创伤性MODS患者血可溶性白细胞分化抗原14与内毒素比值变化.pdf

. 7 6·免 疫 学 杂 志第2 2 卷第1 期2 0 0 6 年 1 月I M M U N O L O G I C A L J O U R N A L V o l . 2 2 N o . 1 J a n . 2 0 0 6 文章编号 1 0 0 0 - 8 8 6 1 ( 2 0 0 6 ) 0 1 - 0 0 7 6 - 0 3 创伤性MO D S 患者血可溶性白细胞分化抗原 1 4与内毒素比值 变化 王占 科， ， 柴长春， ， 何凤田 2郭宝珠， ( I . 中 国 人民 解 放军9 4 医 院 检验科， 南昌3 3 0 0 0 2 ; 2 . 第 三军医 大学 基础医学部生物化学与分子生物学教研室， 重庆 4 0 0 0 3 8 ) 摘 要 目 的 探讨创伤多器官功能不全综合症( M O D S ) 患者血浆可溶性白 细胞分化抗原 1 4 与内毒素比值( s C D 1 4 / L P S ) 变化及其临床意义。方法测定正常对照组， 创伤 M O D S 生存组和M O D S 死亡组血浆s C D 1 4 和L P S 的摩尔浓度含量， 并计 算s C D 1 4 和L P S 比 值。观察创伤M O D S 患者血浆 s C D 1 4 / L P S 变化及其与主要器官功能受损指标的关系。结果创伤性 M O D S 各组血浆s C D 1 4 , L P S 均明显高于正常对照组( P 0 . 0 1 ) ， 且创伤M O D S 死亡组L P S 明显高于创伤M O D S 生存组( P0 . 0 1 ) ， 但 s C D 1 4 与创伤M O D S 生存组没有显著差别。创伤M O D S 生存组 s C D 1 4 / L P S 与正常对照组无显著差异， M O D S 死亡组 s C D 1 4 / L P S 明显低于M O D S 生存组( P0 . 0 1 ) 。创伤 M O D S 患者血 s C D 和L P S 水平均与血谷丙转氨酶、 肌酥和二氧化碳分压明显正相 关( P0 . 0 1 ) ， 但s C D 1 4 / L P S 与血谷丙转氨酶、 肌醉和二氧化碳分压明显负相关( P0 . 0 1 ) . s C D 1 4 / L P S 与血谷丙转氨酶、 肌 醉和二氧化碳分压相关系数绝对值最大。结论创伤性M O D S 患者血s C D 1 4 浓度升高幅度不如L P S , s C D 1 4 / L P S 比 值可能作为 判断M O D S 患者器官功能不全程度及预后转归的预警指标。 关键词 创伤; M O D S ; 可溶性白细胞分化抗原1 4 ; 内毒素 【 中图分类号 8 3 9 2 . 9 文献标识码 A C h a n g e s o f p l a s m a WA N G Z h a n - k e , C H A I o f s CD1 4 t o L P Sm p awi t h t r a u ma t i c MODS P L A ， N a n c h a n g 3 3 0 0 0 2 C h a n g - c h i n , H E F e n g - ti a n , G U O B a o - z h u( D e p a r t m e n t of L a b o r a to r y ， N o . 9 4 H o s p i t a l o f ，C h i n a ) A b s t r a c t O b j e c t iv e T o s t u d y th e c li n ic a l s i g n i f i c a n c e o f t h e c h a n g e s o f p la s m a s C D 1 4 / L P S i n p a ti e n t s w ith t r a u m a ti c M O D S . M e - 山 a d s T h e l e v e l s o f s C D 1 4 a n d L P S i n禅 a s m a o f p a t i e n t s i n M O D S - s u r v i v a l , M O D S - d e a d , a n d c o n t ro l g r o u p s w e r e a s s a y e d . T h e r a t i o o f s C D 1 4 t o L P S w a s c a l c u l a t e d a n d t h e c o r r e l a t i o n c oe ff i c ie n t b e t w e e n t h e r a t i o a n d i n d e x o f M O D S w a s s t a t i s t i c a l l y a n a l y z e d . R e s u l t s T h e l e v - e l s o f s C D l 4 a n d L P S i n M O