迈瑞BriCyteE6流式细胞仪介绍.pptx
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1、 2010 Mindray Confidentialn 1n 2025/7/11 2010 Mindray ConfidentialBriCyte E6BriCyte E6流式细胞仪流式细胞仪 2010 Mindray Confidentialn 2n 2025/7/11流式细胞仪基础知识流式细胞仪基础知识目录目录竞争产品介绍竞争产品介绍流式细胞术应用流式细胞术应用迈瑞流式细胞仪迈瑞流式细胞仪BriCyte E6BriCyte E6介绍介绍 2010 Mindray Confidentialn 3n 2025/7/11 2010 Mindray Confidential流式细胞仪基础知识流式细
2、胞仪基础知识 2010 Mindray Confidentialn 4n 2025/7/11流式细胞仪的定义流式细胞仪的定义流式细胞仪流式细胞仪(flow cytometer):是一种集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的高科技仪器。可对单个生物颗粒在流动状态进行分子功能水平上的定量定性分析。研究对象:生物颗粒;检测信号:光信号(散射光,荧光);分析特点:快速,特异,准确,客观,多参数;2010 Mindray Confidentialn 5n 2025/7/11流式细胞仪基本构造流式细胞仪基本构造液流系统光学系统电子系统数据分析系统 2
3、010 Mindray Confidentialn 6n 2025/7/11流式细胞仪分析流程流式细胞仪分析流程流式细胞仪检测流式细胞仪检测单个细胞悬液制备单个细胞悬液制备样本细胞荧光标记样本细胞荧光标记数据分析处理数据分析处理1 12 23 34 4 2010 Mindray Confidentialn 7n 2025/7/11FL4FL6FL5(PE-cy7)FL3(PerCP)FL2(PE)FL1(FITC)SS488/10530/30FS488/10585/40785/60670LP491/LP550LP645LP660/20785/60740LP488/10反光镜tvFL6(APC-
4、cy7)FL4(APC)反光镜tvtvtvtvtvtvtvFSCSSCFL1FL2FL3FL5流式细胞仪工作原理 2010 Mindray Confidentialn 8n 2025/7/11常用常用的激光器和的激光器和标记标记单克隆抗体的荧光素单克隆抗体的荧光素488nm激光激发:FITC(异硫氰酸荧光素):荧光强度可受pH的影响,当pH降低时其荧光强度也随之减弱PE(藻红蛋白)PerCP(多甲藻叶绿素蛋白):光量子产量并不太高,最好应用在检测表达较高的抗原上PerCP-Cy5.5(叶绿素蛋白偶联物)PE-Cy7(藻红蛋白偶联物)PE-Cy5(藻红蛋白偶联物)PE-Texas Red(藻红蛋
5、白-德州红偶联物)638nm激光激发:APC(别藻青蛋白)APC-Cy7(别藻青蛋白偶联物)2010 Mindray Confidentialn 9n 2025/7/11荧光素的选择荧光素的选择 2010 Mindray Confidentialn 10n 2025/7/11FITC530/30PE585/40荧光补偿+FITC通道信号=PE通道信号=实测实测真实真实 由于每一种荧光素分子都发射某一特定波长范围内的光,然而这些荧光的发射光谱会发生部分重叠,有时这种重叠现象非常显著。为了能够在存在荧光泄露的情况下,得到真实的多色荧光发射信号,在流式细胞仪中采用了称之为颜色补偿的方法,通过测得信号
6、经修正得到真实信号加以使用。2010 Mindray Confidentialn 11n 2025/7/11数据分析-图形类型直方图直方图数据显示数据显示散点图散点图等高线图等高线图密度图密度图三维图三维图 2010 Mindray Confidentialn 12n 2025/7/11散射光双参数散点图 2010 Mindray Confidentialn 13n 2025/7/11荧光双参数散点图荧光双参数散点图 2010 Mindray Confidentialn 14n 2025/7/11流式细胞仪与几种检验仪器的比较流式细胞仪与几种检验仪器的比较项目项目流式细胞仪流式细胞仪血球仪血球
