输血科抗人球蛋白试验技术操作规程.docx

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1、输血科抗人球蛋白试验技术操作规程1、目的：规范实验室工作人员的操作程序，确保实验过程及结果的准确性与可靠性。2、范围：本规程适用于本实验室抗人球蛋白试验操作。3、职责3.1工作人员对抗人球蛋白试验技术操作应熟悉掌握。3.2输血科负责人应对抗人球蛋白试验技术操作的进行质量控制。4、程序4.1基本原理抗人球蛋白实验是由COOnIbS等于1945年发明的经典的血清学方法，又简称为COombS实验，主要用于检测IgG、IgA等抗体参与的抗原-抗体反应，也可测定补体组分C3、C4片段参与的免疫反应，包括直接抗人球蛋白实验（DAT）和间接抗人球蛋白实验（IAT）ODAT用于检测在患者体内致敏红细胞的不完全

2、抗体和（或）补体。IAT用于检测血清中的不完全抗体，即在体外致敏人红细胞，再与抗人球蛋白试剂反应。抗人球蛋白实验主要用于检测血清中的不完全抗体和（或）补体。大部分IgG抗体与具有相应抗原的红细胞在盐水介质中能够特异性结合，但不发生肉眼可见的凝集反应，该类抗体称为不完全抗体。不完全抗体主要是IgG类，IgG为7S的单体结构，分子量小，在盐水介质中只能致敏红细胞，不能出现可见的凝集反应；加入抗球蛋白试剂后，后者的Fab片段可与包被在红细胞上的球蛋白分子的Fc片段结合，从而通过抗球蛋白分子的搭桥作用（桥连作用）使不完全抗体与具有相应抗原的红细胞产生肉眼可见的凝集反应。4.2临床应用DAT：胎母血型不

3、合新生儿溶血病的诊断、免疫溶血性输血反应的调查、自身免疫性溶血性贫血的诊断及药物诱发型溶血病的诊断等。IAT：血型鉴定、交叉配血、器官移植、妊娠所致免疫性血型抗体以及自身免疫性血型抗体的检出和鉴定等。4.3抗人球蛋白试剂抗人球蛋白试剂主要有多特异性和单特异性的区分，多特异性抗人球蛋白试剂主要含有抗-IgG和抗-C3d。单特异性抗人球蛋白试剂主要含有某一种抗人球蛋白成分，例如抗TgG、抗TgA、抗TgM、抗-C3d等试剂。进行实验时应仔细阅读试剂说明书。4.4直接抗人球蛋白实验患者体内若有与自身红细胞抗原不相合的不完全抗体存在，可使红细胞处于致敏状态，通过加入抗人球蛋白试剂，与红细胞上吸附的不完全抗体结合，在致敏红细胞之间搭桥，出现肉眼可见的凝集。