D S - s u r v i - v a l a n d M O D S - d e a d g ro u p s w e r e h i g h e r t h a n t h o s e i n c o n t ro l g ro u p . T h e r a t i o s o f s C D 1 4 t o L P S i n M O D S - s u r v i v a l a n d c o n t ro l g r o u p s w e r e n o s i g n i f i c a n t d i ff e r e n c e 厂f h e r a t i o o f s C D 1 4 t o L P S i n M O D S - d e a d g r o u p w a s l o w e r t h a n t h a t o f M O D S - s u r v i v a l g ro u p ( P0 . 0 1 ) . T h e re a re n e g a t iv e c o r r e la t io n b e t w e e n th e r a t i o s o f s C D 1 4 to L P S a n d i n d e x o f M O D S ( P0 . 0 1 ) . C o n c l u s i o n O u r d a t a s u g g e s t t h a t t h e t r a u m a t i c M O D S p a t ie n t s r e p r e s e n t t h e d e f i c i e n c y o f s C D 1 4 a s c o m p a r e d t o t h e h i g h l e v e l o f L P S . T h e c h a n g e s o f t h e r a t i o o f s C D 1 4 t o L P S m a y b e u s e d t o d i a g n o s i s a n d e v a l u a t e t h e d e g r e e o f t h e M O D S s e v e r i t y o f t r a u m p a t i e n t s . K e y w o r d s T r a u m a ; M u l t ip l e o r g a n d y s f u n c ti o n s y n d ro m e ; s C D 1 4 ; L P S 创伤性多器官功能不全综合症( M O D S ) 是创伤 后住院患者死亡的重要原因。M O D S 为创伤后同时 或相继发生2 个以上器官功能不全的临床综合症。 内毒素( L P S ) 激发的全身炎症反应综合征( S I R S ) ， 在 创伤M O D S 发生、 发展中发挥重要作用 1 。可溶性 白细胞分化抗原 1 4 ( s C D 1 4 ) 是存在于人和动物血液 和体液中的游离内毒素( L P S ) 缺陷受体， 在严重创伤 M O D S 引发全身炎症反应中， L P S 和s C D 1 4 均明显升 高 2 l ， 但二者之间比 值变化的临床意义， 国内 外报道 不多。基于 L P S 和 s C D 1 4以量的关系结合， 我们以 创伤性 M O D S 患者为研究对象， 观察 M O D S 生存组 和死亡组 s C D 1 4 和 L P S 浓度比值( s C D 1 4 几 邢) 变化 及其与主要器官功能受损指标相关性， 旨在探讨 s C D 1 4 相对 L P S 变化在创伤M O D S 发生、 发展中的临 床意义， 为临床诊断和治疗M O D S 提供依据。 收稿日 期 2 0 0 5 - 0 7 - 0 7 ; 修回日 期 2 0 0 5 一 1 0 - 0 8 作者简介 王占 科( 1 9 6 8 - ) ， 男， 河北邢台市人， 副主任医师， 硕士 主要从事临床分子生物学方面的研究。( T e l ) 0 7 9 1 8 8 4 8 2 4 8 ; ( E 一 二 l ) w a n g zh a n k e s i n a . c o m 1 材料与方法 1 . 1 研究对象1 9 9 8 一 2 0 0 2 年各种创伤引起 M O D S 患者5 0 例， 年龄 1 0 - 7 0 岁， 死亡 2 3 例， 其中继发感 染2 2 例， 为创伤 M O D S 死亡组; 生存 2 7 例， 其中继 发感染 9例， 为创伤 M O D S生存组。正常对照组 第 1 期 王占科， 等 . 创伤性 M O D S 患者血可溶性白细胞分化抗原 1 4 与内毒素比值变化 7 7 3 0 名， 为健康体检者， 年龄 1 4 一8 2岁。均空腹采 血， 肝素抗凝， 4 0 0 0 r / m i n 分离血浆， 一 7 0低温 保存。 1 . 