方剂学实验范例.ppt
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1、方剂学实验范例方剂学实验范例长春中医学院长春中医学院序言序言方剂实验课,可提高学生的现代化意识、创新意识,并可培养其科研能力与动手能力,是适应时代发展而培养现代型中医人才的需要。为了配合方剂实验课,使学生初步了解实验过程,我们拍摄了部分方剂实验观察的视听教材,以供使用。方剂学实验范例 长春中医学院麻黄汤与桂枝汤发汗作用的比较麻黄汤与桂枝汤发汗作用的比较 实验目的实验目的 麻黄汤、桂枝汤均为发汗解表剂,麻黄汤主要用于外感风寒引起的太阳表实证,桂枝汤主要用于外感风寒引起的太阳表虚证。两者皆能发汗,但有强弱之分,通过麻黄汤、桂枝汤在发汗作用方面的比较,认识麻黄汤为发汗之峻剂,从而在临床上能更好地选择
2、应用二方。方剂学实验范例 长春中医学院麻黄汤与桂枝汤发汗作用的比较麻黄汤与桂枝汤发汗作用的比较 实验器材实验器材 药物:麻黄汤:麻黄50g、桂枝30g、杏仁30g、炙甘草30g;桂枝汤:桂枝50g、芍药50g、生姜45g、炙甘草30g、大枣70g;制剂制备:洗净药材,煎煮三次,合并煎液,然后滤纸过滤。制剂浓缩为50的煎液,pH值为67;生理盐水适量;动物:小白鼠;实验用品:注射器(1ml)、针头(5号)、台式天平、鼠笼。方剂学实验范例 长春中医学院麻黄汤与桂枝汤发汗作用的比较麻黄汤与桂枝汤发汗作用的比较 实验方法实验方法 取小白鼠30只,随机分为麻黄汤组、桂枝汤组、生理盐水组,每组10只。分别
3、给小白鼠腹腔注射025ml10g的药液或生理盐水。给药后20分钟,观察三组小白鼠出汗情况。方剂学实验范例 长春中医学院麻黄汤与桂枝汤发汗作用的比较麻黄汤与桂枝汤发汗作用的比较 实验结果实验结果鼠鼠 号号 体重(体重(g g)给药量给药量(ml(ml)出汗级数出汗级数麻黄汤组麻黄汤组 桂枝汤组桂枝汤组 生理盐水组生理盐水组 方剂学实验范例 长春中医学院小青龙汤平喘作用的观察小青龙汤平喘作用的观察 实验目的实验目的 小青龙汤为辛温解表之剂,又为平喘之良方,本实验主要观察该方的平喘作用。用组织胺喷雾致敏,引起豚鼠哮喘,观察小青龙汤的平喘作用。方剂学实验范例 长春中医学院小青龙汤平喘作用的观察小青龙汤
4、平喘作用的观察 实验器材实验器材 200g 200g左右的豚鼠若干只、喷雾玻璃钟罩左右的豚鼠若干只、喷雾玻璃钟罩(直径约直径约20-25cm20-25cm,高,高20cm)20cm)、喷雾器喷雾器(也可用空气压缩机代用、也可用空气压缩机代用、但要加测压器以检测进气的压力但要加测压器以检测进气的压力)、秒表,、秒表,0 04 4磷磷酸组织胺溶液酸组织胺溶液(即即40mg40mg磷酸组织胺加水磷酸组织胺加水10ml)10ml)、注射注射器器(10ml(10ml、5ml)5ml)、生理盐水、玻璃喷雾头一只;小青生理盐水、玻璃喷雾头一只;小青龙汤制剂:每龙汤制剂:每mlml含含1g1g生药:麻黄生药:
5、麻黄10g10g、芍药芍药10g10g、五五味子味子10g10g、半夏半夏10g10g、干姜干姜10g10g、炙甘草炙甘草10g10g、细辛细辛10g10g、桂枝桂枝10g10g;先加水先加水600ml600ml煎至煎至120ml120ml左右,去渣,加左右,去渣,加7070酒精酒精100ml100ml,沉淀沉淀2424小时,次日把沉淀后药汁经抽小时,次日把沉淀后药汁经抽滤瓶抽滤后放在滤瓶抽滤后放在6060恒温水浴锅中蒸发浓缩至恒温水浴锅中蒸发浓缩至80ml80ml。方剂学实验范例 长春中医学院小青龙汤平喘作用的观察小青龙汤平喘作用的观察 实验方法实验方法实验方法实验方法 实验前实验前l l天
