微生物培养 (2).ppt
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1、 考点考点1 1 微生物的应用微生物的应用1.方法:方法:平板划线法平板划线法和和稀释涂布平板法稀释涂布平板法2.原理:在培养基上将原理:在培养基上将细菌稀释细菌稀释(稀释涂布平板法稀释涂布平板法)或或分散分散(平板划线法平板划线法)成单个成单个 细胞细胞,使其成长成单个菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。,使其成长成单个菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。【稀释涂布平板法中培养皿中菌落的数目就代表稀释相应倍数后的菌稀释涂布平板法中培养皿中菌落的数目就代表稀释相应倍数后的菌 体个体数,所以稀释涂布平板法可以用来计数,但平板划线法不行体个体数,所以稀释涂布平板法可以用来计数,但平板划线法不行
2、】3.注意事项:灼烧接种环后要冷却注意事项:灼烧接种环后要冷却;接着上次划线的末端划线接着上次划线的末端划线;不要将最后一区的划线与第一区相连不要将最后一区的划线与第一区相连;涂布平板时,涂布器应用涂布平板时,涂布器应用70%的酒精消毒。的酒精消毒。4.平板划线法中平板划线法中每次灼烧接种环的目的每次灼烧接种环的目的:第一次灼烧:避免接种环上可能存在的微生物污染培养基第一次灼烧:避免接种环上可能存在的微生物污染培养基每次划线前灼烧:杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使每次划线的每次划线前灼烧:杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使每次划线的 菌种均来自菌种均来自上次划线的末端上次划线的末
3、端。划线结束灼烧:划线结束灼烧:杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。微生物的分离平板划线操作平板划线操作 【问题1】在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端 开始划线?答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末 端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由 单个细菌繁殖而来的菌落。【问题2】平板冷凝后,为什么要将平板倒置?答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖 上的水珠
4、落入培养基,造成污染。1、关于病毒增殖的叙述中,正确的是()A病毒侵入宿主细胞后,合成一种蛋白质 B病毒的繁殖只在宿主的活细胞中进行C病毒的繁殖以核衣壳为单位 D在普通的培养基上能培养病毒【解析】解答此题需从以下几方面入手分析:首先,病毒是营寄生方式生活,必须生活在活的细胞内,不能独立生活,所以在普通的培养基上不能生活。第二,繁殖时,病毒的核酸进入宿主细胞,利用宿生的成分合成子代个体,除了核衣壳,还应包括该病毒的其他结构。合成的蛋白质不只是一种,应该是多种,包括多种结构蛋白质及物质合成时所需的多种酶。【答案】B培养基的种类培养基的种类2、要从多种细菌中分离某种细菌,培养基要用()A加入青霉素的
5、培养基 B加入高浓度食盐的培养基 C固体培养基 D液体培养基【解析】微生物的分离需使用固体培养基,由于某种细菌的种类不明,所以难以使用选择培养基,如加入青霉素的培养基可以分离到酵母菌和霉菌,加入高浓度食盐的培养基可以分离到金黄色葡萄球菌。【答案】C 果胶酶在果汁生产中的作用 探讨加酶洗衣粉的洗涤效果 酵母细胞的固定化 一、果胶酶半乳糖醛酸1作用:能够分解果胶成为可溶性的_,使浑浊的果汁变得澄清。2组成果胶果胶分解酶(1)并不特指某一种酶,而是分解_的一类酶总称。(2)包 括 多 聚 半 乳 糖 醛 酸 酶、_ 和 _。果胶酯酶3来源霉菌酵母菌细菌植物、_、_和_均能产生果胶酶。4应用细胞壁胞间
