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农残检测方法 1.农残试剂配置 缓冲溶液：取一包缓冲剂，加入 500ml 蒸馏水，溶解搅拌均匀，密闭、避光、 阴凉处保存。 显色剂：取显色剂一瓶，加入15ml 缓冲溶液溶解， 4冰箱中保存。 底物：取底物一瓶，加入15ml 蒸馏水溶解， 4冰箱中保存。 乙酰胆碱酯酶：取乙酰胆碱酯酶一瓶，用 3ml 缓冲溶液溶解， 4 冰箱中保 存。 注：因农残试剂生产厂家众多，使用时请以试剂说明书为准！ 2.样品处理 选取有代表性的蔬菜样品，擦掉样品表面泥土，剪成 1cm 见方碎片，取样品 1g，放入烧杯或提取瓶中，加入 5ml 缓冲溶液，振荡 1min 2min ，倒出提取液，静 置 3min5min，待用。 注意：样品不可用水冲洗，应擦去表面泥土等杂物后取样。为了保证取样具有代 表性，叶菜一般取来自不同植株叶片的叶尖部样本，果菜从不同个体的表皮处取样。 3.对照溶液测试 在提取瓶中加入 2.5ml 缓冲溶液，再加入 100ul 酶液、 100ul 显色剂，摇匀后于 37放置 15 分钟 ( 每批样品的控制时间必须一致 ) 。15 分钟后再加入 100L 底物 摇匀 , 此时检液开始显色反应 , 应立即倒入 1cm 比色皿，放入仪器比色池中，将仪器 调到测量界面 , 按操作指示面板按键区的“对照” 按钮，仪器开始做对照。 3 分钟后仪器自动对照完成，对照完成后将对照样取出，保持仪器界面不变。 注意：对照测试必须在第一通道进行，对照测试A 应 0.3 ，若对照测试 的结果小于以上数值时，仪器会自动提示“对照错误”，须重新做对照，以保证 测量结果的准确性。 ( 对照测试 A0.3 的原因：一是酶的活性不够，二是反应 温度太低。 ) 4.样品溶液测试 另取干净的提取瓶，放入 2.5ml 样品提取液，加入 100ul 酶液、 100ul 显色剂， 摇匀后于 37放置 15 分钟 ( 放置的时间与对照液放置的时间必须一致 ) 。15 分钟后再加入 100 L 底物摇匀 , 此时检液开始显色反应, 应立即倒入 1cm 比色皿， 放入仪器比色池中，按操作指示面板按键区的“测量”按钮开始测量， 3 分钟后仪 器测量完成，显示测量结果。结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，当蔬菜样品 提取液对酶的抑制率 50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类 农药存在，样品为阳性结果，阳性结果的样品需要重复检验2 次以上。 对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。 5.说明 葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有 影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株（体）蔬 菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减 少色素的干扰。 甲醛检测方法 1.试剂配置 甲醛试剂（一） 甲醛试剂（二）：将甲醛试剂（二）加少量热水溶解，再加入甲醛试剂 （二），冷却后定容于50ml 容量瓶 注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4）保存！甲醛试剂（一）有腐蚀性； 配制好的甲醛试剂（二）可使用一个月。 2.样品处理 准确称取 0.2g 样品放入哈希管中，加入 5 滴甲醛试剂（一）和 10ml 蒸馏水， 混匀后盖紧瓶盖，放入沸水中加热5min，取出冷却至室温，用0.45 m 微孔滤膜 过滤，以除去悬浮颗粒，此为待测溶液。 3.空白 取蒸馏水 10ml 于 10ml 比色管中，加入甲醛试剂（二） 1 ml ，混合均匀，放 入恒温水浴锅中 50加热 15 分钟，取出冷却至室温，移入 1cm 比色皿中，放入仪 器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会 自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成” 。 4.