比色法测定亚硝酸盐含量.ppt

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1、比色法测定物质的含量比色法测定物质的含量原理：在相同条件下，配制标原理：在相同条件下，配制标准溶液和待测样品溶液的有色准溶液和待测样品溶液的有色溶液，将两者的颜色进行比较，溶液，将两者的颜色进行比较，用目测法求出待测样品溶液的用目测法求出待测样品溶液的浓度。浓度。案例案例1 1 食品中食品中NONO3 3-和和NONO2 2-含量的测定含量的测定原理：原理：对氨基苯磺酸对氨基苯磺酸 +2H+2H+NO+NO2 2-重氮化合物重氮化合物 +2H+2H2 2O O-萘胺萘胺 +重氮化合物重氮化合物 对对-苯磺酸苯磺酸-偶氮偶氮-萘胺（紫萘胺（紫红色化合物）红色化合物）反应条件：反应条件：酸性条件下

2、磺胺与酸性条件下，磺胺与NONO2 2-作用形成重氮作用形成重氮化合物，酸度大，重氮化作用速度加快。化合物，酸度大，重氮化作用速度加快。实验中所有的反应需要在相同的外界条实验中所有的反应需要在相同的外界条件下进行件下进行反应特点：非常灵敏，可测定反应特点：非常灵敏，可测定0.5 0.5 g/mLg/mL浓度的浓度的NONO2 2-实验过程：实验过程：1 1标准浓度的标准浓度的NaNONaNO2 2配制配制（1 1）0.1 g0.1 g溶解于蒸馏水中，定容至溶解于蒸馏水中，定容至500mL500mL，NaNONaNO2 2浓度为浓度为200mg/L200mg/L（NaNONaNO2 2浓度浓度

3、200g/mL=200g/mL）（2 2）取（）取（1 1）溶液）溶液5mL5mL用水稀释，定容至用水稀释，定容至200mL200mL（即稀释了（即稀释了4040倍），此时倍），此时NaNONaNO2 2浓度为浓度为5 5 mg/Lmg/L（NaNONaNO2 2浓度浓度=5 g/mL=5 g/mL）2 2反应试剂的配制反应试剂的配制（1 1）HClHCl：取：取20 mL20 mL浓盐酸用蒸馏水水稀释成浓盐酸用蒸馏水水稀释成100mL100mL；（2 2）对氨基苯磺酸：）对氨基苯磺酸：4mg/mL4mg/mL，称取，称取0.4g0.4g对氨基苯磺酸溶于（对氨基苯磺酸溶于（1 1）中。）中。

4、3 3）-萘胺：萘胺：2mg/mL2mg/mL，0.2g0.2g溶解于溶解于100mL100mL（1 1）中。）中。注意：注意：HClHCl在这个实验中的作用是制造一种酸性环境，上面的浓度在这个实验中的作用是制造一种酸性环境，上面的浓度足够了。作为反应物质的对氨基苯磺酸和足够了。作为反应物质的对氨基苯磺酸和-萘胺也是过量的。实萘胺也是过量的。实验过程中，只要每次重复时这些药品的浓度稳定，实验结果就会比验过程中，只要每次重复时这些药品的浓度稳定，实验结果就会比较一致。因此，如果要采用这个实验做一些探究性活动，需要大量较一致。因此，如果要采用这个实验做一些探究性活动，需要大量使用、实验需要重复多

5、次的、在短时期就可以完成的，可将这几种使用、实验需要重复多次的、在短时期就可以完成的，可将这几种药品多配制一些，放入冰箱，以免多次配制导致结果不稳定。药品多配制一些，放入冰箱，以免多次配制导致结果不稳定。磺胺有强烈的氧化作用，其溶液不要与铁制品接触，最好采用玻璃磺胺有强烈的氧化作用，其溶液不要与铁制品接触，最好采用玻璃制品；溶解时需加热。闭光保存。制品；溶解时需加热。闭光保存。-萘胺有毒，溶解时需要加热。闭光保存。萘胺有毒，溶解时需要加热。闭光保存。3 3标准色阶的制备标准色阶的制备表表1 NaNO21 NaNO2含量测定的标准色阶的制备表含量测定的标准色阶的制备表编编号号蒸馏水蒸馏水（mL）

6、NaNO2（mL）对氨基苯磺对氨基苯磺酸（酸（mL）-萘胺萘胺（mL）NaNO2的最终的最终含量（含量（g）17.00.0210.026.90.1210.536.80.2211.046.60.4212.056.40.6213.066.20.8214.076.01.0215.085.81.2216.095.61.4217.0105.41.6218.0115.21.8219.0制备标准色阶时，各反应溶液的总量一定要制备标准色阶时，各反应溶液的总量一定要保持一致，反应各部分要准确加入。如果颜保持一致，反应各部分要准确加入。如果颜色太深，各色阶间没有差别，无法比较，可色太深，各色阶间没有差别，无法比较

7、可等反应稳定后，加水稀释后再进行比较。但等反应稳定后，加水稀释后再进行比较。但是一定要记录稀释的倍数，以便后面的计算。是一定要记录稀释的倍数，以便后面的计算。4材料中材料中NaNO2的提取的提取提取剂：称取提取剂：称取50g氯化镉和氯化镉和50g氯化钡溶于氯化钡溶于1000ml的蒸馏水中，用浓盐酸调节的蒸馏水中，用浓盐酸调节pH至至1。提取剂的作。提取剂的作用为提取泡菜汁中的杂质，以利比色；用为提取泡菜汁中的杂质，以利比色；氢氧化铝乳液：进一步吸附泡菜汁中的杂质；方法：氢氧化铝乳液：进一步吸附泡菜汁中的杂质；方法：称取称取125g硫酸铝钾硫酸铝钾KAl(SO4)2.12H2O或硫酸铝铵或硫酸