6、层果胶酶能够分解果胶,瓦解植物的_及_,使榨取的果汁变得更容易_ 和_。过滤澄清二、加酶洗衣粉蛋白酶脂肪酶淀粉酶1 常 用 种 类:_、_、_ 和 _,其中应用最广泛、效果最明显的是碱性_蛋白酶脂肪酶和碱性_。2去污机制蛋白质(1)碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子_水解成可溶性的_或小分子肽,使污物从衣物上脱落。纤维素酶氨基酸(2)脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能将大分子_、21_和22_水解为小分子物质。淀粉纤维素3.酶制剂特点:能够耐酸、耐碱、忍受23_和较高24_,并且通过特殊的化学物质将酶层层包裹,与洗衣粉的其他成分隔离。表面活性剂温度脂肪探究果胶酶的用量探究果胶酶的用量1实验原理实
7、验原理果胶在果胶酶的催化下形成果胶在果胶酶的催化下形成半乳糖醛酸半乳糖醛酸。(可用于植物体细可用于植物体细胞杂交,也可使榨取果汁更容易且使果汁澄清胞杂交,也可使榨取果汁更容易且使果汁澄清)(1)准确称取纯果胶酶准确称取纯果胶酶 1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg,配制成,配制成相等体积相等体积的酶的水溶液,取等量放入的酶的水溶液,取等量放入 9 支试管中,支试管中,依次编号为依次编号为 19 号号【也可只配制一个浓度的酶液,只是使用体积也可只配制一个浓度的酶液,只是使用体积(量量)不同不同】。制取苹果泥并称。制取苹果泥并称 45g 苹果泥,分装入苹果泥,分装
8、入 9 支试管中,每支支试管中,每支试管中装试管中装 5g,依次编号为,依次编号为 19 号。号。(2)将上述试管放入将上述试管放入 37的恒温水浴中平衡内外温度。的恒温水浴中平衡内外温度。(3)一段时间后将不同浓度的果胶酶分别迅速与各试管的苹果泥混一段时间后将不同浓度的果胶酶分别迅速与各试管的苹果泥混合,然后再放入恒温水浴中,约合,然后再放入恒温水浴中,约 20min。(4)过滤后测量记录果汁体积。过滤后测量记录果汁体积。(5)实验结果分析说明实验结果分析说明实验中所用的果胶酶尽量使用其纯酶制剂或不含抑制物实验中所用的果胶酶尽量使用其纯酶制剂或不含抑制物的粗酶制剂,以免影响对酶用量的估算。的
9、粗酶制剂,以免影响对酶用量的估算。如果随着酶浓度的增加,过滤到的果汁的体积也增加,如果随着酶浓度的增加,过滤到的果汁的体积也增加,说明酶的用量不足;当酶的浓度增加到某个值后,再增加酶的说明酶的用量不足;当酶的浓度增加到某个值后,再增加酶的用量,过滤到的果汁的体积不再改变,说明酶的用量已经足够,用量,过滤到的果汁的体积不再改变,说明酶的用量已经足够,这个值就是酶的最适用量。这个值就是酶的最适用量。【突破题突破题 1】在用果胶酶处理果泥时,为了使果胶酶能够充分地在用果胶酶处理果泥时,为了使果胶酶能够充分地催化反应,应采取的措施是催化反应,应采取的措施是()A加大苹果泥用量加大苹果泥用量B.加大果胶
10、酶用量加大果胶酶用量C进一步提高温度进一步提高温度D用玻璃棒不时地搅拌反应混合物用玻璃棒不时地搅拌反应混合物【解题指导解题指导】搅拌可以使酶与底物充分接触而提高反应效搅拌可以使酶与底物充分接触而提高反应效率,使反应更充分。率,使反应更充分。【答案答案】D酶活力测定及不同加酶洗衣粉洗涤效果的实验酶活力测定及不同加酶洗衣粉洗涤效果的实验1酶的简单制作方法酶的简单制作方法(1)对于细胞内的酶:用捣碎机、研磨器等机械将生物组织对于细胞内的酶:用捣碎机、研磨器等机械将生物组织细胞破碎,使酶从活细胞中释放出来,进入细胞外的溶液中,细胞破碎,使酶从活细胞中释放出来,进入细胞外的溶液中,经过滤、离心制备成粗酶
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