复件 常用培养基的制备消毒与灭菌.ppt
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1、微生物学实验,吉林大学生物基础实验教学中心,常用培养基的制备、灭菌与消毒,目的要求 培养基分类 消毒与灭菌 结果检查,实验目的:1.了解培养基的配制原理 2.掌握配制培养基的一般方法和步骤 培养基是人工配制的,适合微生物生长繁殖或产生代 谢产物的营养基质 原则:目的明确 ;营养协调;控制PH、渗透压等条 件;经济节约 方法:生态模拟;查阅文献; 精心设计; 试验比较 步骤:称量、熔化、调PH、过滤、分装、 加塞、包扎、灭菌、冷却、无菌检查,称量,熔化,调pH值,分装与加塞,包扎(1),包扎(2),灭菌,无菌检查,培养基种类: 碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐、水 一、按成份的不同划分 天然培
2、养基、合成培养基、半合成培养基 二、按培养基的物理状态划分 固体培养基、液体培养基、半固体培养基 三、按培养基用途划分 基础培养基、加富培养基、鉴别培养基、选择培养基,一级种培养基: 一级种又称母种,其培养基一般用试管作为容器,所以又称试管斜面培养基,这类培养基又常用于菌种分离提纯,扩大,转管及菌种保存等。 二、三级种培养基: 二、三级种培养基通常采用天然营养物质,如秸秆、棉籽壳、蔗渣等农作物废物,加适量的无机盐类等制成固体培养基。,牛肉膏蛋白胨培养基,牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。其配方如下: 牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,琼脂1520g,水1000
3、mL,pH7.07.2(后调),高氏1号培养基,高氏1号培养基是用于分离和培养放线菌的合成培养基。其配方如下: 可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO43H2O 0.5g,MgSO47H2O 0.5g,FeSO47H2O 0.01g,琼脂1520g,水1000mL,pH7.47.6。,查氏合成培养基,查氏合成培养基是用来分类和培养霉菌的培养基,其配方如下: NaNO3 3g,K2HPO4 1g, KCl 0.5g, MgSO4.7H2O 0.5g,FeSO4 0.01g,蔗糖 30g,琼脂1520g, H2O 1000ml,pH自然,麦芽汁培养基,用来培养酵母菌,干麦
4、芽粉加4倍水,在50-60保温糖化3-4小时,用碘液试验检查至糖化完全为止,调整糖液浓度,煮沸后,过滤,调pH为6.0。,BCG-MSG培养基鉴定几种常见的丝状真菌,新鲜平皿培养基,搁置斜面,消毒与灭菌: 消毒:消灭病原菌和有害微生物的营养体 灭菌:杀灭一切微生物的营养体,芽胞和孢子。 方法: 物理的方法:加热、过滤、辐射 化学的方法:用化学试剂抑制或杀灭微生物。主要破坏细菌代谢机能。如重金属离子,磺胺类药物及抗生素等。,加热法: 干热法:火焰灼烧灭菌和热空气灭菌 1、火焰灼烧适用于接种环、接种针和金属用具如镊子等,试管口和瓶口,涂布用玻璃棒。 2、热空气灭菌利用高温干燥空气(160170C)
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