过敏源检测ppt课件.ppt

《过敏源检测ppt课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《过敏源检测ppt课件.ppt（74页珍藏版）》请在三一文库上搜索。

1、1 1我武生物市场部我武生物市场部新员工产品培训第五章第五章第五章第五章 过过敏原敏原敏原敏原检测检测2 2过敏原过敏原l过敏原/变应原-常见诱因,凡经吸入或食入等途径进入体内后能引起IgE类抗体产生并导致变态反应的抗原性物质l过敏原种类p食入性：牛奶、鱼虾、鸡蛋等；p吸入性：尘螨、花粉、动物皮屑、真菌、昆虫等；p接触性：油漆、清洁剂、乳胶等；p药物过敏：磺胺类、抗生素类等；p昆虫毒液3 3过敏原检测的临床意义过敏原检测的临床意义（1 1）过敏性疾病的）过敏性疾病的诊断诊断必须明确过敏原必须明确过敏原p典型的过敏症状病史：典型的过敏症状病史：症状、发作环境、家族遗传史、症状、发作环境、家族遗传

2、史、体格检查等体格检查等p试验诊断：试验诊断：过敏原检测试验过敏原检测试验ARIA2008：变应性鼻炎诊断是根据典型的过敏症状病史和与其相一致的试验诊断结果而共同做出的4 4过敏原检测的临床意义过敏原检测的临床意义（2）过敏性疾病的过敏性疾病的治疗治疗必须明确过敏原必须明确过敏原过敏性疾病的治疗是一项系统工程，WHO推荐“四位一体”的最佳治疗方案。p避免过敏原p对症药物治疗：抗炎、缓解症状p变应原特异性免疫治疗：SLIT、SCITp患者教育5 5过敏原检测的临床意义过敏原检测的临床意义（3 3）给指导患者提供依据）给指导患者提供依据p针对性地对患者进行教育，指导有效避免过敏原p早期确定出有可能

3、发展成变态反应疾病的高危婴幼儿，提供机会来防止疾病加重6 6尘螨是国内的主要过敏原尘螨是国内的主要过敏原单一尘螨过敏原检测的意义单一尘螨过敏原检测的意义l尘螨是国内最主要的过敏原，80%以上的过敏性疾病患者都对尘螨过敏。l多重过敏患者如其症状病史与尘螨相关性高，单一尘螨脱敏亦可保证脱敏疗效。l目前国内上市用于脱敏治疗的药物仅针对尘螨过敏患者l其他常见的食物与花粉等过敏原可通过问诊确定并加以避免。l单一尘螨点刺普查价格便宜，更易在科室开展。l鼻部：鼻痒，阵发性喷嚏，清水样鼻涕，鼻塞，嗅觉障碍，天转凉流鼻涕，天转热打喷嚏。l咽喉：慢性咽喉炎l肺部：慢性咳嗽，咳嗽，呼吸困难同时们有喘息，常在清晨或夜

4、间发生l眼部：不同程度眼痒，异物感，畏光流泪，充血，灼烧干涩，伴有分泌物l皮肤：痛痒，有干燥史，红斑，大小不等的小丘疹或水肿，渗出或结痂，表皮剥落、苔藓化 哪些症状需尘螨过敏原检测？哪些症状需尘螨过敏原检测？9 9临床使用的过敏原检测方法临床使用的过敏原检测方法l体外实验：主要是特异性IgE检测（血检）l体内试验：主要是皮肤点刺试验p激发试验 鼻粘膜激发、口腔激发、支气管激发、食物激发、药物激发、现场激发p皮肤试验划痕试验；点刺试验；挑刺试验；皮内试验；特应性斑贴试验1010基于基于sIgE水平的检测方法水平的检测方法1111血清检测血清检测(详见竞品分析详见竞品分析)l体外检测，血清里游离的

