液相色谱讲义七色谱泵及进样器原理及操作.ppt
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1、 Waters液相色谱仪简介液相色谱仪简介液相色谱仪的使用及保养高效液相色谱系统高效液相色谱系统液相色谱的溶剂输送系统液相色谱的溶剂输送系统消除压力脉动消除压力脉动-非园齿轮非园齿轮Waters的专利技术.充分利用两泵头非线性运动所产生的加速度变化.进行流量及压力的交叉互补.没有凸轮设计中的失速的问题提高可靠性的设计.低摩擦轴承.免维护润滑系统.新型的密封材料及控制阀新型的溶剂输送系统新型的溶剂输送系统 全新的设计概念,为高精度输送流动相。比例阀进口阀主柱塞腔主压力传感器蓄液柱塞腔系统压力传感器柱塞驱动马达2690工作示意图工作示意图2690溶剂输送系统的特点溶剂输送系统的特点独立的柱塞杆驱动
2、马达.双压力传感器,监视系统及柱塞腔压力.软件根据传感器的反馈,控制所有功能.完全没有压力的脉动.只有两个进口阀,没有出口阀,可靠性极高精确的溶剂配比.溶剂混合在柱塞腔内完成.精确的先进、先出流路.低系统体积色谱泵的操作面板色谱泵的操作面板以510泵为例:Waters 515 泵的前面板泵的前面板515泵的电源开关排液阀出口阀后部清洗孔Waters 515 泵的操作面板泵的操作面板C在Run与Ready之间切换C用于设定各种参数C用于选择和存储泵的操作参数C用于更改具体参数或选择参数项色谱泵的排气操作色谱泵的排气操作使用前,应先确认泵头内没有气体,如有气体要按以下步骤排气:.将排液阀反时针转2
3、3圈,用10ml注射器抽,直到出液.按以下方法之一将泵的后面放空将U6K的C阀打开,或717设在PURGE状态或,将参比阀打开或,把色谱柱摘下.打开电源开关.开大流速到6-9ml/min.同时用10ml注射器从排液阀注入流动相.直到泵后的流速稳定无气泡为止色谱泵的运行色谱泵的运行注意用外部控制器与用泵面板控制的区别.有些型号的外部控制器与面板不能同时用.如需要面板控制,需要断开控制线或关闭控制器排气后的色谱泵即可运行.注意排气后,先设流速为 0恢复排气时断开的部分,如进样器、色谱柱如需要,恢复排气时断开的控制线根据色谱柱的不同,逐渐提高流速到设定值泵进出口阀泵进出口阀进口阀.标准的球型单向阀
4、出口阀.弹簧引导阀,是主动阀。在低压下关闭,可有效地输送挥发性溶剂.在有气泡时也关闭.带过滤片.515的出口阀是标准的球型单向阀出口阀的拆装.各个组件是散件,安装时注意位置,不要挤压梯度梯度 高压混合高压混合高压梯度.使用多台色谱泵,在泵后混合.配置灵活、简单,脱气简单.易调节梯度的滞后体积600系列泵系列泵600系列泵是自带微机控制的色谱泵.四元梯度、流速范围宽,大屏幕显示,键盘操作梯度梯度 低压混合低压混合低压梯度.用单泵产生梯度,泵前混合.脱气要求高.不易调节梯度的滞后体积.如设计不当,滞后体积会随反压变化滞后体积(系统体积).即梯度混合点到色谱柱入口的体积.结果是实际梯度比设置的梯度要
5、滞后一段时间低压混合梯度的设计低压混合梯度的设计先进先出的阀设计.FIFO流路设计.低压梯度的先决条件.保证准确并重现的梯度出口阀.用普通的球型阀.排气泡方便滞后体积.固定,不随反压变化.大小合适梯度滞后:系统体积的影响死体积/谱带展宽体积(无色谱柱时)滞后(系统)体积滞后(系统)体积溶剂输送系统(泵)检测器进样器色谱柱色谱柱梯度混合器溶剂输送系统(泵)高压梯度注意注意 滞后体积包括进样器、阻尼滞后体积包括进样器、阻尼 器、混合器及其管路器、混合器及其管路比例阀检测器进样器ABCD色谱柱色谱柱溶剂输送系统(泵)低压梯度 阻尼器 混合器梯度滞后大小的影响滞后体积太大会引起梯度变化的延迟.例如滞后
6、体积为 2.0ml,流速 1.0ml/min实际梯度会比设置值晚 2 分钟响应,没有问题.对微柱色谱影响更大,如上例,流速0.1ml/min实际梯度会比设置值晚20 分钟响应,不能接受滞后体积的不同会使方法转换麻烦.滞后体积比文献大或小都会使方法不能重现普通HPLC的滞后体积为24ml.对分析型HPLC没有影响.对作微柱实验用梯度时影响较大,因此应选滞后体积小的液相色谱仪,以适应梯度实验滞后体积变化的影响设计不好的HPLC系统,滞后体积随反压变化滞后体积随反压变化的后果.方法的适应性不好.梯度的重现性不好用静态梯度混合器及RPS软件可改善梯度特性600系列泵的操作系列泵的操作600系列泵都有两
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- 色谱 讲义 进样器 原理 操作
