角毛藻工艺流程.ppt

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1、角毛藻工艺流程角毛藻工艺流程 角毛藻概况 角毛藻细胞小型，细胞壁薄。壳面椭圆形至圆形，中央略凸起或少数平坦。壳环面成长方形至四角形。角毛细而长，末端尖，自细胞四角生出。色素体一个，呈片状，黄褐色。正常情况下，角毛藻培养液呈黄褐色，有沉淀。一般为无性分裂繁殖。环境不良的时候可形成休眠孢子，一个母细胞形成一个休眠孢子，也能形成复大孢子。角毛藻的应用硅藻是海洋浮游植物的主要组成部分，是海洋初级生产力的一个重要指标。滤食性鱼虾贝类等的优质饵料。生物增氧的重要组分。对养殖废水有净化的作用。藻藻 类类 培培 养养 流流 程程实验室培养实验室培养车间培养车间培养亚克力管培养亚克力管培养Mass Cultur

2、eMass Culture PhotobioreactorPhotobioreactor Culture Culture LAB CultureLAB Culture 藻类生长环境适应范围藻类生长环境适应范围瓶子瓶子袋子袋子桶桶盐盐 度度（S S）2 26 6-3-33 3pptppt25-34ppt25-34ppt25-34ppt25-34ppt总总碱碱度度（Alk）120-180ppm120-180ppm120-180ppm120-180ppm120-180ppm120-180ppm酸碱度酸碱度（pH）7.5-8.57.5-8.57.5-8.57.5-8.57.5-8.57.5-8.5水水

3、 温（温（0 0c c）25-3025-3025-3025-3028-3228-32气气 温（温（o oc c）25-3325-3325-3325-3328-3228-32光照（光照（luxlux）2000-70002000-70002000-70002000-700010000-7000010000-70000实验室内水的准备实验室内水的准备1.EDTA:10ppm1.EDTA:10ppm2.ALK:120-2.ALK:120-180ppm180ppm3.pH :7.5-8.53.pH :7.5-8.54.Sal:25-34.Sal:25-33 3ppmppm袋子水的准备袋子水的准备1.ED

4、TA:10ppm1.EDTA:10ppm2.ALK:120-2.ALK:120-180ppm180ppm3.pH :7.5-8.53.pH :7.5-8.54.Sal:25-34.Sal:25-33 3ppmppm营养盐的种类营养盐的种类LABLAB（tube.flask.tube.flask.bottlebottle）LAB(bagLAB(bag)MASS(tankMASS(tank)photophotoMediumMediumF;F/2;F;F/2;ConwayConwayF;F/2;F;F/2;ConwayConwayTMRL;TMRL;Key BloomKey BloomF;F/2;F

5、F/2;ConwayConway1.Modified F Medium(F);2.Guillard F/2(F/2)3.Conway Medium(Conway)4.TMRL 5.Key Bloom所需元素所需元素(1).(1).大量元素大量元素 C.H.O.N.P.S.K.Mg.Ca.C.H.O.N.P.S.K.Mg.Ca.SiSi(2).(2).微量元素微量元素 Fe.Fe.MnMn.Cu.Zn.Mo.B.Cu.Zn.Mo.B.ClCl.Co.Co所需维生素所需维生素1.1.（VitaminBVitaminB1212）2.2.（VitaminBVitaminB1 1）3.3.（Bioti

6、nBiotin）日常消毒方法日常消毒方法1.1.进实验室，先用进实验室，先用70%70%酒精消毒手酒精消毒手2.2.试管，三角瓶，移液管，移液枪等接藻器皿放入高压灭菌锅消试管，三角瓶，移液管，移液枪等接藻器皿放入高压灭菌锅消毒。毒。3.3.接种环接种时用酒精灯火焰烧接种环接种时用酒精灯火焰烧4.4.用过的用过的tube flask bottletube flask bottle等清洗时用盐酸浸泡，再用清水清洗等清洗时用盐酸浸泡，再用清水清洗5.5.桶用聚维酮碘清洗桶用聚维酮碘清洗6.6.进海水管用进海水管用200ppm200ppm漂白粉浸泡，第二天在用硫代硫酸钠水冲洗漂白粉浸泡，第二天在用硫代

7、硫酸钠水冲洗玻璃器皿的清洗玻璃器皿的清洗1.HCl浓度浓度1%，浸泡，浸泡12h2HCl浓度浓度 5%，现泡现洗，现泡现洗藻类实验室工作流程藻类实验室工作流程Plate-tube-flask-1L bottle-2L subbottle-30Lbag-30LsubbagPlate-tube-flask-1L bottle-2L subbottle-30Lbag-30Lsubbag藻类实验室工作流程藻类实验室工作流程1 Plate2 Tube3 flask4 bottle培养皿的制作培养皿的制作盐度：盐度：25-325-33 3pptppt 琼脂：琼脂：0.8-1.5%0.8-1.5%光照：光照