测量 移取处理好的样品溶液5ml 于 10ml 比色管中，加入蒸馏水定容至10ml，然 后再加入甲醛试剂（二） 1 ml，混合均匀，放入恒温水浴锅中50加热 15 分钟， 取出冷却至室温，移入1 cm 比色皿中，放入已经做过对照的仪器通道中按操作 提示面板区的“测量” 键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中甲醛浓度 值 X（mg/kg ）。 吊白块检测方法 1.试剂配置 吊白块试剂（一） 吊白块试剂（二）：将吊白块试剂（二）加少量热水溶解，再加入吊白块 试剂（二），冷却后定容于50ml 容量瓶 注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱 4）保存！吊白块试剂（一）有腐蚀 性；配制好的吊白块试剂（二）可使用一个月。 2.样品处理 准确称取 0.2g 样品放入哈希管中，加入 5 滴吊白块试剂（一）和 10ml 蒸馏 水，混匀后盖紧瓶盖，放入沸水中加热 5min，取出冷却至室温，用 0.45 m 微孔滤 膜过滤，以除去悬浮颗粒 , 此为待测溶液。 3.空白 取 10ml 蒸馏水于 10ml 比色管中，加入吊白块试剂（二）1 ml ，混合均匀， 放入恒温水浴锅中50加热 15 分钟，取出冷却至室温，移入1cm 比色皿中，放 入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后， 仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成” 。 4.测量 移取处理好的样品溶液5ml 于 10ml 比色管中，加入蒸馏水定容至10ml，然 后再加入吊白块试剂（二）1 ml ，混匀后放入恒温水浴锅中50加热 15 分钟， 取出冷却至室温，移入1 cm 比色皿中，放入已经做过对照的仪器通道中按操作 提示面板区的“测量” 键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中吊白块浓 度值 X（mg/kg ）。 双氧水检测方法 1.试剂配置 双氧水试剂（一） 双氧水试剂（二） 注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4）保存！双氧水试剂（一）有 腐蚀性，双氧水试剂（二）有毒。 2.样品处理 准确称取 1.0g 样品放入哈希管中，加 2ml 双氧水试剂（一）和 6ml 蒸馏水， 混匀后盖紧瓶盖，放入恒温水浴锅 0.45 m 微孔滤膜过滤，滤液移入 50下加热10min ，取出冷却至室温，用 10ml 比色管中，加 0.2ml 双氧水试剂（二）， 再加蒸馏水至 10ml 刻度，此为待测溶液。 3.空白 向比色管中加入 2ml 双氧水试剂（一）和 0.2ml 双氧水试剂（二），再加蒸馏 水至 10ml 刻度，混匀，转入 1cm 比色皿，放入仪器相应比色池中，按操作指示面 板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏 下方显示为“对照测量完成” 。 4.测量 向待测液中加入 2ml 双氧水试剂（一）和 0.2ml 双氧水试剂（二），再加蒸馏水 至 10ml 刻度，摇匀，转入 1cm 比色皿中，放入仪器比色池中进行测量，测量完成 后，仪器会自动显示样品浓度结果 X（mg/kg ）。 亚硝酸盐检测方法 1. 试剂配置 亚硝酸盐试剂（一）：加少量热蒸馏水溶解，冷却后定容于50mL 容量瓶。 亚硝酸盐试剂（二）：加蒸馏水溶解，定容于50mL 容量瓶。 亚硝酸盐试剂（三）：将两种亚硝酸盐试剂（三）溶于少量热水中，冷却后 定容于 50ml 容量瓶。 亚硝酸盐试剂（四）：将亚硝酸盐试剂（四）加亚硝酸试剂（四）定容 于 100mL 棕色容量瓶，避光保存。 亚硝酸盐试剂（五）：加蒸馏水溶解，定容于 100mL 棕色容量瓶，避光保存。 注意：除试剂（一）需常温保存外所有试剂均需避光、低温（冰箱 4）保存！ 亚硝酸盐试剂（一）容易析出，请用50左右水浴加热1 分钟后使用。配制好的亚 硝酸盐试剂（五）有腐蚀性，可放置一个月左右，溶液变绿后不能使用。 2. 样品处理 准确称取 0.1g 经搅碎混匀的试样，置于哈希管中，加入1mL 亚硝酸盐试剂 （一）和 5mL 的蒸馏水，密闭后于沸水浴中加热 15min ，取出后冷却至室温，然后 一面转动一面加入 1mL 亚硝酸盐试剂（二），摇匀，再加入 1mL 亚硝酸盐试剂 （三），以沉淀蛋白质。加水至 10ml 刻度，摇匀，放置 0.5 小时，除去上层脂肪， 余液用 0.45 m 微孔滤膜过滤，滤液备用。 3. 