1、质量管理体系文件（第十册）生化室制度、操作规程、流程（sop文件）文件编号：Sxyjyyjyk-io-sh-oi-i54vAIL匕第A版依据全国临床检验操作规程（第三版）编制2015版编制：审核：批准：生效日期：2015年06月01日医院检验科为使临床检验操作规范化，指导检验人员严格按规程进行正确的常规操作，保证检验质量,特制定本操作规程。本规程的编写遵循了ISe)15189医学实验室关于质量和能力的特殊要求及WS/T227-2002临床检验操作规程编写要求的有关规定并结合产品实际情况制订,作为本产品的标准操作程序。本规程从2015年6月1日起实施，每两年复审一次本规程由医院检验科编制。本规程
2、起草单位：医院检验科。本规程主要起草人：王庆玲、张静。本规程首次起草。目录第一部分工作制度生化室工作制度5标本采集与接收登记制度6实验室常规消毒工作制度7试剂管理制度7设备管理制度.-7差错事故处理制度8第二部分操作程序开机前准备9开机9启动控制软件9设置参数9放置试剂9定标9质控10样本分析10急诊测试10追加样本测试11样本重测11编辑标本结果11打印/传送样本果11退出操作软件11关机11关机后的操作11第三部分标准操作规程血清白蛋白测定13丙氨酸氨基转移酶18谷氨酸氨基转移酶24天冬氨酸氨基转酶29碱性磷酸酶34直接胆红素39总胆红素44月旦碱酯酶49总胆汁酸54尿素59尿酸64肌酎6
3、9胱抑素C74葡萄糖79糖化血红蛋白85肌酸激酶90肌酸激酶同工酶95乳酸脱氢酶101A羟丁酸脱氢酶106总胆固醇Ill甘油三酯116载脂蛋白B121高密度脂蛋白胆醇126低密度值蛋白胆醇131载脂蛋白Al136RF141ASO146同型半胱氨酸151生化室工作制度（一）个人防护1.着装：（I）进入实验室前要摘除首饰，修剪指甲，以免刺破手套。长发应束在脑后，禁止在实验室内穿露脚趾的鞋。（2）在实验室里工作时，要始终穿着实验服，实验室外禁止穿防护服。皮肤受损时应以防水敷料覆盖。（3）当有必要保护眼睛和面部以防实验对象喷溅、或紫外线辐射时，必须要配戴护目镜，面罩（带护目镜的面罩）或其它防护用品。（
4、4）实验室工作区不允许吃、喝、化妆和操作隐形眼镜，禁止在实验室工作区内的任何地方贮存人用食品及饮料。（5）实验室防护服不应和日常服饰放在同一柜子。个人物品、服装和化妆品不应放在有规定禁放的和可能发生污染的区域。2.洗手（1）实验室工作人员在实际或可能接触了血液、体液或其他污染材料后，即使戴有手套也应立即洗手。（2）摘除手套后、使用卫生间前后、离开实验室前、进食或吸烟前、接触每一患者前后应例行洗手。（3）实验室应为过敏或对某些消毒防腐剂中的特殊化合物有其他反应的工作人员提供洗手用的替代品。（4）洗手池不得用于其他目的。在限制使用洗手池的地点，使用基于乙醇的“无水”手部清洁产品是可接受的替代方式。
5、5）当实验过程可能涉及到直接或意外接触到血液、有传染性的材料或被感染的动物时，必须要戴上合适的手套，脱手套后必须洗手。（6）实验人员在操作完有感染性的村料或动物后，离开实验室工作区之前必须进行“六步法”洗手。（7）每日工作完毕，所有操作台面、离心机、加样枪、试管架必须擦拭、消毒。（二）操作准则1 .所有样本、培养物均可能有传染性，操作时均应带手套。在认为手套已被污染时应脱掉手套，马上洗净双手，再换一双新手套。2 .不得用戴手套的手触摸自己的眼、鼻子或其他暴露的黏膜或皮肤。不得带手套离开实验室或在实验室来回走动。3 .严格禁止用嘴吸液。实验材料禁止放入嘴里。禁止舔标签。4 .所有样本、培养物和
6、废弃物应被假定有传染性，应以安全方式处理和处置。5 .所有的实验步骤都应尽可能使气溶胶或气雾的形成控制在最小程度。任何使形成气溶胶的危险性上升的操作都必须在生物安全柜里进行。有害气溶胶不得直接排放。6 .应尽可能减少使用利器和尽量使用替代品。包括针头、玻璃、一次性手术刀在内的利器应在使用后立即放在耐扎容器中。尖利物容器应在内容物达到三分之二前置换。7 .所有溅出事件、意外事故和明显或潜在的暴露于感染性材料，都必须向实验室负责人报告。此类事故的书面材料应存档。8 .实验室应保持整洁、干净，当潜在的危险物溅出或一天的工作结束后，工作台表面应消毒。9 .所有弃置的实验室生物样本、培养物和被污染的废弃