6、先作初步筛选,将豚鼠逐一放在玻天,先作初步筛选,将豚鼠逐一放在玻璃钟罩内,在恒温下喷入璃钟罩内,在恒温下喷入0 04 4磷酸组织胺液,持续磷酸组织胺液,持续喷喷6060秒,然后密切观察豚鼠反应,若在秒,然后密切观察豚鼠反应,若在2 25 5分钟内抽分钟内抽搐跌倒,表明该豚鼠对磷酸组织胺敏感,可以选用;搐跌倒,表明该豚鼠对磷酸组织胺敏感,可以选用;反之。若超过反之。若超过2 25 5分钟不跌倒则为不敏感,不予选用;分钟不跌倒则为不敏感,不予选用;每次实验都用豚鼠每次实验都用豚鼠2 2只,分别涂上不同颜色作标记,只,分别涂上不同颜色作标记,然后分别腹腔注射小青龙汤然后分别腹腔注射小青龙汤1 15
7、ml5ml和生理盐水和生理盐水1 15ml5ml,半小时后放入钟罩内并喷入组织胺半小时后放入钟罩内并喷入组织胺1 1分钟,观察二分钟,观察二组豚鼠引喘反应。组豚鼠引喘反应。方剂学实验范例 长春中医学院小青龙汤平喘作用的观察小青龙汤平喘作用的观察 实验结果实验结果动动 物物药药 物物 预选时的引预选时的引喘潜伏期喘潜伏期 实验时的引实验时的引喘潜伏期喘潜伏期 1 1号号 2 2号号 方剂学实验范例 长春中医学院大承气汤对小白鼠胃肠蠕动作用的观察大承气汤对小白鼠胃肠蠕动作用的观察 实验目的实验目的 大承气汤是峻下热结的主方,适用于以“痞、满、燥、实”等症状为主的阳明腑实证。本实验通过测定10炭末的
8、大承气汤在胃肠道内的移动速度,观察此方对胃肠道蠕动功能的影响。方剂学实验范例 长春中医学院大承气汤对小白鼠胃肠蠕动作用的观察大承气汤对小白鼠胃肠蠕动作用的观察 实验器材实验器材 药物:大承气汤:大黄30g、芒硝l0g、枳实20g、厚朴20g;制剂制备:将大承气汤水煎液配制成10炭末的大承气汤药液,10炭末生理盐水混悬液适量;动物:小白鼠;实验用品:灌胃器、尺子、解剖器械、天平。方剂学实验范例 长春中医学院大承气汤对小白鼠胃肠蠕动作用的观察大承气汤对小白鼠胃肠蠕动作用的观察 实验方法实验方法实验方法实验方法 取空腹取空腹2424小时的小白鼠小时的小白鼠1010只只(1822g)(1822g)分为
9、二分为二组,称重、编号;组,称重、编号;灌胃:大承气汤药液和生理盐水灌胃:大承气汤药液和生理盐水混悬液用量均为混悬液用量均为0 02ml2ml10g10g,每灌每灌1 1只,记录下时间;只,记录下时间;2020分钟后,处死小白鼠,打开腹腔,取出肠管,分分钟后,处死小白鼠,打开腹腔,取出肠管,分离肠系膜,将肠管拉成直线,以幽门为起点,量出炭离肠系膜,将肠管拉成直线,以幽门为起点,量出炭末移动距离和小肠的总长度;末移动距离和小肠的总长度;计算每只小白鼠炭末计算每只小白鼠炭末在肠内移动的距离占小肠全长的百分率为:在肠内移动的距离占小肠全长的百分率为:碳末移动的距离碳末移动的距离 100%100%小肠
10、的总长度小肠的总长度方剂学实验范例 长春中医学院大承气汤对小白鼠胃肠蠕动作用的观察大承气汤对小白鼠胃肠蠕动作用的观察 实验结果实验结果 分分组组编编号号重重量量灌胃灌胃量量 炭末移炭末移动距离动距离 肠总肠总长度长度 百分率百分率 肠管变化肠管变化 大大承承气气汤汤组组1 12 23 34 45 5方剂学实验范例 长春中医学院大承气汤对小白鼠胃肠蠕动作用的观察大承气汤对小白鼠胃肠蠕动作用的观察 实验结果实验结果 分分组组编编号号重重量量灌胃灌胃量量 炭末移炭末移动距离动距离 肠总肠总长度长度 百分率百分率 肠管变化肠管变化 生生理理盐盐水水组组1 12 23 34 45 5方剂学实验范例 长春