7、仪生化分析仪生化分析仪免疫分析仪免疫分析仪测试对象细胞细胞(测量设置全部固定化)血清血清测试目标物理或化学性质(如细胞大小、内部复杂程度、DNA含量);小分子物质(如抗原,抗体)物理或化学性质(如细胞大小、内部复杂程度、DNA含量)化学成分和一些小分子物质(如钾、钠、钙、酶)小分子物质(如抗原、抗体、激素)测试原理流式细胞术+抗原抗体反应流式细胞术化学比色法抗原抗体反应计量百分比或绝对计数(如%、*个/uL);物质的量或定性判定(L、UI/L、阴性、阳pmol/m性)百分比和绝对计数(如%、*个/L)物质的量(mol/L)物质的量或定性判定(L、UI/L、阴性、阳pmol/m性)宏观和微观测量
8、宏观对象(细胞)上的微观物质(抗原、看不见、摸不到)测定宏观对象(细胞)上的宏观物质(物理、复杂度、含量,看得见、摸得到)测量微观物质(可溶性成分和一些小分子物质,看不见、摸不到)测量微观物质(小分子物质,看不见、摸不到)输出 2010 Mindray Confidentialn 15n 2025/7/11 2010 Mindray Confidential流式细胞术应用流式细胞术应用 2010 Mindray Confidentialn 16n 2025/7/11临床研究临床研究血液,肿瘤,血液,肿瘤,药理,免疫药理,免疫生物学研究生物学研究遗传,生殖,遗传,生殖,微生物,细胞微生物,细胞生
9、物,毒理,生物,毒理,分子生物分子生物农业畜牧业选种,育种环境研究环境研究湖泊,海洋湖泊,海洋生态研究生态研究食品制药工业食品制药工业食品检测、药物筛食品检测、药物筛选,疫苗研究选,疫苗研究流式细胞仪的应用 2010 Mindray Confidentialn 17n 2025/7/11主要科室主要科室:检验科、中心实验室、血液科、肿瘤科、病理科、肾病研究、免疫中心、国内三甲医院中流式细胞仪分布图(2012年)112,41%64,24%26,10%3,1%11,4%9,3%4,1%4,1%3,1%2,1%2,1%3,1%3,1%2,1%3,1%2,1%2,1%15,6%检验科中心实验室血液科血
10、液病研究所肿瘤科分子生物中心病理科感染科肾病实验室肝病研究所肺病研究所肾病研究所免疫中心内科外科放射科皮肤科其他流式细胞仪的临床应用 2010 Mindray Confidentialn 18n 2025/7/11主要项目:主要项目:淋巴细胞亚群分析HLA-B27检测白血病免疫分型 急性白血病、慢性淋巴增生性疾病(CLD)/淋巴瘤造血干细胞分析 造血干细胞相对计数;造血干细胞绝对计数;阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)诊断 CD55/CD59检测血小板相关分析 血小板计数、血小板免疫表型分析细胞周期与DNA倍体分析流式细胞仪的临床应用 2010 Mindray Confidentialn 19
11、n 2025/7/11淋巴细胞根据功能分类淋巴细胞根据功能分类淋巴细胞种类特异性分子标记T淋巴细胞淋巴细胞CD3+B淋巴细胞淋巴细胞CD3-CD19+NK淋巴细胞淋巴细胞CD3-CD16+CD56+T淋巴细胞根据表面分子分类淋巴细胞根据表面分子分类淋巴细胞种类特异性分子标记T辅助辅助/诱导淋巴细胞诱导淋巴细胞CD3+CD4+T抑制抑制/细胞毒淋巴细胞细胞毒淋巴细胞CD3+CD8+淋巴细胞亚群分析 2010 Mindray Confidentialn 20n 2025/7/11淋巴细胞亚群分析的临床应用淋巴细胞亚群分析可以了解机体在不同条件下的淋巴细胞亚群分析可以了解机体在不同条件下的免疫免疫功
12、能状态功能状态,主要包括细胞免疫功能和体液免疫功能。在临床上,主要包括细胞免疫功能和体液免疫功能。在临床上,主要用于对免疫系统造成明显干扰的相关主要用于对免疫系统造成明显干扰的相关疾病的疾病的辅助诊断,分辅助诊断,分析疾病的发病机理,析疾病的发病机理,监控监控疾病的疾病的病程病程进展,进展,观测疗效观测疗效及及监测预监测预后后等等。等等。2010 Mindray Confidentialn 21n 2025/7/11淋巴细胞亚群分析在肿瘤内科中的应用临床意义临床意义CD3+CD3+CD4+CD3+CD8+CD4+/CD8+B细胞细胞NK细胞细胞肿瘤进展预后不良复发转移有效手术有效化疗 2010
13、 Mindray Confidentialn 22n 2025/7/11临床意义临床意义CD3+CD3+CD4+CD3+CD8+CD4+/CD8+B细胞细胞NK细胞细胞SLE类风湿性关节炎自身免疫性溶血性贫血重症肌无力免疫缺陷病淋巴细胞亚群分析在风湿免疫科中的应用 2010 Mindray Confidentialn 23n 2025/7/11急性排斥反应是器官移植的第一大障碍;急性排斥反应是器官移植的第一大障碍;动态观测受者淋巴细胞亚群变化特点,对判断急性排斥反应和估计移植后感染等预后具有重要意义;当CD4+/CD8+比值持续升高且大于1.2时应当考虑排斥发生;当CD4+/CD8+比值持续降
