕闪动，然后根据您的需要，提出四项药敏工作模式:Fl=自动阅读F2=目测F3=不作药敏测试F4=离开5.5.1.10 如需在这一个标本上多作一个或一个以上的细菌鉴定及药敏，请按Fl;Addanorganism=加进一种细菌”注意：每个标本最多作5个细菌测试5.
24、5210如已完成，请按Enter作为存档5.6 对有档案号（往诊）的动物样本增加测试或更改结果5.6.1 在主菜单上，用及选择Specimen或,PATIENT,项目上，再按,Enter,o562将要翻看的样本档案号输进SpRef一栏中，按,Enter,屏幕即显示该动物以往的鉴定及药敏结果：在sens（即药敏）一项中，X=已做，=未做。5.6.3 根据您的需要，按：FI=加一种菌落F2=再做鉴定F3=再做药敏F6=鉴定要敏同做以进行修改5.7 显示存档内的动物样本记录571在主菜单上，用J及选择DISPLAY项目。第二版第1次修改第16页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导
25、书文件代号YC-ZY-B06572将要显示的档案号或动物名称或标本号输入适当位置上。5.7.3屏幕显示情况：注释：Reference为样本号码Date等于样本收集日期G.1-G.5等于每一个样本的五类细菌的编号A=鉴定结果B=药敏结果或X二已完成=未做5.7.3 用T,1,J或注明所需更详细的项目。例：在？栏内，按,Enter,在上，按Enter,即该样本的细菌鉴定及药敏资料，所用的试条及菌名。例：又可在a或b栏内，于X或符号上按,Enter,即出现详细结果。5.7.4 如需打印，可按F6键。6相关记录6.1 自校后应及时填写内校记录表，记录由校验人员和负责人签名。第二版第1次修改第17页共2
26、1页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06十二、酶标分析仪自校规程1 .检查环境温度和湿度是否满足仪器工作的需要。环境温度：-5C-55C相对湿度：10%-85%2 .用抹布清洁仪器外部。用专用的电脑百洁布清洁仪器的配件：电脑、鼠标、键盘和打印机。对于酶标板托盘等较为容易被溅出试剂污染的地方，要尤其注意清理。3 .打开酶标分析仪的电源。酶标分析仪具有开机自检功能。如果仪器的光电系统正常，顺利通过自检，液晶显示屏会自动进入样品测试界面，等待进样；如果光电系统有故障，故障内容会及时显示在液晶显示屏上。仪器20分钟后方稳定。注意事项：A由于长时间使用，以下四个部
27、位较容易出现失效或故障，应多加注意：滤光片、光源灯、酶标板托盘、保险管。B如果出现故障，在专业人员指导下进行故障排除，或通知厂家进行维修，切勿私自维修。故障排除及维修方法参见仪器档案说明书。4 .打开电脑，电脑应能通过自检进入桌面。点击酶标软件图标应能进入且正常使用。此时，按检测程序检测一组空白样（空气），看能否顺利完成检测。若不能，仪器会自动检测，提示出错部位。检测完成后，电脑与酶标分析仪的数据传输应正常，且能正常处理数据并打印。5 .部分参数备注：光谱范围：340750nm;测量时间：单波长7s96孔;双波长15s96孔。卤素灯光源寿命：长寿命卤素灯5000小时。6.校验后及时填写内校记录
28、表第二版第1次修改第18页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号YC-ZY-B06十三、自动酶标洗板机自校程序1.自校目的：确保本仪器的功能和运行正常，能够得到准确可靠的实验结果。2.技术指标清洗头：8、12通道清洗次数：0-9次可调清洗条数：1-12排可调浸泡时间：0240秒可调振板时间：0-240秒可调清洗液残留量：2uL每孔3 .检验方法3.1 开机后,设置好洗涤程序，12孔8条，洗液体积300L,洗涤5次。冲洗的过程中，观察吸液是否均能吸完。3.2 用移液器测量洗液体积是否一致。3.3 观察每次出液和吸液的液面是否一致。3.4 观察洗液是否外漏。4 .核查结
29、果判定标准：每孔洗液体积均为300L;每次吸液均能吸完；洗液无外漏现象；则该洗板机功能和运行正常。5.自校结束后及时填写内校记录表第二版第1次修改第19页共21页内部校准规程实施日期2010-03-01作业指导书文件代号Ye-ZY-B06十四、通用小型离心机自校规程L目的：确保本仪器的功能和运行正常。2 .技术参数容量：1210rL转速：4000rpm电压：220V功率：40W延时：024min3 .自校方法3.1 外观：应无损坏，无零配件丢失。3.2 电源连接应良好，开关控制状态应良好。3.3 启动仪器后，离心机应正常工作。各种参数的设置功能如设定温度，设定时间，设定离心速度等功能应正常。3.4 离心效率检验：取一份样品,以2000rpms3000rpmx4000rpm几种状态下离心5分钟，分别检验在不同离心速度下的两相分离状态正常情况下应随着离心速度的增大，分离效果应越来越好。3.5 时间检验：根据其他准确定时表和仪器设定时间对比，误差应不超过0lmin04相关记录4.1内校记录表