2 检测方法血浆 s C D 1 4 含量采用酶联免疫吸 附 试验测定( 上海晶美生物工程有限公司) ， B I O - R A D 5 5 0 型酶标仪( 美国B I O - R A D公司) 比色， 不同 浓度s C D 1 4 标准品做标准曲线。血浆 L P S 含量采用 重组C因子基质显色法测定( 上海伊华生物有限公 司) 。s C D 1 4 / L P S 比值为同病人同份血s C D 1 4 浓度和 L P S 浓度比值。血浆谷丙转氨酶( G P T ) ， 肌肝( C R E ) 采用酶法测定( 北京中生试剂公司) 。动脉血二氧化 碳分压( P a C q) 通过A B L 5 0 型血气分析仪( 丹麦A B L 公司) 测定。 1 . 3 统计学分析各组数据以 x士; 表示， 首先进 行正态分布性检验， 然后用 S P S S 统计软件进行单因 素方差分析 c 检验和相关系数显著性 r 检验。 2 . 3 血浆US 与肝、 肾和肺功能受损指标相关性分 析创伤性 M O D S 患者血浆 L P S 与血 G P T , C R E和 P a C q水平明显正相关， 相关系数分别为0 . 8 6 3 2 , 0 . 7 6 5 4 和0 . 7 5 7 6 ( P0 . 0 1 ， 表3 ) 。 表 3 5 0 例M O D S 患者血装L P S 水平与肝、 肾和肺功能受 损指标相关分析 T a b 3 C o r r e l a t i o n c o e ff i c i e n t b e t w e e n t h e L P S a n d i n d e x o f M O D S i n 5 0 p a t i e n t s I n d e x o f MOD S 0. 8 6 3 2 0 C R E . 7 6 5 4 P a C q 0. 7 5 7 6 2 结果 2 . 1 血浆s C D 1 4 , L P S 及s C D 1 4 / L P S 的变化创伤 性M O D S 各组血浆s C D 1 4 , L P S 均明显高于正常对照 组( P0 . 0 1 ) ， 且创伤 M O D S 死亡组 L P S 明显高于 创伤M O D S 生存组， 但 s C D 1 4 与创伤 M O D S 生存组 没有显著差别。创伤M O D S 生存组s C D 1 4 / L P S 与正 常对照组无显著差异， M O D S 死亡组s C D 1 4 / L P S 明显 低于M O D S 生存组( P0 . 0 1 ， 表 1 ) 0 表 1 创伤失血 M O D S 患者血浆 s C D 1 4 , L P S 及 s C D l 4 / L P S 变化 T a b 1 C h a n g e s o f s C D 1 4 , L P S , a n d s C D 1 4 / L P S i n p l a s m a o f p a t i e n t w i t h t r a u m a t i c M O D S P0. 0 10. 0 10. 0 1 2 . 4 血浆s C D 1 4 / L P S 与肝、 肾和肺功能受损指标相 关性分析创伤性 M O D S 患者血浆 s C D 1 4 / L P S 与血 G P T , C R E和P a C q水平明显负相关， 相关系数分别 为一 0 . 9 1 6 5 ， 一 0 . 8 8 3 2 和一 0 . 7 6 5 3 ( P0 . 0 1 ， 表4 ) 0 表4 5 0 例 M O D S 患者血桨 s C D 1 4 / L P S 水平与肝、 肾和肺 功能受损指标相关分析 T a b 4 C o r r e l a t i o n c o e ff i c i e n t b e t w e e n t h e s C D 1 4 / L P S a n d i n d e x o f M O D S i n 5 0 p a t i e n t s I n d e x o f M O D S A L T C R E P a C q 一0 . 9 1 6 5一0 . 8 8 3 2一0 . 7 6 5 3 s C D 1 4 1 1 巧 n-3027乃 M O D S - s ur v i v a l M O D S - d e a d sC D 1 4 1 ( p g “ m L 一 )L P S ( E U - M L “ ) 2 . 5 8 11 . 4 6 0 . 1 2 1 0 . 0 3 8 . 3 7 1 1 . 5 4 8 0 . 3 2 士 0 . 1 5 8 9 田士 2 . 1 3 8 0 . 6 7 士 0 . 2 2 8 6 2 1 . 2 8 1 1 2 . 2 3 2 6 . 4 2 士 8 . 4 9 1 2 . 5 4 1 1 1 . 6 4 8 a ) P 0 .0 1 , 。 c o n tro l g ro u p ; b ) P 0 . 0 1 , 。M O D S s ur v iv a l g ro u p 2 . 2 血浆s C D 1 4 与肝、 肾和肺功能受损指标相关性 分析 创伤性M O D S 患者血浆s C D 1 4 与血G P T , C R E 和P a C q 水平明显正相关， 相关系数( r ) 分别为 0 . 