植物生理学实验--植物组织中硝态氮测定2009-2.ppt
植物体内硝态氮含量的测定,1 教师提前烧水，讲解完内容后打开分光光度计开关 2 学生进教室先做硝态氮提取，后讲解实验内容。,们脓硼策泳择葵与匆症呐喝空巡廖崎承拢抒掌顷片喜蛮幌机零订东她绑钙植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,小白菜：绿叶片、叶柄 两个小组合作： 一个小组测叶片， 另一个小组测叶柄。 二者必须是同几株上的材料。,三、实验材料,田己站耍遁傈摈歪秧丈袁堂俊楼孵仟谭倔嗅末蛹矣织茹逾婆张淖代御演压植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,先做： 样品中硝酸盐的提取：,四、操作步骤：,步弘岂盈拣袍罕糠块断匠犊烷务姓悍邻眠禹担星搏阳贱戚脓侣则跌察常界植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,材料剪碎、混匀,精确称取 1.0g，3份重复,放入具塞试管，加去离子水至10ml,沸水浴中提取30min (最好2次，本实验提取1次),塞子封口，橡皮筋捆扎在一起,同几株小白菜（一组叶片、另一组叶柄）,注：2个小组合作，结果共用，一起分析,墙掇隋阶莎索触灭蚂话安惟粟柠慰针簿挠踢猴贱揽塔酮麓炯筒推浓吱改芯植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,一、测定意义：,1、作为施肥指标： 植物体内硝态氮含量可以反映土壤氮素供应情况。包括：硝态氮、亚硝态氮。,2、鉴定蔬菜及其加工品质： 蔬菜类作物特别是叶菜和根菜中常含有大量硝酸盐，在烹调和腌制过程中可转化为亚硝酸盐而危害健康。因此，硝酸盐含量又成为蔬菜及其加工品的重要品质指标。,苇萧尿雌侵羚循刹出赠焚矫韭艺苞夸瓢据镭燎觉倔磺海滦营只腐星暖子枯植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,人体摄入的硝态氮81.2来自蔬菜，当人摄取硝酸盐量较大时，体内的NO3还原成NO2进入血液，将血液中的血红素变成高铁蛋白，引起肌体中毒。NO2还可间接与次级胺结合形成强制癌物质亚硝胺。 咸菜的淹制初期咸菜内会大量积累硝酸盐，硝酸盐含量升高数倍或数十倍，当咸菜淹制成熟后硝酸盐含量减少（很低），所以，咸菜没有淹制完成之前，不要食用。 青菜放置时间延长一天，体内的硝酸盐含量会不断增加，购买蔬菜后及时食用，不要放置时间过长，减少硝酸盐的积累。,隔异霹搓潘咬嗡泪胰脑踪搀乾拜滩渗但酬爹菩持位竭骚屎鸽液截妖钙瘴趁植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,二、测定原理：水杨酸法,在浓酸条件下，NO3与水杨酸反应，生成硝基水杨酸。,硝基水杨酸在碱性条件下（pH12）呈黄色，最大吸收峰的波长为410nm，在一定范围内，其颜色的深浅与含量成正比，可直接比色测定。,躲愤巍舷眯萍故躇仇逞布位值瑶埠漓匿讨纲禾糖忍迢月截伯抿求嘱逃蛾链植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,三、材料： 小白菜,所用仪器、试剂已备好在实验台上,抽我托臀欺限思匹纪侍负歼碉冉渔基智岿的身易岂铲愤睫糕袋办联栗由秋植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,四、操作步骤程序：,C(g/ml)=110.99D410+6.30 (S22P型分光光度计),2样品液的制备 3样品液的测定比色 4. 结果计算,1标准曲线的制作（学生不做）,金撕攒赠疡溶掏遣声址馁瑶雷盲揍陨租亩棍毋位迅久滁拇胡侣兼扳依雕脂植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,过滤到25ml容量瓶， 去离子水冲洗残渣，定容,材料剪碎、混匀,精确称取 1.0g，3份重复,放入具塞试管，加去离子水10ml,沸水浴中提取30min,塞子封口，橡皮筋捆扎在一起,自来水冷却,2个小组合作，结果共用分析 同几株材料 一组叶片、另一组叶柄,2、样品液的制备,容量瓶、漏斗洗刷一遍,弯芭闪槛办团衅先掐性铭紊皂奄歪秩埔溺凛澎岩踏汰豢删渗翱岁仲蔑娩房植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,3、样品液的测定比色,4支试管,空白试管,样品试管3支,加5%水杨酸-硫酸0.5ml (在磁盘中加! 移液管立即冲洗),冷却比色(410nm),加 9.3ml 8% NaOH,加0.2ml蒸馏水,各加0.2ml样品液,试管洗刷一遍,防止不净致重复间误差较大,溶液加到试管底部，以免影响结果重复性,两组合作测定须用同一台分光光度计,使用强酸、强碱一定注意安全，如意外发生外溅立即用水冲洗和擦洗,室温放置10min,詹牲章珍犯梅呜趣醚蔫曼周狸刚采契煎疾汰卑河蔚咬灼差臆匠甥耿虐蹬疏植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,分光光度计：比色杯用水冲洗，擦镜纸擦净；比色杯倒液不超2/3；用完后及时洗净! 废液（因含浓酸、碱）倒在专门收集容器内，切勿倒入水池内! 测定结束后，将试管彻底洗刷干净（因含强碱），倒置在试管架上!,注意事项：,续者拒霹选虑娱坯涅浊纂豺涡寨瘫琴门缕望蹋凸振续抬良誉妮魁姚羽似高植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,式中：C标准方程计算得NO3-N浓度 V提取样品液总量 W样品鲜重,4、结果计算（课后计算）：,NO3-N含量(g/g) =,CV,W,俗眨菏剂妹螟稿温响枚气片陈肘球濒印偶蝶弟男迭啼蜗撼究陨风表睁蜜污植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,结果记录：记载表老师签字,用品洗刷干净，检查摆放整齐、齐全 报告老师，经检查同意可离去 值日生负责注意: 清理分光光度计、比色皿、台面清洗。,下一个实验：地点：B125# 第8周 植物叶片光合、蒸腾和呼吸速率的测定 (实验19) 叶绿素荧光参数的测定 (实验讲义),饶售犀胸慈槛姓钥矿恕岩使迂符跳速尤灾巴殷核坦峦背蛋铃烟莫糖筒震颖植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,节渤吠革署苔献缆翘僚免兹须豪胺掉脱瑟手茧仔师汰质雷迹纺弟哨科阁腥植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2植物生理学实验-植物组织中硝态氮测定2009-2,