7、物在从实验室中取走之前，应使其达到生物学安全。标本采集与接收登记制度1 .采样前和接收标本时应核对病人身份，严格执行查对制度。2 .采血时必须遵照样品采集与处理操作规程。3 .采集后，应将样本立即送实验室，签写登记记录。4 .实验室人员按样本接收程序规范处理、保存样本。实验室常规消毒工作制度1 .应按照实验室生物安全通用要求（GB19489-2004）和消毒技术规范（2012年版）处置实验室废弃物。样品其它污染物品，均应视为感染性废弃物，经消毒后应置于专用的密封防漏容器中再安全运至医疗废物暂存处。2 .实验室充分准备好废弃物消毒具及消毒液；实验室根据感染物品性质不同采取不同消毒方法。3 .每日
8、全部实验结束后用相应消毒液拖擦地面、台面、仪器表面（接触部位）、桌、椅。定期擦抹门窗及玻璃。内、外、移动紫外线同时辐照1小时。4 .操作过程中如有样品、检测试剂外溅，应及时适宜方法消毒。5 .实验产生的所有废液必须先消毒，然后倒入医院排污系统。6 .人员消毒，工作人员进入实验室必须衣帽整齐，带口罩、橡胶手套做好个人防护。下班时，必须严格洗手消毒。7 .发生意外皮肤针刺伤或切割伤、皮肤污染、粘膜污染、衣物污染、污染物泼溅、空气污染事故时，应针对事故的类型立即进行紧急处理。8 .实验室消毒情况由专人进行详细的登记，科主任监督检查，医院随时抽查。试剂管理制度1 .由科主任对检验科试剂申购、品牌、质量
9、价格、使用及管理情况进行督查。2 .工作人员根据实际情况，认真、详细填写周计划表，务必注明详细的名称、规格、数量及品牌。3 .检验科试剂必须由科主任审核，并负责报库管采购，品牌不得随意更改。杜绝浪费和积压。4 .所用的试剂必须符合质量要求，必须有三证。不得使用过期、劣质试剂。5 .供应商所送的试剂由总库科室共同清点后才能接收，特殊试剂由检验科主任清点后才能在货单上签字，有出入者必须由科主任和总库解决，再将货单交总库统一结账。6 .领用时应检查物品质量和试剂品名、厂家、人份、批号、过期时间及外包装有无渗漏等，若有问题，应及时向科主任反映。7 .对存放试剂和有毒有害物质、化学危险品、放射性物质的
10、冰箱、容器应上锁。8 .使用试剂时应签写试剂开启记录。设备管理制度L由科主任负责监督和检查仪器设备的使用状况，定期校准仪器的准确度。本科室仪器设备建立台账明细。2 .对仪器要经常性的保养，定期检查，认真填写实验维护记录及仪器使用记录，并存档。3 .实验仪器不准随便乱动，否则造成仪器设备损坏者，要追究其责任，认真处理。贵重仪器应由专人负责管理。4 .仪器操作前必须培训、考核，仔细阅读仪器操作说明书，熟练掌握该仪器的使用方法及维护办法，考核合格后方可操作。5 .当班者在使用中应严格遵守操作规程，不得擅自做与实验无关的内容。遇到问题应作及时处理，并详细记录。问题严重者，应及时上报科主任予以解决。6
11、每次使用完毕，操作人应认真检查仪器状态，擦净仪器，断电后方可离去，如有损坏要及时上报，检修。废液倾倒情况，并详细记录该次使用情况。7 .对有温度要求的仪器设备，如冰箱冷藏室、冷冻室及恒温培养箱、水浴箱等，均应建立登记本，每天监测温度。差错事故处理制度1 .实验室检测工作人员必须要有高度的责任心和严肃的法制观念，严防差错事故的发生。2 .由于责任心不强、不认真执行规章制度，不遵守操作规程或技术因素而引发检验错误，对病人未造成严重后果的，称为差错。差错按程度不同，分为一般差错和严重差错。一级差错记差错一次，二级差错写出书面检查，三级差错停职检查并给与适当经济处罚。一级差错：(1)违反操作规程，导
12、致标本损坏，需重新采集标本或由于接收标本未认真查对，违反查对制度，影响检验者。(2)工作环境不能做到规范管理、违反生物安全者。(3)未按时记录结果、绘制质控图、当发现失控时隐瞒不报者。二级差错：(1)未按时间先后顺序使用试剂，导致试剂过期或由于存放不当造成试剂变质者。(2)项目漏查、做错项目，且标本已处理，需再次采取标本检验者。(3)因操作不当，导致设备故障，影响较大者。三级差错：(1)漏做、错做一般标本的检验目的，编错试管号码，标错标本联号、采错病人标本，写错检验结果并已发出报告者。(2)粗心大意写错报告难以挽回者。3 .因责任心不强、管理不善导致阳性标本丢失者引发严重事件接受法律制裁。临床
13、生化检验实验室Chemray420SOP操作程序1、开机前准备A、检查电源排插，确认电源输入开关打开。B、检查废液瓶是否已满，如满，请清空。C、检查打印纸是否足够，如不够，添加打印纸。D、检查清洗液和蒸偏水是否足够，如不够，请添加。E、确认试剂盘79号位置已经放置清洗液，80号位置已经放置去离子水，如没有放置，请添加。F、确认样本盘97号位置已经放置ISE（选配）洗液，如没有放置，请添加。G、确认样本盘98号位置已经放置酸清洗液，如没有放置，请添加。H、确认样本盘99号位置已经放置碱清洗液，如没有放置，请添加。I、确认样本盘100号位置已经放置去离子水，如没有放置，请添加。J、检查加样针，确认
