2细胞培养-细胞培养用液及培养基-PPT文档资料.ppt
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1、主要内容,培养用液 培养基(液),主要内容,培养用液 培养基(液),培养用液,细胞培养时,除需要培养基,还需要大量的液体,包括 水 盐溶液 消化液 缓冲液 维生素液等,3,培养用液,水 细胞培养所必须的成分(吸收与代谢) 维持细胞形态、调节渗透压及PH 细胞培养对水质的要求极高,培养用液,水 自来水 蒸馏水 (三蒸) 离子交换水,培养用液,水,培养用液,水 超纯水 将水中的导电介质几乎完全去除,又将水中不离解的胶体物质、气体及有机物均去除至很低程度的水。电阻率大于18M*cm,或接近18.3M*cm极限值。,培养用液,平衡盐溶液(BSS) 组织细胞培养基中常用的基本液体。 功能 维持渗透压、调
2、节PH、供给细胞生存所需能量及无机离子成分。 用途 合成培养基(液)的基础液及用于洗涤组织、细胞等,培养用液,平衡盐溶液,9,培养用液,消化液-用途 分散组织、细胞 使细胞脱离附着底物,培养用液,消化液-成分 胰蛋白酶 二乙烯四乙酸二钠(EDTA) 胶原酶溶液,培养用液,消化液-胰蛋白酶 胰蛋白酶: 从动物胰脏分离的一种水解酶 功能: 使细胞间的蛋白质水解、细胞分散 配置比例: 1:125 或 1:250,培养用液,消化液-胰蛋白酶 注意事项 配置胰蛋白酶消化液时应采用不含Ca2+、Mg2+和血清的液体 使用时,一旦细胞分散后,立即用适量含血清的培养基终止消化反应,培养用液,消化液-EDTA
3、EDTA是一种化学螯合剂,能螯合Ca2+、Mg2+而使细胞分离,对细胞毒性较小。 工作浓度: 0.02%,培养用液,消化液-EDTA 注意事项 需用不含离子的平衡盐缓冲液溶解 与胰酶联合使用可提高消化效率 EDTA不能被血清中和,消化后应彻底 清洗,培养基(液),维持体外细胞生存和生长的基本溶液,是组织细胞培养最重要的条件 分类 天然培养基 合成培养基,培养基(液)-天然培养基,取自动物体液或从动物的组织中分离提取 优点 营养成分丰富,培养效果良好 缺点 成分复杂,来源受限,培养基(液)-天然培养基,类型 生物性液体(血清) 组织浸液(胚胎浸液) 凝固剂(血浆) ,培养基(液)-天然培养基,血
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