14、低表明移植后出现感染;若CD4+/CD8+比值小于0.2时,应立即停用免疫抑制剂;淋巴细胞亚群分析在器官移植中的应用 2010 Mindray Confidentialn 24n 2025/7/11常见疾病的淋巴细胞亚群变化细胞亚群细胞亚群变化变化常见疾病常见疾病CD3+T细胞增高T系淋巴细胞白血病、SLE、重症肌无力、慢性活动性肝炎;降低恶性肿瘤晚期、B系细胞白血病、多发性骨髓瘤,传染性单核细胞增多症、免疫缺陷病;CD3+CD4+T细胞增高类风湿(活动期)、自身溶血性贫血;降低AIDS、肿瘤晚期、巨细胞病毒感染、麻风、血小板减少;CD3+CD8+T细胞增高病毒感染(HBV、EB)、肿瘤、传染
15、性单核细胞增多症;降低类风湿、重症肌无力、免疫缺陷病、肿瘤放射治疗;(CD3+CD4+)/(CD3+CD8+)比值增高类风湿、重症肌无力、SLE、自身溶血性贫血;降低AIDS、传染性单核细胞增多症、病毒感染、肿瘤;B细胞增高MM、巨球蛋白血症、淋巴瘤、AIDS;降低先天性免疫缺陷病、恶性肿瘤;NK细胞增高病毒感染早期、骨髓移植术后、习惯性流产;降低恶性肿瘤、部分病毒细菌和真菌感染;2010 Mindray Confidentialn 25n 2025/7/11HLA-B27检测与强直性脊柱炎诊断强直性脊柱炎(强直性脊柱炎(AS)定义:)定义:一种慢性、进行性和炎性疾病,主要累计骶髂关节、脊柱、
16、脊柱软组一种慢性、进行性和炎性疾病,主要累计骶髂关节、脊柱、脊柱软组织及四肢关节,表现为椎间盘纤维环和纤维环结缔组织的骨化,椎间动关节织及四肢关节,表现为椎间盘纤维环和纤维环结缔组织的骨化,椎间动关节和四肢关节滑膜的炎症和增生,严重者可失去劳动能力。和四肢关节滑膜的炎症和增生,严重者可失去劳动能力。淋巴细胞淋巴细胞HLA-B27检测在检测在AS中的诊断价值:中的诊断价值:许多研究证据表明人群中许多研究证据表明人群中HLA-B27的表达频率与的表达频率与AS的发病率高度相关;的发病率高度相关;AS患者中患者中HLA-B27的阳性率显著高于普通人群,高达的阳性率显著高于普通人群,高达90%以上,而
17、普通人以上,而普通人群群HLA-B27的阳性率低于的阳性率低于10%,HLA-B27阴性的普通人群未患阴性的普通人群未患AS的几率的几率为为99.9%;HLA-B27检测阳性可显著增加正确诊断检测阳性可显著增加正确诊断AS的几率,的几率,阴性则为排除阴性则为排除AS的诊的诊断提供了有力的证据断提供了有力的证据;2010 Mindray Confidentialn 26n 2025/7/11TBNK四色试剂盒简单准确的淋巴细胞亚群的分型方简单准确的淋巴细胞亚群的分型方案案双管四色双管四色;无需仪器设置,信号采集、分析与无需仪器设置,信号采集、分析与报告一键式解决方案报告一键式解决方案全自动全自动
18、TBNKTBNK四色试剂盒配套分析软件四色试剂盒配套分析软件;检测结果准确可靠,阳性细胞峰荧检测结果准确可靠,阳性细胞峰荧光强度高,阴阳性细胞群分离度好光强度高,阴阳性细胞群分离度好试剂分析性能优于同类主流产试剂分析性能优于同类主流产品;品;2010 Mindray Confidentialn 27n 2025/7/11HLA-B27检测双色试剂有效排除有效排除HLA-B7HLA-B7和非特异性吸和非特异性吸附带来的假阳性并且准确识别附带来的假阳性并且准确识别HLA-B27/HLA-B7HLA-B27/HLA-B7双阳性样本双阳性样本HLA-B27/HLA-B7HLA-B27/HLA-B7双抗
19、原与同双抗原与同型对照双管分析设计型对照双管分析设计;无需仪器设置,信号采集、分无需仪器设置,信号采集、分析与报告一键式解决方案析与报告一键式解决方案全自动全自动HLA-B27HLA-B27检测双色试剂检测双色试剂配套分析软件配套分析软件;2010 Mindray Confidentialn 28n 2025/7/11 2010 Mindray Confidential迈瑞流式细胞仪迈瑞流式细胞仪Bricyte E6Bricyte E6介绍介绍 2010 Mindray Confidentialn 29n 2025/7/11全中文操作界面全中文操作界面BriCyte E6 BriCyte E6
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