14、无污染，无弯折，如有污染，擦洗加样针，如有弯折，更换加样针。检查试剂针，确认无污染，无弯折，如有污染，擦洗试剂针，如有弯折，更换试剂针。2、开机系统通上电后，依次打开：主机电源，分析部电源，显示器电源，电脑主机电源，打印机电源。3、启动控制软件登陆Windows操作系统后，在桌面运行Chemray420全自动生化分析仪操作软件。4、设置参数申请测试前，必须至少设置完成下列参数： 点击“参数设置”一“项目设置”，按试剂说明书输入项目的参数，点击“参考范围”，输入参考范围。 点击“参数设置”一“标准设置”，按试剂说明书输入需定标项目的参数。 点击“参数设置”“质控设置”，按质控说明书设置各项目的靶
15、值和SD。 点击“试剂设置”，设置试剂信息和试剂位。 点击“系统设置”“系统控制参数”，设置系统温度。 点击“系统设置”“打印设置”，设置打印信息。 点击“系统设置”“科室设置”，设置科室和医生信息。5、放置试剂在试剂盘上设定的试剂位放置相应的试剂，打开试剂瓶盖，在使用试剂瓶时，请选用与试剂位置设置的容量一致的试剂瓶以确保正确的余量检测。6、定标使用前，进行定标测试。点击“样本申请”一“标准申请”，申请定标测试项目。申请定标后，在样本盘上设定位置放置该项目的定标液。点击l,进行定标测试。点击“结果查询”一“标准查询”，查看定标结果。临床生化检验实验室Chemray420SOP操作程序7、质控点
16、击“样本申请”“质控申请”，申请质控测试项目。申请质控后，在样本盘上设定位置放置该项目的质控液。点击0L进行质控测试。点击“结果查询”一“质控查询”，查看质控结果。8、样本分析 申请样本测试1）手工申请样本测试（任何情况下都可使用）点击“样本申请”一“样本申请”，申请样本测试。申请样本后，在样本盘上设定位置放置相应的样本。2）批量申请样本测试点击“样本申请”“样本申请”，编辑测试项目后，点击“另存为”，输入起始样本位和结束样本位，点击“确定申请样本后，在样本盘上设定位置放置相应的样本。 点击g,进行样本测试。 点击“测试状态”一“测试列表”，查看样本实时结果；点击“结果查询”“病人记录”，查看
17、样本测试结果。9、急诊测试 申请急诊测试1）快速急诊样本申请点击“暂停”一“样本申请”，在样本申请表中选择样本测试项目，同时将“急诊”单选框选上，保存。申请样本后，在样本盘上设定位置放置相应的急诊样本。点击曲垩，进行急诊样本测试。2）一般急诊样本申请点击“样本申请”，在样本申请表中选择样本测试项目，同时将“急诊”单选框选上，保存。申请样本后，在样本盘上设定位置放置相应的急诊样本。点击进行急诊样本测试。 点击“测试状态”一“测试列表”，查看样本实时结果；点击“结果查询”“病人记录”，查看样本测试结果。临床生化检验实验室Chemray420SOP操作程序10、追加样本测试点击“暂停”“样本申请”，
18、申请新样本测试。申请样本后，在样本盘上设定位置放置相应的样本。点击3,进行样本测试。11、样本重测 点击“测试状态”一“测试列表”，在当前列表中选择要重测的样本项目，点击“重新测试”，设置相关重测参数，按“确定”按钮。 点击IlSa,运行重测。12、编辑样本结果需要时，编辑样本结果。 注意：结果编辑应在上级医生的指导下进行。点击“结果查询”“病人记录”，选择任一样本记录，可编辑一个或多个样本测试的结果。13、打印/传送样本结果点击“结果查询”“病人记录”，选择要打印/传送的样本记录，然后点击“打印”或“传输”按钮。14、退出操作软件所有测试完毕，系统处于待机状态时，可点击“关机”，选择“退出”
19、一“确定”，退出操作软件。15、关机退出WindoWS操作系统后，按下面顺序关掉各部分电源，打印机电源、显示器电源、分析部电源（若需关闭冷藏系统，请关闭分析部主电源）。16、关机后操作 盖上试剂盘里每个试剂瓶的盖子。 取走样本盘里的定标液、质控液和样本。 检查分析仪台面是否有污染，若有，用干净软布将污渍擦拭掉。 检查废液桶，如果需要，请将废液桶清空。血清白蛋白目录1检验申请132标本采集与处理133试剂及成份144方法原理145仪器146校准液及校准模式147质控品与室内质控规则148标本检测步骤159结果计算1510操作性能1511参考范围及医学决定水平1512检验结果的报告及范围1513临