11、中医学院十枣汤对家兔肠管蠕动的影响十枣汤对家兔肠管蠕动的影响 实验目的实验目的 十枣汤具有攻逐水饮的作用,通过观察十枣汤对肠管蠕动的影响,以探讨其泻下攻逐的作用。方剂学实验范例 长春中医学院十枣汤对家兔肠管蠕动的影响十枣汤对家兔肠管蠕动的影响 实验器材实验器材 动物:家兔1只;药物:芫花、甘遂、大戟、大枣制成100浓度十枣汤煎液;实验用品:麦氏浴槽、恒温水浴箱、二导生理记录仪、万能杠杆、温度计、滴管、烧杯、台氏液。方剂学实验范例 长春中医学院十枣汤对家兔肠管蠕动的影响十枣汤对家兔肠管蠕动的影响 实验方法实验方法 先装好一套麦氏浴槽,浴槽内盛38台氏液,将充满空气的球胎经由橡皮管连至麦氏浴槽乙型
12、通气管上,调节橡皮管上的螺丝皮管夹,使气泡一个一个地不断地通至浴槽,以供氧气;用木锤猛击兔头部,使其昏迷后,剖开腹腔,在靠十二指肠附近,取出一段3-4cm长的小肠,迅速将该段小肠一端的一结扎线结于乙型通气管弯头上,小肠另一端的结扎线系于杠杆上;方剂学实验范例 长春中医学院十枣汤对家兔肠管蠕动的影响十枣汤对家兔肠管蠕动的影响 实验方法实验方法 将浴槽放在盛水的恒温水浴箱内,使台将浴槽放在盛水的恒温水浴箱内,使台氏液温度保持在氏液温度保持在38-40之间;之间;记录肠段在记录肠段在38-40台氏液中的运动曲线;台氏液中的运动曲线;待台氏液稳待台氏液稳定,描记一段肠段正常运动曲线后滴加定,描记一段肠
13、段正常运动曲线后滴加100十枣煎液十枣煎液l0ml于浴槽中,观察肠活动的改变并于浴槽中,观察肠活动的改变并做好标记。做好标记。方剂学实验范例 长春中医学院十枣汤对家兔肠管蠕动的影响十枣汤对家兔肠管蠕动的影响 实验结果实验结果 实验完毕后,将结果剪贴在实验报告纸上并分析之。方剂学实验范例 长春中医学院银翘散、白虎汤、大承气汤的退热作用观察银翘散、白虎汤、大承气汤的退热作用观察 实验目的实验目的 发热是外感热病过程中十分重要的症状和体征,通过运用银翘散、白虎汤、大承气汤对发热动物模型的解热实验,分析比较各种方剂的不同解热作用,增强对银翘散、白虎汤、大承气汤的感性认识和实验操作能力,从而加深对“汗”
14、清”、“下”三法的理解,了解其对临床和科研的指导意义。方剂学实验范例 长春中医学院银翘散、白虎汤、大承气汤的退热作用观察银翘散、白虎汤、大承气汤的退热作用观察 实验器材实验器材 药物:银翘散:银花,连翘,桔梗,薄荷,竹叶,生甘草,荆芥,淡豆豉,牛蒡子,芦根。白虎汤:石膏,知母,甘草,粳米。大承气汤:大黄,芒硝,枳实,厚朴。伤寒或副伤寒菌苗及生理盐水。动物:家兔(每只要求15kg以上)。实验用品:肛表,婴儿秤,兔固定架,注射器(1ml、20ml),酒精棉球,胃管,灌胃开口器,量杯,石蜡油。方剂学实验范例 长春中医学院银翘散、白虎汤、大承气汤的退热作用观察银翘散、白虎汤、大承气汤的退热作用观察
15、 实验方法实验方法 给家兔逐一测体温。每次取家兔1只,待安静后将兔臀部抬高,右手拿肛表,将水银柱甩到35C以下,末端涂石蜡油少许,插入兔肛门,深度5cm,3分钟后取出读取体温度数;方剂学实验范例 长春中医学院银翘散、白虎汤、大承气汤的退热作用观察银翘散、白虎汤、大承气汤的退热作用观察 实验方法实验方法 用上法选取肛温在用上法选取肛温在383-396的家兔的家兔4只,编号,称体重,观察其正常表现,分别给家只,编号,称体重,观察其正常表现,分别给家兔静脉注射伤寒副伤寒菌苗兔静脉注射伤寒副伤寒菌苗lmlkg,使之发热,使之发热,待肛温升高超过待肛温升高超过1后后(约需经约需经05-1小时小时)再分再