5、IgEpImmunoCAPp“敏筛”过敏原检测系统（AllergyScreen）p欧蒙、全自动酶免仪(e-STAR plus)等l目前普遍采用标记免疫分析技术p放射性标记免疫分析法（放免法）p酶标记免疫分析法（酶标法）p酶荧光免疫标记分析法（CAP检测系统）1212变应原检测-体外sIgE检测1313血清体外血清体外sIgE检测原理检测原理96孔ELISA板1414sIgE诊断标准诊断标准l血清sIgE水平分级标准血清sIgE水平（KU/L）分级0-0.350级0.35-0.71级0.7-3.52级3.5-17.53级17.5-504级50-1005级1006级1515体内试验体内试验l激发试

6、验（结膜、支气管、口腔）l皮肤试验 (问世于1909年)p划痕试验（Scratch tests）p点刺试验（Prick tests）p挑刺试验（Puncture tests）p皮内试验（Intradermal skin tests）p特应性斑贴试验（Atopy patch tests）：型过敏性疾病1616激发试验激发试验l鼻激发、支气管激发、口腔激发、粘膜激发l金标准l操作繁琐，存在危险性1717皮肤点刺试验皮肤点刺试验Skin Prick Tests(SPT)1818皮肤点刺试验的优势皮肤点刺试验的优势lWAO认为皮肤试验是检测IgE的金标准，是准确的IgE检测方法；GA2LEN和ARIA

7、认为SPT是诊断患者是否过敏的首选方法；EAACI推荐为最佳体内诊断方法，现为欧美公认的最方便、最有效的过敏原诊断方法l安全性高，操作简便，快速（10-15分钟出结果）l灵敏度高，临床相关性好l患者几乎无痛苦，小儿也能接受l费用低1919适应症与禁忌症适应症与禁忌症l适应症pIgE介导的变应性疾病的诊断，结合患者症状、病史，可以作出致敏原的确诊p从婴幼儿到老年患者都可以使用，但要注意结果解读l禁忌症p无已知禁忌症p患严重影响全身状态的疾病；p试验部位发生病理变化。当患者手部异位性皮炎发作时，可能出现假阳性反应。在这种情况下，应代之在背部进行点刺试验，或待疾病缓解后，才进行点刺试验p怀孕期；p接

8、受受体阻滞剂或ACE抑制剂治疗者；p肾上腺素禁忌症2020SPT原理原理l皮肤点刺试验是一种体内特异性免疫学检测方法皮肤点刺试验是一种体内特异性免疫学检测方法局部皮肤反应：毛细血管扩张(红斑)，通透性增强，渗出增加，最后出现风团和红晕反应2121SPT的安全性的安全性l点刺过敏原进入皮肤的量为1-510-9克（纳克级）l吸入性过敏原点刺严重不良反应少，因为日常经常接触，有耐受能力，日常过敏原量甚至为微克级l询问有无严重食物过敏史2222不良反应及其处理不良反应及其处理l不良反应p可能发生局部过敏反应，如瘙痒，但很轻微p系统性不良反应发生率极低l处理方法p一般不需用药，可在1小时内自行缓解p反应

9、强烈者，可口服抗组胺药或局部使用激素抹膏l建议p询问过敏史，对高敏患者应准备好休克抢救措施p建议诊室中准备好药物（如1mg/ml肾上腺素），以治疗可能出现的过敏反应2323过敏原检测方法的比较过敏原检测方法的比较特异性IgE检测体内试验皮肤激发试验优点：灵敏度高，临床相关性好操作简单、快速 费用低缺点：影响因素多(如服药、划痕症等)皮肤点刺试验特异性IgE优点：影响因素少（如不受药物使用的影响）灵敏度较好缺点：出结果较慢 费用高两种方法同时检测准确性最高两种方法区别：皮肤点刺试验检测的是结合在肥大细胞上的sIgE、炎症的释放及靶器官对炎症介质的敏感性；血清检测是检测的游离在血清中的sIgE与过