20、床意义1514结果审核分析以及相关项目的联系1615威胁生命的“紧急值”及报告规定1616有关引用程序与文件1617参考文献16血清白蛋白测定标准操作规程L检验申请单独检验项目申请：血清总蛋白（AlbUmin,缩写TP）测定；组合项目申请：肝功能测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。2.标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h,不饮酒24h后。体检对象抽血前应有两周的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2 标
21、本采集2.2.1 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子SST真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子PST试管。2.2.2 检验申请单和血标本试管上统一且唯一的标识符。2.2.3 标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。2.2.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.2.5 下列标本为不合格标本2
22、2.5.1 标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.252对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、黄疸和浑浊的标本。2.2.5.3对无法确认标本与申请单对应关系的。2.254其他如标识涂改、标本试管破裂等。1.3 标本处理1.3.1 接收标本在室温放置30min45min后离心分离血清或血浆。吸出血清/血浆。标本应立即测量。处理样品时要将其当成生物污染品。1.3.2 标本保存时间：室温（1525C）下可稳定一周，普通冰箱中（28）稳定一个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过Id的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。1.3.3 已完成测试的标本保持完整的识别
23、号，置28冰箱内保存7d。1.4 标本采集的注意事项1.4.1 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素或EDTAK2(lmgmL)作为抗凝剂。1.4.2 应该在4小时内测定完毕，倾斜放置的标本比较直立放置的标本结果要低0.4-0.8mgdL3 .试剂及成份3.1 试剂本科使用的白蛋白检测试剂盒，由浙江伊利康生物技术有限公司生产，试剂为液体单一试剂，其组份如下:组成浓度琥珀酸缓冲液75mmolL澳甲酚绿10mmolL聚氧乙烯月桂醴50mmolL叠氮钠lgL3.2 试剂盒保存及效期保存于28,不开盖情况下至标签的失效期。开盖后放于仪器的试剂仓冰箱中至少稳定30d。新打开试剂不宜
24、与已用过的试剂混合在一起,否则易造成试剂稳定性下降。3.3 试剂盒准备液态试剂型，即开即用，无特殊准备。4 .方法原理4.1 测定方法：双缩JR法。4.2 原理：在pH4.0的溶液中，澳甲酚绿与清蛋白立即反应形成绿色复合物，此复合物在波长60Onm处的吸光度与清蛋白的浓度成正比。5 .仪器雷杜-420全自动生化分析仪6 .校准品与校准模式6.1 校准品：使用浙江伊利康生物技术有限公司提供的试剂盒内校准液或朗道的复合校准液(Cat.No.10759350),其白蛋白浓度值可溯源至美国国家标准技术研究所(NIST)标准参考材料(SRM)927ao6.2 标准类型和校准点数目：线性模式，n个校准点。