8、铝铵NH4Al(SO4)2.12H2O溶于溶于1000mL纯水中。加热至纯水中。加热至60oc，缓缓加入，缓缓加入55mL氨水氨水(20=0.88g/mL)。使氢。使氢氧化铝沉淀完全。充分搅拌后静置，弃取上清液。氧化铝沉淀完全。充分搅拌后静置，弃取上清液。用纯水反复洗涤沉淀，至倾出上清液中不含氯离子用纯水反复洗涤沉淀，至倾出上清液中不含氯离子（用硝酸银溶液试验）。然后加入（用硝酸银溶液试验）。然后加入300mL纯水成悬纯水成悬浮液，适应前振摇均匀。浮液，适应前振摇均匀。2.5mol/L的氢氧化钠溶液：使其与泡菜汁中的部分的氢氧化钠溶液：使其与泡菜汁中的部分物质形成沉淀。物质形成沉淀。材料粉碎材

9、料粉碎0.2 kg0.2 kg，注意要精确，注意要精确过过 滤滤也可离心，收集全部滤液氯化镉、氯化钡提取也可离心，收集全部滤液氯化镉、氯化钡提取加入加入2 2倍的蒸馏水，倍的蒸馏水，1 1倍的提取液，振荡，提取倍的提取液，振荡，提取1h1h。如果没有摇。如果没有摇床，可人工代替，经常用玻璃棒搅动。加碱沉淀氯化镉、氯化床，可人工代替，经常用玻璃棒搅动。加碱沉淀氯化镉、氯化钡钡也需要搅动。定容到也需要搅动。定容到500mL500mL一定要精确取一定要精确取50mL50mL滤液，加滤液，加Al(OH)32mLAl(OH)32mL除去有机杂质，定容到除去有机杂质，定容到100mL100mL需要搅动。需

10、要搅动。过滤过滤也可离心也可离心过滤过滤离心也可离心也可5材料中材料中NaNO2含量的测定含量的测定取上面获得的无色透明液体取上面获得的无色透明液体5mL于试管，加水于试管，加水2mL，加对氨基苯磺酸，加对氨基苯磺酸2mL，-萘胺萘胺1mL，反，反应应15min后，与上面的标准色阶颜色进行对比，后，与上面的标准色阶颜色进行对比，从色阶表中找出相应的样品从色阶表中找出相应的样品NaNO2的含量，根据的含量，根据公式计算样品溶液中公式计算样品溶液中NaNO2的含量的含量6 6采用比色法测定物质含量的要注意的地方采用比色法测定物质含量的要注意的地方（1 1）称取的物质量要准确，）称取的物质量要准确，

11、2 2）研磨过程要充分，并充分溶解在水中）研磨过程要充分，并充分溶解在水中（3 3）每次定容要准确）每次定容要准确（4 4）反应时，加入的溶液量要准确）反应时，加入的溶液量要准确（5 5）所有的反应过程要保持条件一致。）所有的反应过程要保持条件一致。结果：泡菜中亚硝酸盐含量在发酵刚刚开始的结果：泡菜中亚硝酸盐含量在发酵刚刚开始的时候都处于上升趋势，在时候都处于上升趋势，在5 d5 d或者或者7 d7 d的时候会达的时候会达到一个最高值，之后就会慢慢下降，在发酵时间到一个最高值，之后就会慢慢下降，在发酵时间达到达到13 d13 d左右的时候下降到一个相对比较稳定的左右的时候下降到一个相对比较稳

12、定的数值，达到平稳状态。数值，达到平稳状态。原因分析：发酵初期，泡菜中的微生物生长很快，原因分析：发酵初期，泡菜中的微生物生长很快，微生物将蔬菜中的硝酸盐还原成亚硝酸盐，如此微生物将蔬菜中的硝酸盐还原成亚硝酸盐，如此同时，蔬菜中的酚类物质和维生素同时，蔬菜中的酚类物质和维生素C C等物质也会等物质也会将亚硝酸盐氧化，但总体来说，生成的亚硝酸盐将亚硝酸盐氧化，但总体来说，生成的亚硝酸盐大于被氧化的亚硝酸盐，因此，随着发酵时间的大于被氧化的亚硝酸盐，因此，随着发酵时间的进行，亚硝酸盐的含量会逐步上升。随着微生物进行，亚硝酸盐的含量会逐步上升。随着微生物代谢活动的持续，氧气被消耗殆尽，泡菜坛中的代谢活动的持续，氧气被消耗殆尽，泡菜坛中的环境不利于除乳酸菌以外的其他微生物的生长。环境不利于除乳酸菌以外的其他微生物的生长。与此同时，蔬菜中的亚硝酸盐含量由于被氧化而与此同时，蔬菜中的亚硝酸盐含量由于被氧化而减少，因此，亚硝酸盐的含量会逐渐下降并趋于减少，因此，亚硝酸盐的含量会逐渐下降并趋于一个相对稳定的数值。一个相对稳定的数值。