16、分别灌胃给药,甲兔用别灌胃给药,甲兔用100银翘散煎液银翘散煎液20mlkg,乙兔用乙兔用100白虎汤煎液白虎汤煎液20mlkg,丙兔用丙兔用100大承气汤大承气汤20mlkg,丁兔用等量生理盐水。丁兔用等量生理盐水。给药后给药后30、60、120分钟各测肛温一次,比较各分钟各测肛温一次,比较各兔给药前后肛温的变化。兔给药前后肛温的变化。方剂学实验范例 长春中医学院银翘散、白虎汤、大承气汤的退热作用观察银翘散、白虎汤、大承气汤的退热作用观察 注意事项注意事项n n测温时操作尽量柔和,勿使家兔挣扎,以免引起体温波动n n同一兔用同一肛表,测肛温时将肛温表水银柱甩在35以下测量条件要一致n n家兔
17、择健康、体重在15kg以上,体温在383396为宜n n3小时后,凡肛温上升08以上的家兔应予剔除,然后按编号分组方剂学实验范例 长春中医学院银翘散、白虎汤、大承气汤的退热作用观察银翘散、白虎汤、大承气汤的退热作用观察 兔号体重(kg)菌苗注射剂量(ml)药物及剂量肛温()正常给菌苗后给药后30分钟60分钟120分钟甲乙丙丁实验结果实验结果 方剂学实验范例 长春中医学院四逆加人参汤对离体蛙心收缩的影响四逆加人参汤对离体蛙心收缩的影响 实验目的实验目的 四逆加人参汤具有回阳救逆作用,适用于阳气暴脱之厥证,本实验通过对离体蛙心缩的影响观察,了解其强心作用。方剂学实验范例 长春中医学院四逆加人参汤对
18、离体蛙心收缩的影响四逆加人参汤对离体蛙心收缩的影响 实验器材实验器材 动物:蟾蜍;药品:四逆加人参汤:制附子10g、人参10g、干姜10g、炙甘草6g,任氏液适量;实验用品:二导生理记录仪、蛙心夹杠杆、蛙心插管、试管夹、线、双凹夹、铁支架、蛙手术器械、滴管。方剂学实验范例 长春中医学院四逆加人参汤对离体蛙心收缩的影响四逆加人参汤对离体蛙心收缩的影响 实验方法实验方法实验方法实验方法 离体蟾蜍蛙心脏的制备:离体蟾蜍蛙心脏的制备:取蟾蜍取蟾蜍1 1只,破坏脑只,破坏脑和脊髓,暴露心脏,在左侧主动脉下穿两根丝线,结和脊髓,暴露心脏,在左侧主动脉下穿两根丝线,结扎右侧和左侧主动脉上端的丝线,将左侧下端
19、丝线打扎右侧和左侧主动脉上端的丝线,将左侧下端丝线打一松结。在左侧主动脉结扎线下端,用小剪刀轻轻将一松结。在左侧主动脉结扎线下端,用小剪刀轻轻将主动脉剪一小斜口,将盛有少量任氏液的蛙心插管由主动脉剪一小斜口,将盛有少量任氏液的蛙心插管由此斜口插入动脉,然后将插管稍向后退再转向心室中此斜口插入动脉,然后将插管稍向后退再转向心室中央的方向,插入心室腔内,插管是否插入心室,可看央的方向,插入心室腔内,插管是否插入心室,可看插管中的任氏溶液面是否随心搏而上、下移动。如已插管中的任氏溶液面是否随心搏而上、下移动。如已进入心室,则将松结的丝线扎紧,固定于蛙心插管的进入心室,则将松结的丝线扎紧,固定于蛙心插
20、管的小突起上。小突起上。方剂学实验范例 长春中医学院四逆加人参汤对离体蛙心收缩的影响四逆加人参汤对离体蛙心收缩的影响 实验方法实验方法实验方法实验方法 最后将蛙心与插管一同提起,剪断周围软组织后,在最后将蛙心与插管一同提起,剪断周围软组织后,在静脉窦部位穿一丝线,并结扎,在结扎线以下剪断软静脉窦部位穿一丝线,并结扎,在结扎线以下剪断软组织,摘出心脏。吸出蛙心及插管内血液,并用任氏组织,摘出心脏。吸出蛙心及插管内血液,并用任氏液灌洗数次,以防血液凝固,堵塞插管。在蛙心尖部液灌洗数次,以防血液凝固,堵塞插管。在蛙心尖部用蛙心夹夹住蛙心尖,夹蛙时注意在舒张期夹。将蛙用蛙心夹夹住蛙心尖,夹蛙时注意在舒