25、6.3 校准周期：校准间隔时间为Full,Id。但在：更换试剂批号或出现质控漂移时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。6.4 校准液重建方法：试剂盒内校准液直接使，罗氏复合校准液用3.0Oml蒸储水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。7 .质控品与室内质控规则7.1 质控品由两个不同水平定值质控血清.7.2 质控液重建方法：用5ml蒸储水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。7.3 质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。7.4 质控规则：采用WeStgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。7.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取
26、各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。8 .标本检测步骤装载试剂T进行校准进行质控一输入标本检测项目加载标本T标本测定T结果复核报告。9 .结果计算计算公式：白蛋白浓度（gL）=（AA标本-AAl）XK+cixb+aA:A=A546nm-A660nm;C1：第一个校准品浓度；b：与参考方法或其他仪器进行直线回归的斜率，缺省LO0；a：与参考方法或其他仪器进行直线回归的截距，缺省0.00。10 .操作性能10.1 精密度：批内CVW3%,批间相对极差CVW6%。10.2 准确度：测量结果在质控血清靶值2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确
27、保质控选择与试剂的方法学保持一致。10.3 线性范围：060gL10.4 方法的有限性及干扰因素：甘油三酯达11.3mmolL时影响小于10%,血红蛋白达4.5g/L时影响小于10%,胆红素达684IImol/L时影响小于2%。11 .试剂使用的注意事项11 .1本试剂仅应用于体外诊断。12 .2扔弃废物应符合当地的法规要求。11.3校准液为人血清白蛋白（HbSAg、抗HCV、抗HlV为阴性），操作与处理方法仍须与病人样品相同。13 .参考范围及医学决定水平参考范围：成人3753gL014 .检验结果的报告及范围14.1 结果的报告13.1结果经审核确认准确无误后发出报告。14.1.2 报告单
28、上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。14.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。14.2 报告范围：060g/L,超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，并经上级主管技师审核后报告。15 .临床意义15.1 血浆清蛋白的生理功能很多，包括营养、维持渗透压，它是血管内多种物质的运输载体等。清蛋白在肝脏中合成，是监测肝脏疾病的一个重要指标。15.2 肝脏疾病使清蛋白合成减少表现为血清清蛋白浓度降低，并与肝脏病变的严重程度成比例，清蛋白是对肝脏功能作分级的评价指标之一。15.3 3血清清蛋白降低
29、还见于严重的吸收不良、肠梗阻、风湿热、恶病质以及多种全身性疾病。15.4 当有蛋白质丢失过多的情况，如大面积烧伤、肾病综合征、慢性肾炎、糖尿病、慢性肠炎、肿瘤、充血性心力衰竭等，血清清蛋白也常降低。14 .5血清清蛋白增高的情况较少见，高清蛋白血症偶见于脱水所致的血液浓缩。15 .结果审核分析以及相关项目的联系15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2 审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3 相关项目：审核与总蛋白、血清蛋白电泳、丙氨酸氨基转移酶等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16 .威胁生命的“紧急值
30、及报告规定（此项不作规定）17 .有关引用程序与文件17.1 XXX型自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.2 生化检验室内质控标准操作程序。17.3 检验结果审核程序。17.4 标本送检和接受程序。18 .参考文献18.1 .浙江伊利康生物技术有限公司总蛋白检测试剂盒说明书。18.2 中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第三版）东南大学出版社2006P337-338丙氨酸氨基转移酶目录1检验申请182标本采集与处理183试剂及成份194方法原理195仪器196校准液及校准模式197质控品与室内质控规则208标本检测步骤209结果计算2010操作性能2011试剂使用的注意事项