对照测试 取 5ml 蒸馏水于 10ml 比色管中，加入 0.1mL 亚硝酸盐试剂（四），混匀， 放置 5min 后加入 0.2ml 试剂（五），混匀，静置 15 分钟，转入 1cm 比色皿，放入 仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪 器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。 4. 样品测定 取 5ml 待测溶液于 10ml 比色管中，加入 0.1 亚硝酸盐试剂（四）混匀，放 置 5min 后加入 0.2ml 试剂（五），混匀，静置 15 分钟，转入 1cm 比色皿，放入已 经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量” 键进行测量，测量完成 后，仪器自动显示样品中亚硝酸盐浓度值X（mg/kg ）。 六价铬检测方法 1. 试剂配置 六价铬试剂（一）：加蒸馏水稀释，定容于100mL 容量瓶 六价铬试剂（二）：加蒸馏水稀释，定容于100mL 容量瓶 六价铬试剂（三）：加蒸馏水稀释，定容于100mL 容量瓶 六价铬试剂（四）：加蒸馏水稀释，定容于 100mL 容量瓶 六价铬试剂（五）：将六价铬试剂（五）溶解于六价铬试剂（五）中， 加水稀释至 100ml ，储存于棕色瓶中置冰箱内保存。 注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱 4）保存！六价铬试剂（一）、六价 铬试剂（二）、六价铬试剂（三）、六价铬试剂（四）有腐蚀性；当配制好的六价 铬试剂（五）溶液色变深后不能使用。 2. 样品处理 操作步骤 将待测的粮食、蔬菜、水果类样品洗净晾干，碾碎，混匀备用。禽蛋、 水产等洗净、晾干，取可食部分，混匀备用。 取经过预处理的均匀样品1.000g 于哈希管中（敞开），加入 2.0mL 试剂 （一）纯硝酸， 4.0mL 试剂（二）过氧化氢溶液，轻轻摇匀，放入亚临界 水萃取仪中，从温度升到 140时开始计时，保持恒温 lh，同时做试 剂空白，取出哈希管待自然冷却后，将消解液移入l0mL 比色管中，将哈希 管用水洗净，合并洗液于比色管中，用水稀释至 10ml 刻度，混匀、待测。 3. 对照测试 取 10ml 蒸馏水于 10ml 比色管中，向比色管内加入 0.1ml 六价铬试剂（三）和 六价铬试剂（四），混匀，再加入0.4ml 试剂（五）摇匀，放置10min 后，转入 1cm 比色皿，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行 对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测 量完成”。 4. 样品测定 取待测溶液，加蒸馏水稀释至刻度，再向比色管内加入0.1ml 六价铬试剂（三） 和六价铬试剂（四），混匀，再加入0.4ml 试剂（五）摇匀，放置10min 后，转入 1cm 比色皿，放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量” 键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中六价铬浓度值X（mg/kg ）。 重金属检测方法 1. 试剂配置 重金属试剂（一） 重金属试剂（二） 重金属试剂（三）：加少量蒸馏水溶解，定容于100ml 容量瓶 重金属试剂（四）：加少量蒸馏水溶解，定容于100ml 容量瓶 注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4）保存！重金属试剂（一）、重 金属试剂（二）有腐蚀性。 2. 样品处理 操作步骤 将待测的粮食、蔬菜、水果类样品洗净晾干，碾碎，混匀备用。禽蛋、 水产等洗净、晾干，取可食部分，混匀备用。 取经过预处理的均匀样品1.0g 于哈希管中，加入 2mL 重金属试剂（一）， 2mL 重金属试剂（二）， 4ml 蒸馏水，轻轻摇匀，盖紧上盖，放入超声波 提取仪中提取 10 分钟，取出哈希管待自然冷却后，打开上盖，过滤将溶 液移入 10ml 比色管中，加重金属试剂（四）调节溶液PH=9 ，加水至刻 度，此为待测溶液。 3. 对照测试 取 10ml 蒸馏水于比色管内，加入1ml 重金属试剂（三），混匀，放置 10min 后，转入1cm 比色皿，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照” 键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对 照测量完成”。 