乙肝两对半与乙肝DNA定量检测结果差异原因.docx

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1、乙肝两对半与乙肝DNA定量检测结果差异原因1 .乙肝两对半检测临床意义中文名字英文名字阳性意义乙肝表面抗原HBsAg阳性表示感染了乙肝病毒。并不反映病毒有无复制、复制程度、传染性强弱。乙肝表面抗体HBsAb(nHBs)阳性表示对乙肝病毒的感染具有保护性免疫作用。乙肝疫苗接种者，若仅此项阳性，应视为乙肝疫苗接种后正常现象。是中和性抗体标志。乙肝e抗原HBeAg阳性说明传染性强。持续阳性3个月以上则有慢性化倾向。乙肝e抗体HBeAb(lnHBe)阳性说明病毒复制减少，传染性弱，但并非没有传染性。乙肝核心抗体HBCAb(抗HBc)阳性说明既往感染和现症感染乙肝病毒。2 .乙肝两对半检测结果分析3 .

2、HBVDNA定量检测的临床意义HBVDNA定量检测可反映病毒复制水平，主要用于慢性HBV感染的诊断、治疗适应证的选择及抗病毒疗效的判断。3.1 判断传染性的高低荧光实时定量PCR技术检测外周血HBVDNA水平，即病毒水平，可反映病毒复制是否活跃。HBVDNA的检测值可以IUmL或拷贝mL表示，根据检测方法的不同，1IU相当于56拷贝。若在检查中发现HBSAg阳性，可检查HBVDNA以确定传染性的高低-BeAg阳性者传染性强，易发生传播。无条件行定量检测HBVDNA时，如HBeAg阳性，则可视为高病毒水平。3. 2评价乙肝病毒携带者的疾病进展方向慢性HBV感染的自然史一般划分为4个时期，即免疫耐

3、受期、免疫清除期、免疫控制期和再活动期小。但并非所有的HBV感染者都经过以上4期，也不一定是连续的，而且此分期并不直接等同于抗病毒治疗的标准和适应证。 .免疫耐受期（慢性HBV携带状态）：HBVDNA水平高（通常HBVDNA2XlO7IUmL）o .免疫清除期（HBeAg阳性CHB）：高HBVDNA水平（通常HBVDNA2XlO4IUmL）o .免疫控制期（非活动性HBsAg状态）：低HBVDNA水平（HBVDNA2103IUmLo临床医生可根据患者的HBV血清学标志物、HBVDNA定量及其他检查结果诊断患者所处的疾病进展阶段。3 .3用于判断是否需要抗病毒治疗抗病毒治疗目前主要依据血清HBV

4、DNA.ALT水平和肝脏疾病严重程度，同时需结合年龄、家族史和伴随疾病等因素，综合评估患者疾病进展风险，决定是否需要启动抗病毒治疗。4 .乙肝两对半与乙肝DNA定量检测结果差异原因4.1 乙肝大三阳，HBVDNA阴性原因：.核甘酸类似药物的抗病毒治疗，其可以迅速地抑制HBVDNA复制，使血液中HBVDNA浓度出现相应下降并低于试剂检测下限，HBSAg和HBeAg循环可能会受影响，但却不会出现同步迅速下降，甚至影响不大。即HBVDNA的下降通常并不一定伴随有HBsAg和HBeAg的持续下降。.检测基因片段变异，出现此种情况非常罕见。4.2乙肝小三阳，HBVDNA阴性原因：.患者免疫力损伤，导致H

5、BV复制增强。.经过治疗后，患者HBeAg阴转，但HBV载量仍在较高水平。可能是前C区变异，导致HBeAg合成终止。但并不影响HBV复制。4.3乙肝两对半全阴，HBVDNA阳性原因：.患者处于感染早期，HBVDNA检测窗口期早于乙肝两对半。4.4抗HBC阳性或抗-HBe,抗HBC阳性，HBVDNA阳性原因：.可能因为患者过去感染乙肝病毒后，仍有少许病毒残留。一般HBVDNA载量较低。.HBsAg假阴性。4.5HBSAg阳性,HBVDNA阴性原因:.核甘酸类似药物的抗病毒治疗,其可以迅速地抑制HBVDNA复制，使血液中HBVDNA浓度出现相应下降并低于试剂检测下限，HBSAg和HBeAg循环可能

6、会受影响，但却不会出现同步迅速下降，甚至影响不大。即HBVDNA的下降通常并不一定伴随有HBsAg和HBeAg的持续下降。.试剂灵敏度不足。4. 6HBSAg阴性,HBVDNA阳性 .HBsAg含量低于所用方法的测定下限之下。如感染的窗口期、急性期后或恢复期、自限性感染末期的携带。 .编码HBsAg的HBVS基因的突变。 .HCV与HDV重叠感染对HBV复制和（或）HBsAg的表达的抑制作用。 .测定方法所用抗体对HBV不同基因型检测敏感性的不同。5. 乙肝两对半检测影响因素及应对措施严重溶血血红蛋白中含有血红素基团，在以HRP为标i己酶的酶促化学发光测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其

7、就很容易在温育过程中吸附于固相，从而使后面加入的HRP底物反应值偏高，造成假阳性。严重溶血标本禁用细菌污染1,细菌的生长，所分泌的一些醇可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用：2,一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的半乳糖首酶本身会对用相应IW作标记的测定方法产生非特异性干扰。采血后24小时内完成检测。标本凝固不全在血液还未开始凝冏时即强行离心分离血清，使血清中仍残用部分纤维蛋白原，易造成假阳性结果。标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。原因应对措施游响因素6. HBVDNA定量检测影响因素影响因素应对措施假阳性污染极其微量的污染即可造成假阳性防污染措施：1,实验室硬件要求：2,试剂防污染体系。假阴性核酸提取方法不同煮沸裂解法提取效率偏低，易造成核酸损失和污染。采用无需加热的磁珠法和一步法。假阴性核酸提取量少或提取不到DNA降解，反复冻融，操作剧烈DNA被打断，未抑制内源核酸酶活性，裂解不充分,洗涤时去失，取材少。内标监控核酸提取和扩增全过程假阴性肝素肝素是PCR反应的抑制剂，肝素能抑制聚合酶的活性.不使用含肝素的抗凝管。假阴性标本存放时间过长细胞中筋降解DNA48H内不能检测，及时分离血清或血浆，储存在-20以下。