31、2012参考范围及医学决定水平2013检验结果的报告及范围2114临床意义2115结果审核分析以及相关项目的联系2116威胁生命的“紧急值”及报告规定2117有关引用程序与文件21丙氨酸氨基转移酶测定标准操作规程L检验申请单独检验项目申请：血清丙氨酸氨基转移酶(AlanineAminotranSferaSe,缩写(ALT/GPT)测定；组合项目申请：肝功能测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。2.标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h,不饮酒24h后。体检对象抽血前应有两周的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。止匕外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中
32、各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2 标本采集2.2.1 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子SST真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子PST试管。2.2.2 检验申请单和血标本试管上统一且唯一的标识符。2.2.3 标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。2.2.4 标本采集后与检验申请单
33、一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.2.5 下列标本为不合格标本2.2.5.1 标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。225.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、黄疸和浑浊的标本。225.3 .3对无法确认标本与申请单对应关系的。225.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。225.5 处理225.5.1 标本在室温放置30min45min后离心分离血清或血浆。吸出血清或血浆,标本应立即测量。处理样品时要将其当成生物污染品。225.5.2 保存时间：20-25稳定1天；4-8稳定7天；-2(C稳定1个月。为避免
34、标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过Id的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。225.5.3 成测试的标本保持完整的识别号，置28。C冰箱内保存7d。225.6 的注意事项225.6.1 议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素或EDTAK2(lmgmL)作为抗凝剂。225.6.2 在4小时内测定完毕，否则按要求保存标本。血清不宜反复冷冻保存，以免影响酶的活性。225.6.3 中含有酮酸能消耗NADH,使结果偏高；血清中谷氨酸脱氢酶增高时，在有氨存在的条件下，亦消耗NADH,使结果偏高2 .4.5血清标本出现溶血、脂血、黄疸或抗坏血酸的干扰情况参见抗干扰能力。3 .试剂及成份3.1 试