8、2000-7000lux 2000-7000lux 时间：时间：7-147-14天天培养皿的制作培养皿的制作（1）加）加 营营 养养 盐盐 （2）摇）摇 匀匀 （3）倒倒 平平 板板 （4）等）等 待待 冷冷 却却 （8）封）封 口口 （7）做）做 标标 签签 （6）画）画 平平 板板 （5）画）画 平平 板板 试管流程试管流程一一 级级 试试 管管稀稀 释释 试试 管管生生 产产 试试 管管一一 级级 试试 管管 1.海水海水:7 ml2.培养皿培养皿:3个藻落个藻落3.光照光照:2000-7000 lux4.时间时间 :4-7天天稀稀 释释 试试 管管1.海水海水 :9ml2.一级试管一

9、级试管:1 ml3.光照光照 :2000-7000 lux4.时间时间 :246daysX=2days,x=4days,x=6days生生 产产 试试 管管1.海水海水 :9 ml2.稀释试管稀释试管:1 ml3.光照光照 (lux):2000-70004.时间时间 :2-3 天天三角瓶培养三角瓶培养1.海水海水 :100-200 ml2.生产试管生产试管:2*10ml3.光照光照 :2000-7000lux4.时间时间 :2-3 天天1L1L瓶子培养瓶子培养1.海水海水:800 ml2.250ml三角瓶三角瓶 :1*200 ml3.光照光照 :20007000 lux4.时间时间 :2 da

10、ys1.空气空气 :一直一直2L2L瓶子培养瓶子培养1.海水海水:1700-1800 ml2.1L瓶子瓶子 :1/4*1000 ml3.光照光照 :20007000 lux4.时间时间 :2 days5.空气空气 :一直一直藻袋室藻袋室瓶瓶-袋袋(2L(2L瓶瓶-20L-20L袋子袋子)1.海水海水 :18 L2.2L瓶瓶:1*2L3.光照光照 :20007000 lux4.时间时间 :2 days5.空气空气 :一直一直袋分袋袋分袋1.海水海水:20 L2.20L袋袋 :*20 L3.光照光照 :20007000 lux4.时间时间 :2 days5.空气空气 :一直一直车间培养车间培养收藻

11、收藻打包打包 光生物反应器培养光生物反应器培养 光生物反应器培养光生物反应器培养 光照设备光照设备二氧化碳设备二氧化碳设备1、接接完完藻，藻，12小小时时后后再再接接入入CO22、CO2指数为0.50.5 管道压力表管道压力表 CO2气瓶压力表气瓶压力表 动力及管道设备动力及管道设备光生物反应器培养光生物反应器培养1 1、放藻量约、放藻量约400L400L2 2、营养盐：、营养盐：F/2F/23 3、COCO2 2 ：放藻：放藻1212小时后再加小时后再加4 4、Micro:Micro:每天都送样每天都送样5 5、QC QC ：每天：每天10:0010:00，22:0022:00镜检镜检 QC

12、 密度密度 QCQC（细胞含量（细胞含量,大小）大小）微生物检测结果微生物检测结果PH,CO2,DO,TAN,NO2QC(QC(杂藻杂藻,原生动物原生动物)藻藻类类质质量量的的检检测测QCChaetoceros 茧型藻茧型藻nitzchianitzchiaChaetocerosThalassiosiraThalassiosira1、杂藻感染情况、杂藻感染情况2、细胞密度细胞密度血球计数板的计算方法血球计数板的计算方法1）当藻类密度比较稀的时候）当藻类密度比较稀的时候（如：（如：藻类车间桶和池的藻类车间桶和池的密度等密度等），数），数“A”，“B”，“C”，“D”四个四个角落的数量。角落的数量。

13、计算：计算：Density=（A+B+C+D）/4*104E血球计数板的计算方法血球计数板的计算方法2）当藻类的密度很浓时）当藻类的密度很浓时（如（如实验室的藻和收好的实验室的藻和收好的藻藻等），数等），数“E”中的中的“a”，“b”，“c”，“d”，“f”的数量。的数量。计算：计算：Density=（a+b+c+d+f）/5*25*1042、细胞密度细胞密度3、细胞大小、细胞大小角毛藻：（角毛藻：（L*2.5）*（W*2.5）海莲藻：海莲藻：（R*2.5）2*（H*2.5）（海莲藻细胞是立体柱状型）（海莲藻细胞是立体柱状型）L为长；为长；W为宽；为宽；R为半径为半径;H为高为高90-100%70%4、藻细胞含量观察、藻细胞含量观察 5、藻中原生动物的检测、藻中原生动物的检测 等级等级 用途用途A（90-100）可以用来投喂或者留着继续扩大培养可以用来投喂或者留着继续扩大培养B（80-89）只能用来喂料只能用来喂料C（70-79）作为备用作为备用D（69)排掉排掉 有荧光菌的藻必须排掉有荧光菌的藻必须排掉6、藻池质量控制标准、藻池质量控制标准THE END THANK YOU!