10、敏性症状最直接相关的是与细胞结合的sIgE对于吸入物变应原，皮肤试验是一线诊断方法之一。当其结果与临床病史相关时，无需进行体外试验。如果结果不一致，血清可能有助于对患者作出更好诊断l首选皮肤点刺试验，结果呈阳性且与病史相关性强则无需再进行血检l如强烈提示过敏而点刺呈阴性、或个别患者不适合皮肤点刺，建议血检l尘螨与病史具有相关性的前提下，尘螨点刺或者血检结果呈阳性，都需考虑脱敏治疗2424尘螨过敏原检测方法的选择尘螨过敏原检测方法的选择2525畅点畅点：Spotterl商品名：畅点l通用名：粉尘螨皮肤点刺诊断试剂盒p阳 性 对 照：磷酸组胺溶液p阴 性 对 照：生理盐水溶液p 配套：一次性使用采

11、血针（片式点刺型）l国药准字：S20080010l适应症：p用于点刺试验，辅助诊断因粉尘螨致敏引起的型变态反应性疾病2626点刺视频点刺视频点刺视频点刺视频2727试验前试验前-试剂准备试剂准备l变应原及阴、阳性对照变应原及阴、阳性对照p点刺液p阴性对照:生理盐水溶液p阳性对照:磷酸组胺溶液l点刺液应储存在点刺液应储存在2 28 8 C C的冷藏柜中的冷藏柜中l一次性使用采血针（片式点刺型）一次性使用采血针（片式点刺型）Step 12828试验前试验前-询问询问l询问患者服药情况p如果患者符合以下情况，皮肤点刺试验应延迟如果患者符合以下情况，皮肤点刺试验应延迟近3日内未服用抗组胺药；息斯敏等长

12、效抗组胺药需停药7天以上。抗组胺成分常见于抗过敏药、部分感冒药等近1日内未服用全身性长效糖皮质激素药物近1日内未在试验部位皮肤上使用糖皮质激素类药物部分用于治疗过敏的中药可能也有抗炎的作用如果使用了浴液/保湿剂/香波，患者需清洗臂部Step 229293030Allergy2012：EAACI POSITION PAPER，Practical guide to skin prick tests in allergy to aeroallergens3131试验前试验前-询问询问l是否有皮肤划痕症p建议改用血清sIgE检测p如皮肤点刺过程中发现，可延长点刺结果观察时间。一般来说，皮肤划痕征所致风

13、团比点刺所致风团消失得更快。可等阴性对照风团消失后观察。l皮肤是否对酒精过敏p常见于低龄儿童。这种患者可改用生理盐水进行皮肤清洁Step 23232试验前试验前-询问询问l是否有过敏性休克史或严重的过敏不良反应p考虑sIgE检测l是否有晕针Step 23535晕针与过敏性休克的区别晕针一般只在注射当时或者数分钟内发生，过敏性休克可即时发生，也可在注射后数小时内发生晕针症状（晕倒）体征（血压下降，慢慢恢复）都是先重后轻，过敏性休克先轻后重过敏性休克一般都有心动过速，脉搏快、弱，呼吸正常至深呼吸；而晕针是心率减慢，一般无心动过速，脉搏表现慢而饱和，因气道阻塞而发生有声呼吸过敏性休克有时可先见皮疹，

14、以及荨麻疹、血管性水肿、支气管痉挛等过敏症状，点刺发生过敏性休克时一般会伴随点刺部位的风团、红晕的扩散。3636过敏性休克预案过敏性休克预案3737点刺操作步骤及注意事项点刺操作步骤及注意事项l患者手臂放松患者手臂放松,平放于桌上，用酒精清洁其前臂掌侧皮肤。平放于桌上，用酒精清洁其前臂掌侧皮肤。酒精过敏者可采用生理盐水清洁。酒精过敏者可采用生理盐水清洁。l注意擦拭方向注意擦拭方向l自然风干自然风干Step 31、常规消毒/清洁3838l依次将变应原点刺液、阴性对照、阳性对照滴在消毒后的皮肤上l液滴之间距离为3-5厘米（间距不可小于2厘米）防止点刺后的红晕互相 融合l只准许液滴碰到皮肤，瓶盖和滴