35、剂本科使用的丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒，由浙江伊利康生物技术有限公司生产，试剂为液体试剂，其组份如下：组成R1:R2=2:1混合后溶液的浓度Rl:TriS缓冲液：80mmolLPH=7.8NADH0.18mmolLLDH1200ULR2:起动液L-丙氨酸450mmolLa-酮戊二酸18mmolL3.2 试剂盒保存及效期未启封试剂盒在28保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定28d。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。新打开试剂不宜与已用过的试剂混合在一起,否则易造成试剂稳定性下降。3.3 试剂盒准备液态试剂型，即开即用，无特
36、殊准备。4 .方法原理4.1 测定方法：IFCC改良法。4.2 原理：丙氨酸氨基转氨酶催化L-丙氨酸的氨基转移，生成丙酮酸。丙酮酸与NADH在LDH的催化下反应生成乳酸和NAD+。NADH在340nm处有特异吸收峰，其被氧化的速率与血清中ALT的活性成正比，在34Onm处测定NADH下降速率，即可测出ALT活性。ALTL-丙氨酸+a-酮戊二酸丙酮酸+L-谷氨酸LDHNADH+丙酮酸+H+L-乳酸+NAD+5 .仪器雷杜-420全自动生化分析仪6 .校准品与校准模式6.1 校准品：朗道复合校准液或采用因数法。采用因数法时按照浙江伊利康生物技术有限公司提供的参数中样本和试剂比例，理论因数=3376
37、实际因数可根据自行进行校准。6.2 标准类型和校准点数目：线性模式，X个校准点。6.3 校准周期：空白定林：每日需做试剂空白定标。全点定标：更换试剂批号或出现质控漂移时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后；均须需要全点定标O6.4 校准液重建方法：复合校准液用5ml蒸储水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。7 .质控品与室内质控规则7.1 质控品采用PreeinOrmU（正常范围质控）和PrecipathU（病理范围质控）两个水平的血清进行室内质控。7.2 质控液重建方法：用5.00ml蒸储水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。7.3 质控品测定：在每一批标本中测定至少两个水平质控
38、血清各一次。7.4 质控规则：采用WeStgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。7.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。8 .标本检测步骤装载试剂一进行校准一进行质控一输入标本检测项目一加载标本一标本测定一结果复核一报告。9 .结果计算AminVtXlOOO样品中ALT活1（UL）=A/minXFeVsd式中：A/min每分钟吸光度变化率；eNADH摩尔吸光系数6.22；Vt反应液总体积（ml）；d比色杯光径（cm）；100O变化因数；Vs标本体积（ml）；10 .操作性能10.1 精密度：批内CV2
39、批间CV4%。10.2 准确度：测量结果在质控血清靶值2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。10.3 线性范围：2600L（血清与试剂用量之比为1:12时）10.4 方法的有限性及干扰因素：EDTA（2gL）,柠檬酸钠（116mmolL）对本试验有干扰。胆红素1026mol/L、甘油三酯11.4mmolL无明显干扰。磷酸毗哆醛能使血清中ALT显示最大活性，使用不含有磷酸咄哆醛试剂测定ALT活性，某些疾病患者如肾脏病患者，可因血清中磷酸毗哆醛含量不足而致ALT活性低估。11 .试剂使用的注意事项11.1 本试剂仅应用于体外诊断。11
40、 .2扔弃废物应符合当地的法规。12 .3换算公式：U/l0.0167=ukat/113 .参考范围及医学决定水平参考范围：血清丙氨酸氨基转移酶参考范围（酶测定温度37）男：350UL;女：245UL014 .检验结果的报告及范围14.1 结果的报告14.1.1 结果经审核确认准确无误后发出报告。14.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。14.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。14.2 报告范围：血清与试剂用量之比为1:12时，测定上限为60OU/L。超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果