6 5 4 3 , 0 . 5 6 8 9和 0 . 3 2 1 7 ( P0 . 0 1 或 P0 . 0 5 , 表2 ) 。 表 2 5 0 例 M O D S 患者血浆s C D 1 4 水平与肝、 肾和肺功能 受损指标相关分析 T a b 2 C o r r e l a t i o n c o e ff i c i e n t b e t w e e n t h e p l a s m a s C D 1 4 a n d i n - d e x o f M O D S i n 5 0 p a t i e n t s P0 . 0 10 . 0 10 . 0 1 2 . 5 血浆 s C D 1 4 , L P S和 s C D 1 4 / L P S与肝、 肾和肺 功能受损指标相关系数比较创伤性M O D S 患者血 浆s C D 1 4 与血G P T , C R E和P a C q平均相关系数为 0 . 5 1 5 0 ; L P S 与血G P T , C R E和P a C q平均相关系数 为0 . 7 9 5 4 ; s C D 1 4 / L P S 与血G P T , C R E和P a C q平均 相关系数为0 . 8 5 5 0 。与肝、 肾和肺功能受损指标平 均相关系数由大到小依次为 s C D 1 4 / L P S , L P S和 s C D 1 4 o s C D 1 4与 M O D S 指标平均相关系数最小， s C D 1 4 / L P S 最大。 3 讨论 创伤后创面和内源性感染是导致创伤内毒 素( L P S ) 血症的重要原因。我们研究表明， 创伤 M O D S 各组 L P S 含量明显升高， 且死亡组大于生存 组， 说明严重创伤感染造成的内毒素血症， 在M O D S 发生、 发展中起重要作用。膜白细胞分化抗原 1 4 ( m C D 1 4 ) 是L P S 的主要受体3 ， 从结构上分为胞外 区， 跨膜区和胞内区三个结构域。L P s 通过结合靶 细胞m C D 1 4 的胞外区片段， 启动其信号传导， 发挥 其病理生理功能。s C D 1 4 为M , 4 8 0 0 的游离糖蛋 I n d e x o f MOD SAL T . 6 5 4 3 C R E 0. 5 6 8 9 P a C O Z 0. 3 2 1 7 P0 . 0 10 . 0 10. 0 5 白， 被认为是 m C D 1 4 胞外区片段， 虽然能与 L P S 结 合， 但不能介导“ 5 信号传导。 s C D 1 4 可能通过与 ( 下转第8 1 页) 第 1 期卢小玲， 等生物素化的H L A - A * 2 4 0 2 一 抗原肤复合物的制备 8 1 2 3 的体外折叠与生物素化 J . 细胞与分子免疫学杂志， 2 0 0 4 , 2 0 ( 3 ) : 2 6 5 一 2 6 8 . 8 宋云扬， 刘娟， 应天翼， 等. 夹心免疫P C R 方法检测 蓖麻毒素 J 免疫学杂志， 2 0 0 2 , 1 8 ( 3 ) : 2 2 9 一 2 3 1 . 9 刘北一， 李一 三种检测噬菌体阳 性克隆的E L I S A比 较 J . 免疫学杂志， 1 9 9 8 , 1 4 ( 1 ) : 5 4 一 5 5 . 1 0 P a r k e r K C , S il v e r M L , W i le y D C . A n H L A - A 2 / (3 z m i c r o g lo- b u l i n / p e p t i d e c o m p l e x a s s e m b l e d f ro m s u b u n i t s e x p r e s s e d s e p - a r a t e ly i n E . c o l i J . M o l I m m u n o l ， 1 9 9 2 , 2 9 ( 3 ) : 3 7 1 3 7 8. 4 V i ra l , 2 0 0 3 ， 7 0 ( 1 ) : 5 1 一 6 1 . K u z u s h im a K , H a y a s h i N , K u d o h A , e t a l . T e t r a m e r - a s s i s - te d id e n t if ic a ti o n a n d c h a r a c t e r iz a t io n o f e p it o p e s re c o g n iz e d 场H L A A 2 4 0 2 - re s tr ic te d E p s t e in - B a r r v i r u s - s p e c if ic C D 8 T c e ll s 汇 J . B l o o d , 2 0 0 3 , 1 0 1 ( 4 ) : 1 4 6 1) 一1 4 6 8 . T h a m E L , J e n s e n P L , M