15、管不应碰到2、滴加点刺液39393、点刺操作l绷紧皮肤，避开血管，点刺针透过液滴垂直刺入皮肤（刺破皮肤，使针尖下面有少量试液进入皮肤（深度1mm），点刺针停留1秒钟后提起，不同的液滴需更换新的点刺针。40404、拭去残液l点刺操作2-3分钟后，拭去皮肤上的残液，注意不要交叉污染41415、观察结果l点刺10-15分钟后观察点刺结果（皮试反应达到高峰），测量阴性对照、粉尘螨点刺液、阳性对照的点刺部位产生风团和红晕的面积，并记录。42426、结果判断l临床比较风团面积最简便的方法是目测，以阴性对照风团或红晕面积做校正，比较粉尘螨与阳性对照风团或红晕的面积，若粉尘螨风团和红晕面积为阳性对照面积的25

16、以上，即可判断该粉尘螨阳性。4343阳性阳性户尘螨户尘螨粉尘螨粉尘螨阴性阴性艾蒿艾蒿葎草葎草法国法国梧桐梧桐阴性阴性阳性阳性粉尘螨粉尘螨户尘螨户尘螨葎草葎草蒿属花粉蒿属花粉法国梧桐法国梧桐4444如何精确测量风团和红晕的面积大小 1.用油性笔描绘风团及红晕四周边线2.然后用透明胶带将油性笔描绘的圈转移到mm心电图纸上3.比较粉尘螨及阳性对照的风团所占格子数来确定该患者对粉尘螨变应原反应强度4545操作步骤要点回顾l问诊（服药、划痕征、严重过敏史、晕针、酒精过敏）l消毒/清洁l划号（点刺液种类多时可在清洁皮肤后划号，最后滴加阳性对照）l点（部位、间距、瓶口勿触皮肤、交叉污染）l刺(绷紧皮肤、用

17、力适当、刺后停顿、交叉污染（更换点刺针）l拭残液(交叉污染)l看结果(15min、风团)4646常见问题常见问题-1l阳性对照/阳性结果出现阴性反应(假阴性）p操作手法：点刺针未刺破表皮，阳性对照液未进入皮肤p用药：点刺前服用抗阻按药、皮质类激素等p其他疾病减弱了皮肤反应，如神经系统和感染性疾病（如麻风病）可导致SPT出现假阴性皮肤反应性差p局部变应性鼻炎p点刺液存放不当或时间过长而失效4747常见问题常见问题-2l阴性对照出现阳性结果阴性对照出现阳性结果(假阳性）假阳性）p试验中，与阳性对照液或粉尘螨液混合造成的干扰；p皮肤划痕症及压力性荨麻疹的影响建议试验前先对患者做简单的皮肤划痕症试验，

18、并询问患者有无荨麻疹病史；皮肤划痕症患者建议使用血清IgE检测。如果点刺后发现是皮肤划痕症患者（出现假阳性），建议阴性对照风团（划痕症风团）消失后观察结果，或者扣除划痕风团后计算。p邻近强反应部位的非特异性反应增强p点刺时用力过度4848皮肤划痕症皮肤划痕症l原则上，应在试验前48小时停止服用抗组胺药物（长效抗组胺药物需停药21天）l钝园针用力划皮，出现三联反应（tripleresponse）（1）315红线条（2）1545红线条两侧现红晕（3）13隆起成苍白或淡红色风团性线条l具此三联征，并且观察3-5min依然不消退，叫皮肤划痕症阳性。4949常见问题常见问题-3l无症状人群的点刺/血检阳