4. 样品测定 取待测溶液，加蒸馏水稀释至刻度，再向比色管内中加入 1ml 重金属试剂 （三），混匀，放置 10min 后，转入 1cm 比色皿，放入已经做过对照的仪器通道 中按操作提示面板区的“测量” 键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品 中重金属浓度值 X（mg/kg）。 二氧化硫检测方法 1.试剂配置 二氧化硫试剂（一）：加蒸馏水溶解，定容于 500ml 容量瓶 二氧化硫试剂（二）：加蒸馏水溶解，定容于 50ml 容量瓶二 氧化硫试剂（三） 二氧化硫试剂（四）：加蒸馏水溶解，定容于50ml 容量瓶 二氧化硫试剂（五）：将两种二氧化硫试剂（五）混合，用热水溶解，冷却 后定容于 50ml 容量瓶 二氧化硫试剂（六）：将二氧化硫试剂（六） 溶解定容于50ml 容量瓶中， 取出 20ml 于 100ml 容量瓶中，滴加二氧化硫试剂（六）混匀使溶液由红变黄， 加水至刻度 二氧化硫试剂（七）：加蒸馏水溶解，定容于 50ml 容量瓶 二氧化硫试剂（八） 注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4）保存！二氧化硫试剂（一） 有毒，二氧化硫试剂（七）、二氧化硫试剂（八）有腐蚀性。 2.样品处理 2.1 水溶性固体样如白砂糖称取1.0g ，用少量水溶解，置于10ml 比色管中，加入 0.4ml 二氧化硫试剂（七），5 分钟后加入0.4ml 二氧化硫试剂（八），然后加入 2ml 二氧化硫试剂（一），加水至刻度，混匀，此为待测溶液。 2.2 其他固体样如饼干、粉丝称取 1.0g 研磨均匀的试样，以少量水润湿并移入 10ml 比色管中，加入 2ml 二氧化硫试剂（一），浸泡 4 小时以上，若上层溶液不 澄清可加入二氧化硫试剂（四）及二氧化硫试剂（五）各 0.25ml ，混匀，过滤，加 水至刻度，此为待测溶液。 2.3 液体试样如葡萄酒可直接吸取 1mL，置于 10ml 比色管中，用少量水稀释，加 入 2ml 二氧化硫试剂（一），摇匀，最后加水至刻度，混匀，此为待测溶液。 3.空白 取一支干净的 10mL 比色管，准确加入二氧化硫试剂（一） 10ml ， 1ml 二氧化 硫试剂（二）， 1ml 二氧化硫试剂（三）及1ml 二氧化硫试剂（六），混匀，放置 20 分钟后，转入 1cm 比色皿，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区 的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下 方显示为“对照测量完成” 。 4.测量 取待测溶液 5ml 于 10mL 比色管中，加入二氧化硫试剂（一）至 10ml 刻度， 再加入 1ml 二氧化硫试剂（二）， 1ml 二氧化硫试剂（三）及 1ml 二氧化硫试剂 （六），混匀，放置 20 分钟后，转入 1cm 比色皿，放入已经做过对照的仪器通道中 按操作提示面板区的“测量” 键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中二 氧化硫浓度值 X（mg/kg ）。 备注：本仪器在室温20°左右测量最准确。 附录 1常见故障及原因 如果操作不当，相应的会出现下列出错提示信息。都可 按取消返回。 下表中若未说明生产问题的原因，则与错误提示信息相同。 错误提示信息产生问题原因 对照测试错误酶的活性不高；温度太低 查询单号输入错 查询单号输入的数据大于总数据量 误 附录 2各物质限量标准 限量标 检测指标品名准 mg/kg 农药残留蔬菜、水果50% 水发产品 10 水产品 不得检 出 零食 不得添 加 大麦粉 24 甲醛 小麦粉 14 绿豆粉2 棉白糖7 白砂糖4 红糖3 腐竹6 粉丝1 鳕鱼肉 48 吊白块面粉、米粉、豆制品 不得检 出 双氧水水发品、肉制品、干果、椰果 不得检 出 食盐、牛乳粉2 鲜肉、鲜鱼、粮食3 蔬菜4 亚硝酸盐 鲜蛋类5 香肠、腊肠、香肚、腌菜、火腿 20 肉制品、火腿肠、灌肠 30 肉罐头 50 西式火腿、罐头 70 六价铬粮食、蔬菜、水果、皮蛋、盐蛋 不得检 出 重金属粮食、蔬菜、水果、皮蛋、盐蛋 不得检 出 银耳、莲子、龙眼、荔枝、虾仁、米不得检 粉、豆芽、生姜出 白糖 50 竹笋、蘑菇及罐头 50 薯类淀粉 30 二氧化硫葡萄、黑加仑浓缩汁 50 果汁浓浆 15 食糖、饼干、粉丝100 发酵酒、葡萄酒、果酒 50 婴幼儿铁强化糖果 50 蜜饯、果脯500