e s c h e r M F . A c t i v a t i o n o f a n t i g e n - s p e c i f i c T c e l l s 场a rt i f i c i a l c e ll c o n s t r u c t s h a v i n g i m m o b i l i z e d m u l t i m e r i c p e p t i d e - c l a s s I c o m p l e x e s a n d r e c o m b i n a n t B 7 - F c p ro te in s J . J I m m u n o l M e t h o d s , 2 0 0 1 ， 2 4 9 ( 1 / 2 ) : 1 1 1 - 1 1 9. M a z i a r z R T , F r a s e r J , S t ro m i n g e r J L , e t a l . T h e h u m a n H L A - s p e c i f i c m o n o c l o n a l a n t i b o c 卜W6 / 3 2 r e c o g n i z e s a d i s c o n - 【 1 1 S c h a tz P J . U s e o f p e p t id e l i b r a r ie s to m a p t h e s u b s tr a te s p e c i - t i n u o u s e p i t o p e w i t h i n t h e a l p h a 2 d o m a i n o f m a r i n e H - 2 D b J . Im m u n o g e n e t i c s , 1 9 8 6 , 2 4 ( 3 ) : 2 0 6 一 2 0 8 . 5 1 N I H T e t r a m e r F a c ili ty . R e c o m m e n d a t io n s f o r s o l u b le M H C / p e p t i d e te t r a m e r u s e . E B / O L ( 2 0 0 4 - 0 2 - 0 2 ) 2 0 0 4 - 0 2 - 0 4 . h t t p : / / w w w . n i a i d . n i h . g o o / re p o s i t/ t e t r a m e r / p ro t o c o l . h t m l . 6 O ' c a l l a g h a n C A , B y f o r d M F , W y e r J R , e t a l · B i r A e n z y m e : p r o d u c t i o n a n d a p p li c a t i o n i n t h e s t u d y o f m e m b r a n e re c e p t o r - li g a n d i n te r a c t i o n s b y s it e - s p e c i f ic b i o t i n y l a t io n【 J . A n a l B i o c h e m , 1 9 9 9 , 2 6 6 ( 1 ) : 9 一1 5 . 7 翁秀芳， 陈浩， 吴雄文， 等. 可溶性 H L A - A 2 - 肤复合物 fi c i ty o f a p e p t id e - m o d i fy in g p e p t i d e s p e c i fi e s b i o t i n y l a t io n e n z y m e : a 1 3 r e s i d u e n o l o g y ( N Y ) ， 1 9 9 3 , 1 1 ( 1 0 ) : 1 E s c h e r ic h ia c o l i 仁 J 1 3 8一1 1 4 3 . cons ens us B i o t e c h - 1 2 S u g a y a N , K im u r a H , H a r a S , e t a l 灭) u a n t it a t i v e a n a ly s is o f e p s t e i n - b a r r v ir u s( E B V ) - s p e c if i c C D 8 十 w it h c h r o n ic a c t iv e E B V in fe c t io n J . T c e ll s i n p a t i e n t s J I n f e c t D i s , 2 0 0 4 , 1 9 0 ( 5 ): 9 8 5 一 9 8 8 . 