19、性pARIA2008：SPT或者血清sIgE阳性并不意味着与临床症状相关。无症状人群点刺阳性比例很高pARIA2008：SPT阳性的无症状的人群可预测变态反应性疾病包括哮喘的发生p注：点刺的适应症是对有症状病史的患者进行疾病确诊5050特异性体质者1特异性体质者2特异性体质者3正常情况点刺、血清阳性表现症状者皮肤反应差的过敏患者sIgE水平低于阳性临界值的过敏患者皮肤反应，血清检查都假阴性的过敏患者点刺阳性血清阳性表现出过敏性症状皮试、血清检测与过敏症状的关系5151常见问题常见问题-4l点刺几个+就可以进行p过敏性疾病的诊断：症状病史；过敏原检测（点刺或血清sIgE）阳性；阳性过敏原与症状病

20、史相关p脱敏原：与症状病史相关的过敏原p脱敏与否应看脱敏原与患者的症状病史是否相关，而不是看点刺的级别问题：如何判断相关性？5252常见问题常见问题-5lASIT随访过程中是否需要SPT（allergy 2012，Position Paper）？pASIT能够降低SPT对吸入性过敏原的反应，但在临床实践中，SPT不能用来评估ASIT的疗效，而且也不能通过SPT反应来决定ASIT的终止p注：重复进行SPT试验主要用于检测患者是否出现新的过敏5353常见问题常见问题-6l过敏原检测阳性解读p点刺阳性反应的强弱，反映的是受试者皮肤点刺部位的皮肤敏感程度，并不表示疾病的严重程度p点刺阳性级别与受试者过

21、敏症状的严重程度有关系（皮肤反应越强，受试者由该阳性过敏原引起过敏的临床相关的可能性越大），但不是正相关p血清sIgE的体外检测也是如此，如很多致敏个体sIgE水平低于临界值（0.35KU/L）,而很多无症状患者却有很好的sIgE5454过敏原检测分级 症状严重程度l过敏症状严重程度的影响因素过敏症状严重程度的影响因素psIgE抗体（游离的sIgE、结合的sIgE）p介质的释放p靶器官对介质的反应p服药影响p非特异性过敏5555过敏原检测分级 症状严重程度l皮肤点刺结果级别的影响因素皮肤点刺结果级别的影响因素p患者个体皮肤反应、点刺部位p服用药物p操作手法p年龄影响p季节5656常见问题常见问

22、题-7l血清sIgE与点刺检测都属于定性检测症状明确，血清sIgE与皮肤点刺（采用标准化的变应原）均能明确引起患者过敏的变应原，但上述两者都是定性检查，其检测结果只能确定病人是否过敏，但分级并不代表过敏的严重程度定性检查为什么都是定性虽然与疾病相关性比较好，也有分级，但点刺影响因素太多，严重度还是个相对值，同时风团的绝对大小受患者个体皮肤反应、点刺部位、季节、操作手法、药物、年龄影响，所以定量不准确，只能定性点刺血清血清检测所提到的定量检测，是定sIgE的量，而不是过敏强度的量，通常sIgE值与症状严重程度无相关性（ARIA），所以也只是定性5757l体内检测体内检测p北京协和医院pALKpN

23、HDl血清检测血清检测pUniCAP、ImmunoCAPp“敏筛”、欧蒙p全自动酶免仪(e-STAR plus)国内市面上其他诊断产品国内市面上其他诊断产品5858l体内检测体内检测（非标准化，变应原产品种类繁多）p皮内注射p皮肤点刺北京协和院内皮试制剂北京协和院内皮试制剂5959l皮肤点刺液（Soluprick）p2ml/瓶4瓶/盒户尘螨变应原点刺液；粉尘螨变应原点刺液；阳性对照点刺液；阴性对照点刺液p2-8储存p有效期为生产日期后的12个月；小瓶首次开启后的有效期为6个月安刺安刺SQ6060阿罗格（阿罗格（NHD）l皮肤点刺液p国内提供多种变应原（50种以上常用20种），另外提供测试盒G（