41、准确可靠的文字说明，并经上级主管技师审核后报告。15 .临床意义15.1 ALT存在于各种组织细胞内，以肝细胞中含量最多，正常时血清中ALT活性很低。15.2 肝细胞因感染病毒而受损伤，尤其是处于急性期时，ALT从细胞内逸出至血液中，血清中ALT活性可明显升高，因此是各种肝炎患者检查的一个重要指标。15.3 某些药物对肝细胞有毒性副作用，过量或长期使用可致肝脏受损，亦可以ALT活性升高反映。15.4 实质性脏器有非感染性炎症或损伤时，如脂肪肝、梗阻性高胆红素症、肝内胆汁淤滞、胆管炎、胆囊炎、肝癌、急性心肌梗死、心肌炎、心力衰竭时的肝脏淤血等，均可成为血清ALT升高的原因。15.5 ALT与AS
42、T联合测定并计算其比值有助于对某些疾病的鉴别，正常情况下ALT/AST比值小于1,但在传染性肝炎及其他原因引起的肝脏炎症时，ALT/AST比值升高；肝硬化、肝癌、进行性肌营养不良、皮肤炎时，AST升高的幅度高于ALT。16 .结果审核分析以及相关项目的联系16.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。16.2 审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。16.3 相关项目：审核与肝功能组合中其他项目、胆汁酸的关系，ALT/AST比值是否与疾病一致。如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。17 .威胁生命的“紧急值”及报告规定17.1 1000UL
43、为引起临床重视的紧急值，可能有较严重的肝细胞坏死或受损的情况。17.2 处理程序17.2.1 检测人员立即报告审核者。17.2.2 审核者首先根据审核程序，分析质控、定标、试剂的情况是否正常，当天其他已做标本本项目的总体情况有无异常，确认实验有关的基础是正常状态中。17.2.3 出现紧急值的标本有无异常，该标本其他相关项目有无异常，尤其是该患者其他肝功能指标的情况。17.2.4 对该标本进行一次重复测定，确认紧急值是否重现。17.2.5 报告技术质量主管及科主任，立即与临床联系，了解临床相关情况。17.2.6 确认此紧急值是可报告的，由技术主管或科主任立即电话向主管临床医生报告，并作好电话报告
44、记录,包括电话报告时间和对方接听人员的标识。17.2.7 及时签发正式检验结果报告。18 .有关引用程序与文件18.1 XXX型自动生化分析仪仪器标准操作规程。18.2 生化检验室内质控标准操作程序。18.3 检验结果审核程序。18.4 标本送检和接受程序。19 .参考文献19.1 .浙江伊利康生物技术有限公司丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒说明书。19.2 中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第三版）东南大学出版社2006Y-谷氨酰转移酶目录1检验申请242标本采集与处理243试剂及成份254方法原理255仪器256校准液及校准模式257质控品与室内质控规则258标本检测步骤269
45、结果计算2610操作性能2611试剂使用的注意事项2612参考范围及医学决定水平2613检验结果的报告及范围一2614临床意义.2615结果审核分析以及相关项目的联系.2716威胁生命的“紧急值”及报告规定.2717有关引用程序与文件一.27Y-谷氨酰转移酶测定标准操作规程L检验申请单独检验项目申请：血清Y-谷氨酰转移酶（Y-glutamyltransferase,缩写Y-GT）测定；组合项目申请：肝功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。2.标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h,不饮酒24h后。体检对象抽血前应有两周的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。止匕外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2. 2标本采集2.2. 1除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带，不抗凝，置普通试管中。或