【 1 3 W i ls o n J D , O g g G S , A ll e n R L , e t a l . H I V - 1 - s p e c i f i c c y t o t o x i c T l y m p h o c y t e s t i o n J . A I D S , 2 0 0 0 , 1 4 ( 3 ): 2 2 5 - D i r e c t v i s u a l i z a t i o n o f d u r i n g p r i m a ry i n f e c - 2 3 3. ( 编辑罗承丽) 门IJ气esesJ 411 resesLLesesL ( 上接第7 7 页) 靶细胞m C D 1 4 竞争结合L P S 或内毒素与内毒素结 合 蛋白 复 合物( L P S - L B P ) ， 抑制L P S 致病作用5 1 ， 也 可能通过与L P S 结合， 形成 s C D 1 4 - L P S 复合物， 延长 L P S 半衰期， 加重和扩大L P S 的致病作用， 并可作为 创伤感染严重程度的预警指标6 0 本组研究发现， 创伤M O D S 各组血浆s C D 1 4 浓 度均明显升高， 这与其它报道相一致川。我们进一 步发现， 尽管创伤M O D S 各组血s C D 1 4 明显升高， 但 s C D 1 4 / L P S 却明显下降且死亡组低于生存组， 说明创 伤M O D S 死亡患者尽管血 s C D 1 4 升高， 但相对 L P S 升高幅度呈下降趋势。本组结果提示血s C D 1 4 相对 于L P S 不足可能是 M O D S 患者死亡的重要原因， 支 持s C D 1 4 升高可能是避免L l、对机体造成过度损伤 的一种反馈保护机制的观点。 本组结果还表明， 尽管 s C D 1 4 和 L P S 均与创伤 M O D S 肝、 肾和肺等器官受损程度明显正相关， 但 s C D 1 4 / L P S 与创伤M O D S 肝、 肾和肺等器官受损程度 明显负相关。s C D 1 4 / L P S 与多种器官受损程度指标 平均相关系数绝对值大于单独s C D 1 4 ， 提示s C D 1 4 / L P S 变化可作为判断创伤M O D S 严重程度的较特异 预警指标， s C D 1 4 / L P S 比 值下降提示创伤M O D S 预后 不良。创伤M O D S 尤其是感染患者血浆s C D 1 4 ， 可能 来源于m C D 1 4 被水解的胞外区片段， 也可能由免疫 细胞C D 1 4 基因转录合成s C D 1 4 蛋白， 直接分泌人血 所 致e 1 o s C D 1 4 作为体内天然存在的L P S 拮抗剂， 可能作为治疗 L P S 介导的 M O D S 有效药物， 其有待 进一步研究。 参考文献 汇 1 2 3 6 7 8 盛志勇， 姚咏明， 林洪远. 全身炎症反应和多器官功能 障碍综合征认识的变迁及现状 J . 解放军医学杂志， 2 0 0 2 , 2 7 ( 2 ) : 9 8 一1 0 0 . B u r g m a r m H , Wi n k l e r S , L o c k e r G J , e t a l . I n c re a s e d s e r u m c o n c e n t r a t io n o f s o l u b l e C D 1 4 i s a p r o g n o s t i c m a r k e r i n g r a m - p o s i t iv e s e p s i s J C li n i c I m m u n o l I m m u n o p a t h o l , 1 9 9 6 , 8 0 ( 3 P t 1 ) : 3 0 7 一 3 1 0 . 张道杰， 蒋建新， 陈永华， 等. 人正常肠上皮细胞内毒 素信号转导相关受体 m R N A的表达 J 。 免疫学杂志， 2 0 0 3 , 1 9 ( 3 ) : 1 9 0 一1 9 7 . 万志红， 陆松敏.内毒素受体及其信号传导研究进 展 J . 国外医学分子生物学分册， 2 0 0 1 , 2 3 : 1 6 0 一 1 6 1 . H a z i o t A , R o n g G W, L i n X Y , e t 以 R e c o m b i n a n t s o l u b l e C D 1 4 p r e v e n t s m o rt a l i t y i n m i c e t r e a t e d w i t h e n d o t o x i n J . J I m m u n o l , 1 9 9 5 ， 1 5 4( 1 2 ) : 6 5 2 9 一 6 5 3 2 姚咏明， 于燕， 吴叶， 等. 烧伤后多器官功能障碍 综合症患者可溶性脂多糖受体 C D 1 4 的变化 J . 中华 外科杂志， 1 9 9 8 , 3 6 ( 1 1 ) : 6 6 8 一 6 7 1 . C a r r i ll o E H , G o r d o n L , G o o d e E , e t a l . 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