21、张期夹。将蛙心夹的线连于二导的换能器,作好描记曲线的准备。心夹的线连于二导的换能器,作好描记曲线的准备。观察:启开二导记录装置,描记正常蛙心收缩曲线,观察:启开二导记录装置,描记正常蛙心收缩曲线,观察心跳频率和强度。将准备好的四逆加人参汤溶液观察心跳频率和强度。将准备好的四逆加人参汤溶液用滴管吸出后加两滴于插管的任氏液中,观察蛙心心用滴管吸出后加两滴于插管的任氏液中,观察蛙心心跳变化,并做好记录。跳变化,并做好记录。方剂学实验范例 长春中医学院四逆加人参汤对离体蛙心收缩的影响四逆加人参汤对离体蛙心收缩的影响 实验结果实验结果 将描记的曲线贴上。方剂学实验范例 长春中医学院独参汤对小白鼠耐缺氧作
22、用的观察独参汤对小白鼠耐缺氧作用的观察 实验目的实验目的 独参汤大补元气,本实验通过对小白鼠注射人参药液和注射生理盐水作一对照,以观察在缺氧环境下抗御能力的差异。方剂学实验范例 长春中医学院独参汤对小白鼠耐缺氧作用的观察独参汤对小白鼠耐缺氧作用的观察 实验器材实验器材 药物:1:1生晒人参水提液、生理盐水适量;动物:1820g小白鼠10只;实验用品:250ml广口瓶及橡皮塞各10只、注射器、针头(6号)、秒表、纱布、天平。方剂学实验范例 长春中医学院独参汤对小白鼠耐缺氧作用的观察独参汤对小白鼠耐缺氧作用的观察 实验方法实验方法 将生晒参以1:1浓度水煎至所需量,冷却待用;取小白鼠10只,分成二
23、组。一组为实验组,一组为对照组并称好体重,作好标记;将实验组小白鼠腹腔注射生晒人参药液,以025ml/l0g的剂量;对照组注射等量的生理盐水;待用药半小时后,将小白鼠放到广口瓶内,迅速用橡皮塞塞紧瓶口,同时按下秒表;仔细观察小白鼠窒息致死的时间,并做好记录。方剂学实验范例 长春中医学院独参汤对小白鼠耐缺氧作用的观察独参汤对小白鼠耐缺氧作用的观察 实验结果实验结果实验结果实验结果 实验组对照组编号体重(g)注射剂量死亡时间编号体重(g)注射剂量 死亡时间1122334455方剂学实验范例 长春中医学院四君子汤对小鼠肝组织丙二醛四君子汤对小鼠肝组织丙二醛(MDA)的影响的影响 实验目的实验目的 机
24、体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多种不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,通过链式或者链式支链反应,放大活性氧的作用,因此初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢功能障碍,甚至死亡。本实验通过观察四君子汤对小鼠肝组织匀浆MDA的作用以验证其功效。方剂学实验范例 长春中医学院四君子汤对小鼠肝组织丙二醛四君子汤对小鼠肝组织丙二醛(MDA)的影响的影响 实验器材实验器材1动物小鼠,雌雄不限。2药物(1)四君子汤水煎液,1g生药ml。(2)1号为10ml溶液,
25、室温保存,天冷时会凝固每次测试前适当加温以加速溶解,直到透明方可应用。(3)2号试剂为10ml溶液,用时加290ml双蒸水稀释。(4)3号为粉剂,用时加100ml双蒸水,适当加温溶解。(5)4号为标准品,为10nmolml的四氧基丙烷10ml。3实验用品天平、试管、滤纸、可见光分光光度计、恒温水浴锅、离心机、匀浆器等。方剂学实验范例 长春中医学院四君子汤对小鼠肝组织丙二醛四君子汤对小鼠肝组织丙二醛(MDA)的影响的影响 实验方法实验方法1小鼠10只,分为对照组和四君子组,对照组1g生理盐水02ml10g,四君子组1g黄芪水煎液02ml10g,每日一次,共三天。2小鼠断头处死,取出部分肝组织,用
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