24、用于存放点刺试液瓶，可放30瓶，内有一块塑料板，一张贴在盒盖内面的变应原目录表），测试盒K（增加了存放点刺试液瓶的数量，可放72瓶）及点刺针p一般分吸入组、食物组和水果组p地方械字号证6161l通过检测sIgE筛查过敏原，酶联荧光免疫法lImmunoCAP 100、ImmunoCAP 250l检 测 试 剂：总 IgE、吸 入 性 过 敏 原 过 筛 试 验（Phadiatop）、食入性过敏原过筛试验（fx5）、600种左右的sIgE检测、嗜酸细胞阳离子蛋白（ECP）、类胰蛋白酶l号称“金标准”l价格昂贵，80元/每个过敏原l有医疗设备批文，但是试剂没有证l无法大量普及 UniCAP、Immu

25、noCAP62626363l1911年，Pharmacial几经买卖易主1995年，Pharmacia公司美国普强药厂合并为Pharmacia&Upjohn，公司总部在瑞典Uppsala，2002年被Pfizer收购l2006年Pharmacia诊断更名为Phadial2010年12月Phadia收购南京维康乐贸易实业有限公司(WKL)，WKL原属于南京美瑞制药有限公司（2011年1 月被GSK收购）l2011年8月，赛默飞世尔科技(Thermo Fisher Scientific）收购Phadia6464敏筛过敏原检测系统（敏筛过敏原检测系统（AllergyScreen）l德国Medwiss

26、公司l上海领检科技有限公司独家代理（总代），各地存在分代理。l用于检测sIgEl20-30元/每个过敏原l非自动化，需要手工操作，考验技术人员的水平65656666德国欧蒙医学实验诊断股份公司产品德国欧蒙医学实验诊断股份公司产品l欧蒙中国总部：欧蒙（北京）医学诊断技术有限公司，是欧蒙的亚洲全资子公司。2001年成立，负责亚洲的研发、生产、销售和技术服务等业务 l国食药监械（进）字2011第3400675号l主要在检验科l主要产品67676868北京海瑞祥天生物科技有限公司北京海瑞祥天生物科技有限公司北京海奥生物北京海奥生物(HOB)公司代理产品公司代理产品l欧博克：过敏原特异性IgE抗体检查试

27、剂盒（酶联免疫，食物吸入等sIgE，过敏原膜条软件判读）l拜美克：指血食物过敏原IgG抗体（争议很大）l福克Allerg-O-LIQl福克过敏原体外检测试剂（总IgE、sIgE、sIgG、sIgG4）l过敏反应体外检测试剂盒（IVT Allergy Screen）l主要做检验科69697070l酶联免疫吸附法l主要在检验科浙大迪迅生物基因工程有限公司浙大迪迅生物基因工程有限公司7171l拜发分析系统销售（北京）有限公司l2005年成立l体外诊断仪（HISTAREADER（HR）501l原理基础：过敏原诱发嗜碱性粒细胞脱颗粒(组胺释放)德国拜发德国拜发R-Biopharm公司公司7272l德国BICOM-2000型生物共振治疗仪（百康生物仪）（用于检测过敏原并进行脱敏治疗）,筛查过敏原300元/次,治疗100200元/次/周l升级版莫拉，号称可同时检测1200种过敏原生物核磁共振治疗仪生物核磁共振治疗仪-争议很大争议很大7373本章节知识要点本章节知识要点l皮肤点刺更方便、快捷，相关性更好l相关性判定充分的前提下，尘螨点刺或者血检阳性，都需考虑脱敏治疗l尘螨致敏的多重过敏患者，使用畅迪脱敏，对其它过敏原引发的过敏同样有效l划痕症患者的点刺试验需延长结果判读时间l尘螨点刺阳性即可脱敏，阳性反应强弱不反映疾病严重程度。7474